【摘 要】
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SOD即超氧化物歧化酶(superoxide dismutase),是存在于各种生物体内的一种重要的氧自由基清除剂,因对机体有较高防护与保健价值而深受人们关注.SOD可以作为功能性食品的一种基料,拥有广泛的应用前景,而重组巴斯德毕赤酵母能够高效表达SOD蛋白,从而满足市场需求.以实验室构建的产SOD重组菌为出发菌株,本文研究其摇瓶发酵的工艺条件,已期达到目的蛋白的最优表达水平,进而进行5L高密度发
【机 构】
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福州大学生物工程研究所 福州 350002
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SOD即超氧化物歧化酶(superoxide dismutase),是存在于各种生物体内的一种重要的氧自由基清除剂,因对机体有较高防护与保健价值而深受人们关注.SOD可以作为功能性食品的一种基料,拥有广泛的应用前景,而重组巴斯德毕赤酵母能够高效表达SOD蛋白,从而满足市场需求.以实验室构建的产SOD重组菌为出发菌株,本文研究其摇瓶发酵的工艺条件,已期达到目的蛋白的最优表达水平,进而进行5L高密度发酵.研究包括摇瓶条件下的生长及诱导温度、甲醇流加、供氧、诱导时间和5L高密度发酵条件下不同诱导pH值的影响.结果如下：在500mL三角瓶容器中,培养基体积为100mL摇瓶条件下,每天添加甲醇浓度为2.5％,生长和诱导温度均为30℃,诱导时间为72h,菌株蛋白表达量最优；在5L发酵罐条件下,诱导pH值为6.5,诱导时间为196h时,菌株可以高效表达蛋白,单位酶活为摇瓶的112倍.本实验从菌株摇瓶发酵工艺条件着手,并在5L罐上得到高效表达,可以作为大规模生产的前期基础.
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