论文部分内容阅读
目的:本研究基于微循环障碍理论下,观察糖尿病模型大鼠在不同阶段应用木丹颗粒进行干预后,其下肢微循环血流量和周围神经传导速度、坐骨神经形态结构,以及血清中内皮素含量的变化,探讨出微循环障碍在糖尿病周围神经病变中的作用,为确定木丹颗粒防治糖尿病周围神经病变的最佳时间提供理论依据。材料与方法:随机选取SPF级健康雄性SD大鼠60只,重量230-270g,将SD大鼠适应性喂养7天后,在其中随机选取血糖在正常范围内的SD大鼠10只作为正常对照组。其余50只大鼠造模前禁食12 h后,按照50 mg/kg左下腹注射1%的STZ溶液,注射30 min后正常喂水喂食,72h后取尾静脉血检测空腹血糖,若空腹血糖≥16.7 mmol/L即视为造模成功,不符合标准的剔除。造模后,将50只造模成功大鼠随机分为STZ模型组、0W灌胃组、2 W灌胃组、4 W灌胃组、6 W灌胃组,每组10只。其中STZ模型组从0W开始给予等剂量的生理盐水,0 W灌胃组在成模即刻给药,其余3组分别于成模2W、4W、6W开予木丹颗粒灌胃,4组均连续灌胃及自由饮食饮水饲养至成模8W后。于8W后观察其一般状态、血糖、体重、神经传导速度的变化,以及应用激光多普勒血流仪测定大鼠下肢微循环血流量的变化,麻醉取材,通过ELISA检测血清内皮素含量的变化,观察坐骨神经纤维、轴突及髓鞘的形态变化。结果:1.整个实验过程中可以观察到正常对照组的大鼠精神状态良好,毛色光泽,反应灵敏,体重持续增长,无“三多一少”症状;STZ模型组大鼠精神萎靡,生长缓慢,毛色晦暗无光泽,反应迟钝,行动迟缓,进食量、饮水量及尿量显著增加,体重增长缓慢;0W灌胃组、2W灌胃组、4W灌胃组、6W灌胃组大鼠上述症状不同程度的减轻,一般状态好于STZ模型组,其中0W灌胃组、2W灌胃组大鼠的状态更佳;2.实验过程中,正常对照组大鼠血糖一直保持在正常水平,而成模后各组大鼠的血糖一直保持在较高水平。成模后各组大鼠的初始血糖、8W后血糖与正常对照组大鼠比较,血糖均明显升高,为正常对照组大鼠血糖的5倍,且差异有统计学意义（P＜0.01）;而各灌胃组与STZ模型组比较,差异无统计学意义（P﹥0.05）;3.成模后各组大鼠的体重与正常对照组大鼠比较,体重均显著降低,差异有统计学意义（P＜0.01）。初始体重,0W、2W、4W、6W灌胃组与STZ模型组相比较,不具有统计学差异（P＞0.05）;8W后,0W、2W、4W、6W灌胃组与STZ模型组比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）;其中0W灌胃组与STZ模型组比较,差异性显著（P＜0.01）;4.成模后各组大鼠与正常对照组比较,神经传导速度明显下降,差异有统计学意义（P＜0.01）;各灌胃组与STZ模型组比较,神经传导速度均显著提高（P＜0.01）;各灌胃组组间相比较,0W与2W、4W、6W灌胃组相比较,大鼠的神经传导速度显著提高（P＜0.01）,2W灌胃组与4W灌胃组相比较,神经传导速度相对增加（P＜0.05）,2W灌胃组与6W灌胃组相比较,神经传导速度显著增加（P＜0.01）,4W灌胃组与6W灌胃组相比较,神经传导速度显著增加（P＜0.01）;5.成模后各组大鼠的下肢微循环血流量值显著下降,差异性显著（P＜0.01）;各灌胃组与STZ模型组相比较,大鼠的下肢微循环血流量均有升高,其中0W、2W、4W灌胃组与STZ模型组相比较,大鼠的下肢微循环血流量升高显著（P＜0.01）;各治疗组组间相比较,灌胃时间越早,大鼠的下肢微循环血流量升高越显著（P＜0.01）;6.通过ELISA检测显示,成模后的大鼠血清中ET含量与正常对照组比较均明显增加,差异具有统计学意义（P＜0.01）;其中0W、2W、4W灌胃组与STZ模型组相比较,大鼠血清中ET含量显著降低（P＜0.01）,6W灌胃组与STZ模型组相比较,大鼠血清中的ET含量相对降低（P＜0.05）;各治疗组间比较,0W灌胃组与4W、6W灌胃组相比较,大鼠血清中ET含量均降低（P＜0.05,P＜0.01）;2W灌胃组与6W灌胃组相比较,大鼠血清中ET含量显著降低（P＜0.01）;4W灌胃组与6W灌胃组相比较,大鼠血清中ET含量相对降低（P＜0.05）;7.在正常对照组中,大鼠的神经纤维细胞正常大小,分布均匀,髓鞘内染色均匀,髓鞘内轴突清晰可见,同时可见轴突无肿胀及萎缩;在STZ模型组中,神经纤维细胞排列松散,髓鞘肿胀不均,变薄,甚至部分出现脱髓鞘改变,轴突变化明显;与STZ模型组相比较,0W、2W、4W、6W灌胃组大鼠的坐骨神经纤维损伤有不同程度的改善。其中0W、2W灌胃组坐骨神经纤维的改善最为明显,神经纤维排列整齐,染色均匀。结论:在应用木丹颗粒后,对糖尿病大鼠的下肢微循环血流量有提高的作用,且起始用药时间越早,其下肢微循环血流量提高越显著,同时对于其神经传导速度、坐骨神经的形态结构,以及血清中内皮素的含量均有改善。在一定程度上表明,木丹颗粒防治糖尿病周围神经病变的作用,可能是通过改善微循环障碍实现的。故在糖尿病早期应用木丹颗粒可以有助于改善微循环障碍,预防和延缓糖尿病周围神经病变的进展。