【摘 要】
：
双斑侧沟茧蜂病毒（Microplitis bicoloratus bracovirus,MbBV）是寄生蜂的共生病毒,Hemichannel在细胞与细胞外环境之间进行信号传导。前期研究表明MbBV能通过诱导粒细胞凋亡来抑制寄主的免疫反应;hemichannel关闭能减少相近细胞的凋亡。研究MbBV、hemichannel、细胞凋亡间的相互关系是深入揭示免疫抑制机理的关键问题。论文利用核酸小分子染料
【基金项目】
：
国家自然科学基金项目（31360454,31560528,31471823,31260448,31060251）； NSFC-NRF（31411140238）； 云南省应用基础研究计划重点项目（2013FA003）； 云南省应用基础研究计划项目（2012FB120）；
论文部分内容阅读
双斑侧沟茧蜂病毒（Microplitis bicoloratus bracovirus,MbBV）是寄生蜂的共生病毒,Hemichannel在细胞与细胞外环境之间进行信号传导。前期研究表明MbBV能通过诱导粒细胞凋亡来抑制寄主的免疫反应;hemichannel关闭能减少相近细胞的凋亡。研究MbBV、hemichannel、细胞凋亡间的相互关系是深入揭示免疫抑制机理的关键问题。论文利用核酸小分子染料TO-PRO-3来探讨hemichannel渗透性的变化,time lapse监测凋亡细胞的变化。利用RNAi技术,在in vivo活体条件下沉默innexins基因。为了在in vitro离体条件下敲除innexins基因,改良构建了CRISPR/Cas9的DNA编辑工具,研究中获得以下实验结果:1、MbBV是innexins-hemichannel的活性抑制剂,在关闭hemichannel的同时,促进凋亡细胞形成了凋亡小体2、利用重组杆状病毒reBac-TEV-inx2、reBac-TEV-inx3表达N端延长的Inxs蛋白,能够促进细胞形成凋亡小体。用TEV蛋白酶（Tobacco Etch Virus protease,TEVp）识别并切割N端延长的重组杆状病毒中的TEV序列后,凋亡小体的数量减少。说明凋亡小体的形成与inxs相关。3、改良构建了两个可以表达 sgRNA的工具,pIZT/V5-His-sgRNA和PIB-EGFP-sgRNA 质粒。通过融合 PCR,把 U6+EcoRV+sgRNA3’+6T 连成一条序列,并把它连在pIZTV5/His、PIB-EGFP质粒上,插入sgRNA序列后,sgRNA能够在细胞中表达。综述所述,茧蜂病毒通过调控hemichannel的结构原件Inxs,来诱导凋亡细胞形成凋亡小体。同时构建了 CRISPR/Cas9敲除质粒为以后的实验提供一个有力的工具。
其他文献
背景:焦虑障碍是一种复杂且常见的情绪障碍,发病率高并给社会带来了沉重的负担。其致病机制目前尚不清楚,目前临床上治疗焦虑障碍的药物存在着一定的缺陷如起效慢、副作用强,因此找到起效快且安全的焦虑障碍治疗药物是目前比较迫切的事情。焦虑障碍的患病与神经免疫调节紊乱相关,而虫草素具有免疫调节的作用,因此本研究旨在讨论虫草素是否能够通过免疫调节的作用达到抗焦虑的效果。方法:本研究以雄性CD-1小鼠为实验对象,
目的:随着现代社会压力的增大,抑郁症发病率呈现逐年递增趋势。目前临床治疗抑郁症的药物以五羟色胺抑制剂为主,但起效慢且副作用大。因此,开发出快速起效、副作用小的抗抑郁药有重要意义。灵芝是一种中药材,有提高免疫力、抗炎症、抗肿瘤、抑制细胞组织胺释放、增强消化系统各器官机能等作用。研究表明,谷氨酸相关的信号通路在抑郁症发病机制中起着重要作用。本研究对灵芝酸A抗抑郁效果进行检测,并探究其抗抑郁作用可能的分
