【摘 要】
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目的复性黄牛朊蛋白原核表达产物,分析复性蛋白的活性,以获得有活性的牛重组朊蛋白。方法构建并诱导表达黄牛朊蛋白基因重组菌,复性其包涵体裂解物,对GST-BoPrP(93~241)(Q234R)复
【机 构】
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兰州大学第二医院检验科,甘肃农业大学动物医学院,中国农业科学院兰州兽医研究所,甘肃省疾病预防控制中心
【基金项目】
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高校博士点专项科研基金(20060733006), 家畜疫病病原生物学国家重点实验室基金(2008-2009)
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目的复性黄牛朊蛋白原核表达产物,分析复性蛋白的活性,以获得有活性的牛重组朊蛋白。方法构建并诱导表达黄牛朊蛋白基因重组菌,复性其包涵体裂解物,对GST-BoPrP(93~241)(Q234R)复性产物进行GSTrap FF柱层析纯化,通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和免疫印迹观察其提纯和复性效果。结果重组菌可表达分子质量约为42.4 ku的目的蛋白,包涵体裂解物经过透析复性后,可获得较高纯度的复性目的蛋白。各复性产物和纯化的GST-BoPrP(93~241)(Q234R)蛋白经免疫印迹鉴定,发现仅分子
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