【摘 要】
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目的 氯化钴是散发性神经退行性疾病的潜在环境风险化学物之一.组蛋白乙酰化稳态失衡是神经退行性疾病的潜在机制,但其与环境神经毒物作用的关系不明.因此,本研究拟探讨组蛋白乙酰化修饰在氯化钴致神经细胞损害中的作用及机制.方法(1)通过体外培养人脑神经胶质瘤细胞(SHSY5Y),使用不同浓度和作用时间的氯化钴处理SHSY5Y 细胞.CCK-8 检测细胞活力变化,蛋白质免疫印迹分别检测组蛋白H3、H4 乙酰
【机 构】
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福建医科大学公共卫生学院,福州,350122
【出 处】
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中国毒理学会表观遗传毒理专业委员会第一次学术大会
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目的 氯化钴是散发性神经退行性疾病的潜在环境风险化学物之一.组蛋白乙酰化稳态失衡是神经退行性疾病的潜在机制,但其与环境神经毒物作用的关系不明.因此,本研究拟探讨组蛋白乙酰化修饰在氯化钴致神经细胞损害中的作用及机制.方法(1)通过体外培养人脑神经胶质瘤细胞(SHSY5Y),使用不同浓度和作用时间的氯化钴处理SHSY5Y 细胞.CCK-8 检测细胞活力变化,蛋白质免疫印迹分别检测组蛋白H3、H4 乙酰化水平,以及组蛋白乙酰转移酶和去乙酰化酶蛋白表达水平.(2)组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A 预处理后,氯化钴处理SHSY5Y 细胞,hoechst33258 检测细胞凋亡情况,蛋白质免疫印迹检测凋亡相关基因(Caspase-3、cleaved Caspase-3、Caspase-9、cleaved Caspase-9、Bcl2 和Bax)和阿尔茨海默症相关基因(APP,BACE1,PSEN1,NEP 和HIF-1α)的蛋白表达情况,酶联免疫试剂盒检测Aβ1-40/42 表达水平.结果 氯化钴暴露后,以时间-剂量依赖性方式抑制SHSY5Y 细胞中组蛋白H3 和H4乙酰化水平.同时,氯化钴暴露选择性抑制SHSY5Y 细胞中组蛋白乙酰转移酶蛋白表达水平和活性,而对组蛋白去乙酰化酶蛋白表达水平和活性没有影响.使用曲古抑菌素A 预处理细胞,可部分减弱氯化钴诱导的神经退行性损伤,包括氯化钴引起的细胞凋亡,阿尔茨海默症相关基因(APP,BACE1,PSEN1,NEP 和HIF-1α)蛋白表达水平升高,以及Aβ1-40/42 含量升高.结论 氯化钴暴露可能通过抑制组蛋白乙酰转移酶蛋白表达水平和活力,从而降低神经细胞组蛋白乙酰化水平,进而引起神经细胞退行性损害.
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