【摘 要】
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目的 探讨转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1,TGF-β1）对在牙龈卟啉单胞菌来源脂多糖（lipopolysaccharide from Porphyromonas gingivalis,Pg-LPS）刺激模拟炎症状态下的人牙周膜成纤维细胞（human periodontal ligament fibroblasts,hPDLFs）的调控作用。方法 获取
【基金项目】
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国家自然科学基金项目（81570989）； 浙江省教育厅一般科研项目（Y202147690）； 杭州市医学重点学科建设项目资助（OO20200387）;杭州市医学重点学科建设项目资助（OO20200387）～～；
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目的 探讨转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1,TGF-β1）对在牙龈卟啉单胞菌来源脂多糖（lipopolysaccharide from Porphyromonas gingivalis,Pg-LPS）刺激模拟炎症状态下的人牙周膜成纤维细胞（human periodontal ligament fibroblasts,hPDLFs）的调控作用。方法 获取hPDLFs并进行免疫组化鉴定，通过qRT-PCR与CCK-8确定Pg-LPS的刺激浓度。将hPDLFs分成4组：空白对照组，单纯100μg/mL Pg-LPS；低浓度组，1 ng/mL TGF-β1+100μg/mL Pg-LPS；中浓度组，10 ng/mL TGF-β1+100μg/mL Pg-LPS；高浓度组100 ng/mL TGF-β1+100μg/mL Pg-LPS。CCK-8检测细胞增殖情况；划痕实验与Transwell小室实验检测hPDLFs细胞迁移能力；流式细胞术检测hPDLFs的细胞周期；qRT-PCR检测hPDLFs的转录因子叉头盒p3（forkhead/winged helix transcriptional factor p3,Foxp3）、白细胞介素6（interleukin-6,IL-6）及EB病毒诱导基因3（Epstein-Barrvirus-induced gene 3,EBI3）mRNA表达；Western blot检测h PDLFs的Foxp3、IL-6及EBI3蛋白表达。结果 免疫组化鉴定显示抗波形丝蛋白阳性及抗角蛋白阴性；Pg-LPS浓度为100μg/mL时，hPDLFs中IL-6 mRNA表达相比空白对照组显著上升（P＜0.000 1）且细胞增殖能力下降（P＜0.000 1），所以选择100μg/mL Pg-LPS用于模拟炎症状态。10、100 ng/mL TGF-β1能提高炎症状态下h PDLFs的增殖能力（P＜0.000 1）;1、10、100 ng/mL TGF-β1能促进炎症状态下hPDLFs的迁移能力（P＜0.000 1）;1、10、100 ng/mL TGF-β1可加快炎症状态下hPDLFs的细胞周期（P＜0.000 1）;1、10、100 ng/mL TGF-β1可抑制炎症状态下hPDLFs的IL-6基因和蛋白表达量（P＜0.000 1）,1、10 ng/mL TGF-β1可提高炎症状态下hPDLFs的EBI3基因及蛋白表达量（P＜0.000 1）,1、10 ng/mL TGF-β1可提高炎症状态下hPDLFs的Foxp3基因表达量，10 ng/mL TGF-β1可提高Foxp3蛋白表达量（P＜0.05）。结论 TGF-β1可促进炎症状态下hPDLFs的增殖及迁移能力、上调EBI3表达，可能与转录因子Foxp3表达有关。
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