【摘 要】
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玉米病毒病是危害玉米生产的主要病害之一,在生产中快速、准确的鉴定引起玉米病毒病害的病原尤为关键。然而,传统的植物病毒鉴定技术具有一定局限性。利用小RNA深度测序技术在检测病毒种类上具有明显的优势,是当前植物病毒鉴定最为重要的方法。本研究采集了云南省永胜县（YS4-1）、武定县（WD1-2,WD3-1）和元谋县（YM3-1）表现为褪绿斑驳、花叶、黄化和坏死等4个典型症状的四种样品作为鉴定对象。利用小
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玉米病毒病是危害玉米生产的主要病害之一,在生产中快速、准确的鉴定引起玉米病毒病害的病原尤为关键。然而,传统的植物病毒鉴定技术具有一定局限性。利用小RNA深度测序技术在检测病毒种类上具有明显的优势,是当前植物病毒鉴定最为重要的方法。本研究采集了云南省永胜县（YS4-1）、武定县（WD1-2,WD3-1）和元谋县（YM3-1）表现为褪绿斑驳、花叶、黄化和坏死等4个典型症状的四种样品作为鉴定对象。利用小RNA深度测序技术对各个样品中的玉米病毒进行鉴定。得到如下的结果:（1）利用小RNA深度测序技术,进行总RNA提取、文库构建、文库质检,用HiSeq TM 2500进行测序,用bowtie、velvet软件分析后分别获得62条、126条、93条、68条contigs,NCBI 比对分析发现:样品YS4-1中检测到甘蔗花叶病毒（SCMV）和玉米相关的整体病毒1（MATV1）;样品WD1-2和WD3-1中检测到玉米黄化花叶病毒（MaYMV）;样品YM3-1中含有甘蔗花叶病毒（SCMV）和玉米褪绿斑驳病毒（MCMV）。（2）利用已报道的MaYMV基因组序列设计环介导等温扩增技术（Loop-mediated isothermal amplification,LAMP）检测引物（F3:TGGTGGTTACGCTTCATGTG;B3:TCCCAACCTGGAGGTCCTTG;FIP（Flc+F2）:TTCTCCTTTCTGGGCCGTTTTGCT TGCTTAATGGTAGCAAT;BIP（Bl+B2c）:CAGGACTGGTAACAAGATCATTTTCTCAC GTCGGAATTCGTGGT）。结果表明,反应温度为65℃、反应时间为60min时该方法可以快速、准确的检测到MaYMV。并且利用LAMP技术在样品WD1-2和WD3-1中快速检测到MaYMV。
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