白蛋白是由肝脏分泌的一种高度可溶性的蛋白分子，血浆浓度为40mg／ml，半衰期为20天，构成了血浆胶体渗透压的80％，不易透过血管壁，具有特征性结合转运功能。白蛋白作为脱水、扩容药已广泛应用于临床对脑外伤患者的治疗，但白蛋白是否还存在直接神经保护作用，是目前研究的重要课题。国外研究表明单次给药大剂量白蛋白(2g／kg)有效，能否通过多次给药减小剂量尚有争议。给药时间目前认为伤后应尽早给药。 目的 本课题主要研究白蛋白在治疗大鼠液压颅脑损伤后神经保护作用的剂量效应，寻找伤后单次给药有效剂量，为后期研究多次给药以及白蛋白作用机理奠定基础。 方法：将250—350g雄性SD大鼠150只，伤前做行走、平衡和记忆实验，训练合格动物(共112只)进入分组试验。伤前24小时以2％戊巴比妥(54mg／kg)腹腔麻醉后，在头部前囟与人字缝中点偏左4mm埋置直径4.8mm打击管。颅脑液压伤装置由美国弗吉尼亚大学医学工程部提供，冲击能量为2.0—2.1atm，伤后动物出现反射消失、昏迷、去脑强直等神经功能障碍10分钟以上，动物死亡16只。打击20分钟后存活的动物96只，随机分为4组，设立大剂量组(Ⅰ组2g／kg)、中剂量组(Ⅱ组1.2g／kg、Ⅲ组0.8g／kg)、小剂量组(Ⅳ组0.4g／kg)。伤后半小时内经尾静脉注射相应剂量的20％人血白蛋白。(1)每组随机各取8只大鼠于致伤前当日测定基础值，伤后1-7天连续进行行走试验、平衡试验、记忆试验，记录神经功能恢复情况。(2)每组随机各取8只大鼠于伤后48小时断头取两侧大脑半球在电子天平上称湿重，再于100℃烘干24小时后称干重。按Elliot公式计算两侧大脑半球含水量，脑组织含水量=(湿重-干重)÷湿重×100％。(3)每组随机各取4只大鼠于伤后48小时及15天断头取两侧大脑半球以4％多聚甲醛固定48小时后，于中线左侧0.4mm失状切片，HE染色后观察海马锥体细胞。(4)每组随机各取4只大鼠于伤后48小时及15天以2％戊二醛经心脏灌注固定后，观察海马及损伤区神经细胞。在以上研究指标中，利用SPSS统计分析软件进行重复测量数据的方差分析。 结果 1、自伤后第三天始，行走试验Ⅰ组优于Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组(P＜0.01)(图1)。自伤后第二天始，平衡试验Ⅰ组优于Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组(P＜0.01)(图2)。自伤后第四天始，记忆试验Ⅰ组优于Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组(P＜0.01)(图3)。布二二军医大学硕士举业论文中文摘界神脸外料学令业.自..............2、大鼠伤后脑含水量:I组为(78 .09士0.42)%，111组为(78.89士0.45)%，W组为(79.03士0.35)%。它组(P<0.01)(图4)。11组为(79.01士0.66)%，I组脑组织含水量明显低于其 3、光镜:H组、111组、IV组海马CAZ、3区部分结构破坏，大部分细胞呈不可逆改变，细胞肿胀，空泡变性，细胞膜与周围分界清楚，胞浆嗜碱性减弱，尼氏小体消失，胞核肿胀，呈气球样变，正常结构与核仁均消失，周围见炎细胞浸润。I组海马结构破坏较n组、m组、IV组砂龚径，神经细胞略有肿胀，胞浆嗜碱性，核仁存在(图5一12)。 4、电镜:H组、m组、W组海马神经元细胞胞膜不清，细胞器肿胀明显，线粒体空泡变性，部分呈裸核，细胞核内染色质溶解。工组细胞器肿胀较n组、m组、IV组减轻，内质网、核糖体及线粒体峭尚存在，染色质存在(图13一20)。 本实验证实了在单次给药情况下，大剂量白蛋白(29/kg)对大鼠液压颅脑伤具有显著的治疗作用，促进神经功能的恢复，减轻脑水肿，保护神经元，为今后进行多次给药及白蛋白作用机理的研究奠定了良好的基础。