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目的聚焦三七优劣评价体系缺失难题,构建传统经验评价指导下的生物效应、化学成分、电子感官整合评价体系,多种评价方法互为补充、相辅相成,全面衡量三七质量,旨在建立以经验评价为指导、以简便快速的生物效应评价为支撑、以发现可真实反映经验鉴别的质量标志物并建立标准为内涵、以电子感官为出口的“经验-效应-成分-电子感官”三七质量整体评价体系,形成传统分级方法导向的三七质量整体评价模式,为推进三七优质优价和科学监管提供科学依据和支撑。关注三七种植、销售过程中影响市场售价和实际质量的商品等级、产地、仓储时间三个现实因素,采用药效评价、代谢组学技术及电子鼻技术多角度综合评价商品等级、产地、仓储时间对三七质量的影响,发现、探究与各要素关联的三七质量标志物。方法1)收集16批基底信息相似、基原清晰的三七样品,采用专家一对一评估和评估后沟通的方式开展传统经验评价,得出每批三七的基本质量判断和评价依据,并将三七分为优、劣两个等级,为开展后续化学、活性及电子感官研究奠定经验分级基础;考察不同诱导剂、给药方式、给药浓度等条件,构建异丙肾上腺素(Isoproterenol,ISO)诱导的斑马鱼心肌缺氧模型,进行经验评价优、劣等级三七的活性验证研究;采用基于UHPLC LTQ Orbitrap MS和GC Q-TOF MS技术的非靶向代谢组学技术进行三七非挥发性及挥发性物质的化学模式分析,提取验证并鉴定与传统经验等级匹配的差异性成分,发现可真实反映三七优劣的传统经验质量标志物;采用电子舌、电子鼻技术对三七优劣分类的经验鉴别进行客观量化研究,实现传感器对应三七质量的快速客观评价;针对炔醇等三七经验分类质量标志物,从原位表征、活性验证、关联性分析多方面予以确证;最终通过系统分析,全面关联,构建传统分级方法导向下基于代谢组学分析技术的“经验-效应-成分-电子感官”三七整体质量评价体系。2)收集20批不同商品等级大小、基原清晰的三七样品,基于等级大小对三七样本进行分组,采用ISO诱导的斑马鱼心肌缺氧模型评价其活血化瘀作用;采用基于UHPLC LTQ Orbitrap MS和GC Q-TOF MS技术的非靶向代谢组学技术研究25头和80头以下三七的化学成分差异;采用电子鼻技术尝试区分不同商品等级三七的气味信息。采用质谱成像技术、活性验证、关联性分析等方法对三七传统经验质量标志物进行了表征和关联性研究。从活性效应、差异成分、电子感官多角度探究商品等级与三七质量之间的关联。3)选取文山产和云南非文山地区的13批三七样本作为研究对象,采用高通量、高灵敏度的UHPLC LTQ Orbitrap MS和GC Q-TOF MS技术分析不同产地三七的化学成分差异,采用电子鼻技术及多元统计分析研究不同产地三七嗅觉信息差异,并将电子鼻响应与产地质量标志物关联分析,从不同极性差异成分、电子感官方面综合探讨产地因素对三七质量的影响。4)选取6批仓储2年的三七和4批仓储1年的三七,采用UHPLC LTQ Orbitrap MS和GC Q-TOF MS技术分析其化学成分差异,采用电子鼻技术区分仓储2年的三七和仓储1年的三七,从不同极性差异成分、电子感官方面综合探讨仓储时间因素对三七质量的影响。结果:1)传统经验评价结果表明口尝苦辛回甜、滋味浓郁,鼻嗅气味纯正单一、气味浓厚的三七品质较好,口尝滋味和鼻嗅气味是评价三七质量的关键性状。效应评价实验最终确立以ISO作为诱导剂建立斑马鱼心肌缺氧模型,生药粉直接给药,给药浓度为313μg·mL-1的三七活血化瘀功效快速评价方法,发现经验评价优等三七的血流速度增强作用和心输出量增强作用均强于劣等三七(P<0.0001,P<0.001),传统经验评价可以一定程度反映三七活血功效。代谢组学研究得到39个非挥发性和25个挥发性差异性成分,其中14个非挥发性成分、13个小极性成分在经验优等三七中更高,主要为炔醇、皂苷、小分子烯酸、黄酮和萜烯类成分。电子舌的鲜味、丰富性传感器是不同经验等级三七的主要差异传感器(P<0.05),电子舌可以识别三七的经验评价优劣,而电子鼻在不同经验等级三七的识别中表现不佳。最后,通过DESI-MSI技术确定了部分质量标志物的横切面分布。斑马鱼活性验证实验显示炔醇类成分、白桦酯醛具有较好抗心肌缺氧能力,其中人参炔醇、人参环氧炔醇(实为炔醇类混合物)活性效价高于药典指标成分。电子舌传感器响应与非挥发性传统经验质量标志物含量的关联分析结果也显示部分差异性成分可能是电子舌鲜味、丰富度传感器响应产生差异的原因。2)对于不同商品等级的三七,斑马鱼活性研究显示商品等级因素与其抗心肌缺氧活性无明显相关关系,非靶向代谢组学共得到111个非挥发性和14个小极性差异成分,其中26个非挥发性成分、9个挥发性成分在25头含量高,皂苷、黄酮及其苷、小分子有机酸、醇、酯是主要的差异性成分类别。电子鼻结果显示,PCA分析不能区分4个商品等级的样品,而LDA分析中三七大致呈25头、60头、80头、80头以下头数的分布。3)非靶向代谢组学结果显示文山产和非文山产三七成分差异明显,逐一提取验证得到126个非挥发性和11个挥发性差异性成分,60个非挥发性和3个挥发性成分在文山三七中含量高,皂苷、黄酮及其苷、尿嘧啶、羟脯氨酸是文山三七中含量较高的差异性成分,酯类、小分子有机酸类、甾醇类、萜烯类、环己烯在非文山所产三七中含量高。电子鼻显示不同产地三七气味差别明显,文山产三七在W2W、W1W、W5S三传感器上的响应均强于非文山产三七(P<0.05,P=0.0639,P=0.0757)。4)对于不同仓储时间的三七,采用非靶向代谢组学技术探究差异代谢物,逐一提取验证后得到84个非挥发性和16个挥发性差异性成分,大部分在仓储1年三七中含量高,皂苷、酯类、小分子有机酸、氨基酸类、黄酮及其苷是不同仓储时间三七之间的主要差异性成分。结论:本研究从活性效应、差异成分、电子感官多角度验证了传统经验评价的正确性,发现炔醇、皂苷、萜烯等差异性成分是可以真实反映三七优劣的传统经验质量标志物。最终建立了以传统经验为指导的三七“经验-效应-成分-电子感官”质量综合评价体系,其中电子舌响应有望成为该评价体系的输出端口。本研究还从活性效应、差异成分、电子感官多角度探究了商品等级、产地、仓储时间对三七质量的影响,得到与商品等级、产地、仓储时间相关的三七质量标志物,总体而言,商品等级对三七质量无显著影响,文山产三七与非文山产三七存在显著区别,仓储时间增加三七成分含量有所下降。