论文部分内容阅读
目的:检测信号转导与转录激活因子5(Signal transducer and activator of transcription 5，STAT5)、细胞周期素D1(cyclinD1)和c-myc蛋白在非小细胞肺癌(Non-Small Cell Lung Cancer,NSCLC)组织和正常肺组织中的表达，初步探讨它们在NSCLC的发生、侵袭和转移中的作用。
方法:利用免疫组织化学SP法检测38例NSCLC组织和20例正常肺组织中STAT5蛋白、cyclinD1蛋白和c-myc蛋白的表达水平。NSCLC组织均为手术切除获得，术前未作任何放疗或化疗。其中，男性25例，女性13例；年龄为23-81岁，<60岁者27例，≥60岁者11例；鳞癌18例，腺癌20例；肿瘤直径≤3cm者11例，>3cm者27例；有淋巴结转移者28例，无淋巴结转移者10例；Ⅰ-Ⅱ期者21例，Ⅲ-Ⅳ期者17例；高-中分化者29例，低分化者9例。标本组织经福尔马林固定，石蜡包埋，4μm厚连续切片，切片常规脱蜡水化后，蒸馏水冲洗，磷酸盐缓冲液(phosphate buffersaline，PBS)浸泡，高温抗原修复，3％H2O2断内源性过氧化物酶活性，并用正常山羊血清封闭交叉反应。滴加一抗(STAT5兔抗人多克隆抗体，鼠抗人cyclinD1单克隆抗体，鼠抗人c-myc单克隆抗体)孵育，PBS冲洗后滴加生物素标记二抗孵育，PBS冲洗后滴加辣根酶标记链霉卵白素工作液(S-A/HRP)孵育，PBS冲洗，DAB显色，苏木素复染，透明，封片观察。以胞质或胞核内出现棕黄色颗粒、网织状或棕褐色团块为阳性细胞。其中，STAT5蛋白在NSCLC组织中的阳性表达信号主要位于细胞质，少数位于细胞核；cyclinD1蛋白在NSCLC组织中的阳性表达信号主要位于细胞核；c-myc蛋白在NSCLC组织中的阳性表达信号主要位于细胞质。按每张切片的阳性细胞比例及着色深浅划分一、+、++、++十四级，基本不着色或着色细胞少于5％为阴性(-)，着色浅淡或着色细胞占5％-5％为弱阳性(+)，着色适中或着色细胞占26％～50％为中度阳性(++)，着色深或着色细胞大于50％为强阳性(+++)。
结果:(1)STAT5蛋白在NSCLC组织中的表达与在正常肺组织中的表达比较，差异有显著统计学意义(P<0.01)，在肿瘤中的表达高于正常肺组织；cyclinD1蛋白在NSCLC组织中的表达与在正常肺组织中的表达比较，差异有显著统计学意义(P<0.01)，在肿瘤组织中的表达高于正常肺组织；c-myc蛋白在NSCLC组织中的表达与在正常肺组织中的表达比较，差异有显著统计学意义(P<0.01)，在NSCLC中的表达高于正常肺组织；(2)STAT5蛋白在NSCLC组织中的表达与患者的年龄、肿瘤大小、组织分化程度、淋巴结转移及TNM分期无关(P>0.05):cyclinD1蛋白在NSCLC组织中的表达与患者的年龄、肿瘤大小、组织分化程度、淋巴结转移及TNM分期无关(P>0.05)；同样，在NSCLC组织中，c-myc蛋白的表达也与患者的年龄、肿瘤大小、组织分化程度、淋巴结转移及TNM分期无关(P>0.05):(3)STAT5蛋白和cyclinDl蛋白在NSCLC组织中的表达呈显著正相关(r=0.328，P=0.044，P<0.05)。(4)STAT5和c-myc蛋白在NSCLC组织中的表达无相关性(r=0.142，P=0.394，P>0.05)；(5)cyclinD1蛋白和c-myc蛋白在NSCLC组织中的表达无相关性(r=0.279，P=0.089，P>0.05)。
结论:(1)STAT5蛋白在NSCLC中的表达增高，显著高于正常肺组织，同样，在NSCLC中cyclinD1蛋白和c-myc蛋白的表达也是增高的并且显著高于正常肺组织，说明过度表达的STAT5蛋白、cyclinD1蛋白和c-myc蛋白可能均参与了非小细胞肺癌的形成过程。(2)STAT5蛋白、cyclinD1蛋白和c-myc蛋白在NSCLC中的表达与患者的年龄、肿瘤大小、组织分化程度、淋巴结转移和TNM分期无关，提示它们可能只在肿瘤发生过程中发挥作用，而与肿瘤侵袭和转移无关。(3)STAT5蛋白与cyclinD1蛋白在NSCLC中的表达呈正相关，提示STAT5可能是通过上调cyclinD1的表达，从而促进细胞周期进展和细胞的恶性转化，促进肿瘤的形成。(4)在NSCLC中，STAT5蛋白与c-myc蛋白的表达之间无相关性，说明c-myc可能并没有通过STAT5信号途径或者是通过其它的方式来诱导肿瘤的发生。(5)在NSCLC中，cyclinD1蛋白与c-myc蛋白的表达之间无相关性，说明它们在促进细胞转化，导致肿瘤的发生过程可能是各自独立发挥作用的，无协同作用。