艾滋病（AIDS）即获得性免疫缺陷综合征（Acquired immunodeficiency syndrome）,是由人类免疫缺陷病毒（HIV）感染所致的一种全球性流行疾病。从1983年HIV在美国首次发现以来艾滋病已成为严重威胁世界人民健康的重大疾病之一。HIV-1病毒复制主要通过吸附、融合、逆转录、整合、转录和翻译、组装与释放等过程来完成,阻止其中任何一个环节都可以抑制病毒的复制传播,其中HI
三七（Panax notoginseng）,别名金不换、田七、参三七、人参三七。是我国的传统珍贵药材为五加科植物。西洋参（Panax quinquefolius）同样作为五加科植物,具有补气养阴、清热生津之功效,原产于美国、加拿大。现代化学和药理学研究认为人参属的植物其最主要的生理活性表现在三帖皂苷上。且三七具有抗肿瘤、抗炎、调节神经系统、调节心脑血管系统、调节血液系统等生理活性作用。本文主要分为
随着老龄化程度逐步加剧,老年人的健康问题成为社会各界关注的焦点。根据第五次和第六次人口普查数据对西南农村老龄化作了分析和研究,发现西南农村地区和我国老龄化发展趋势一致,都存在未富先老、农村老龄化水平高于城镇、向高龄化发展等特点,而西南农村地区的生活条件、医疗条件和经济条件都落后于发达地区。构建少数民族农村地区老年签约式居家医疗服务,可以加强基层医疗卫生资源,保障老年人的健康需求,尤其是部分失能、完
茧蜂病毒在茧蜂的寄生过程中抑制寄主免疫反应的机理已经有初步的研究,已有报道双斑侧沟茧蜂病毒（Mb BV）可以诱导寄主斜纹夜蛾血细胞的凋亡抑制寄主的免疫反应,然而其中的调控机理仍不清楚。本研究旨在探究Mb BV通过调控寄主斜纹夜蛾翻译起始因子e IF4A及e IF4E的表达引发斜纹夜蛾血淋巴细胞凋亡,进而影响其幼虫生长发育的机理。并取得以下研究结果:1.Mb BV能抑制e IF4A表达并诱导寄主斜纹
龙血树柴胡（Bupleurum dracaenoides Huan C.Wang,Z.R.He&H.Sun）,隶属于伞形科（Umbelliferae）柴胡属（Bupleurum）,是2013年王焕冲等发表的新种,为亚洲最大的木本柴胡,高可达1.5m,分布范围狭窄,仅零散分布于中国西南地区的金沙江河谷中下游地段,生境特殊,数量稀少。截至目前对该种尚未开展生物学等相关研究,有鉴于此,本论文从群落生态学
少孢节丛孢（Arthrobotrys oligospora）是一种重要的捕食线虫真菌,能够通过菌丝特化形成的黏性三维菌网来捕食线虫,是研究真菌与线虫相互作用的模式真菌,具有重要的生态学意义和价值。前期通过ITS、TUB和RPB2等片段测序分析了采自中国境内不同生态环境和地理区域的A.oligospora的遗传分化和扩散,发现其至少包含三个明显分化的支系（即隐存种）。本文以73株A.oligospo
玉米病毒病是危害玉米生产的主要病害之一,在生产中快速、准确的鉴定引起玉米病毒病害的病原尤为关键。然而,传统的植物病毒鉴定技术具有一定局限性。利用小RNA深度测序技术在检测病毒种类上具有明显的优势,是当前植物病毒鉴定最为重要的方法。本研究采集了云南省永胜县（YS4-1）、武定县（WD1-2,WD3-1）和元谋县（YM3-1）表现为褪绿斑驳、花叶、黄化和坏死等4个典型症状的四种样品作为鉴定对象。利用小
随着植物诱导抗性理论和应用研究的不断深入,诱导抗性剂作为环保、安全的植物病害防治措施日益受到青睐。γ-氨基丁酸（γ-aminobutyric acid,GABA）作为植物体内的一种重要代谢产物,具有促生、抗逆、诱导抗性生物活性;但产GABA微生物是否具有类似的生物活性未见报道。本文首先从生防真菌中筛选产GABA的菌株;并对高产GABA真菌的发酵进行了优化;其次,研究了 GABA产生菌的促生及诱导抗