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目的研究N-乙酰基-丝氨酰-天门冬氨酰-赖氨酰-脯氨酸（N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline,Ac-SDKP）是否通过热休克蛋白27（heat shock protein 27,HSP27）的调控影响人肺泡Ⅱ型上皮细胞（A549细胞株）FAS/FASL凋亡通路。方法采用体外培养A549细胞株6 h、12 h、24 h、48 h,诱导刺激前2 h给予Ac-SDKP(1×10-8mol/L)和J2（2μM）预处理干预A549细胞株,使用5 ng/ml的转化生长因子（transforming growth factor-beta 1,TGF-β1）诱导。实验分为4组:对照组、TGF-β1诱导组、Ac-SDKP干预组、J2（HSP27抑制剂）干预组。倒置相差显微镜和HE染色观察细胞形态变化;免疫细胞化学染色检测HSP27、FAS、FASL、Caspase-3、Caspase-8的表达;蛋白免疫印迹（Western blot）检测各组HSP27、FAS、FASL、Caspase-3、Caspase-8的蛋白表达;实时荧光定量PCR（real time fluorescence quantitative PCR,q PCR）检测HSPB1、FAS m RNA表达情况;免疫荧光染色检测HSP27、FAS的定位表达;流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果1倒置相差显微镜和HE染色结果显示:与对照组相比,TGF-β1诱导24 h、48 h的A549细胞形态由多角形或上皮样变为长梭形趋势更明显,并且细胞数量增多;与TGF-β1诱导组相比,Ac-SDKP和J2干预组细胞向长梭形改变不明显。2免疫细胞化学染色结果显示:在6 h、12 h分组中,与对照组相比,TGF-β1诱导组HSP27、FAS、FASL胞浆棕黄色表达加深,Caspase-3、Caspase-8胞浆胞核棕黄色表达加深;与TGF-β1诱导组相比,Ac-SDKP和J2干预组中HSP27、FAS、FASL、胞浆棕黄色表达变浅,Caspase-3、Caspase-8胞浆胞核棕黄色表达变浅。在24 h、48 h分组中,与对照组相比,TGF-β1诱导组HSP27胞浆棕黄色表达加深,FAS、FASL、Caspase-3、Caspase-8胞浆棕黄色表达变浅;与TGF-β1诱导组相比,Ac-SDKP和J2干预组中HSP27胞浆棕黄色表达变浅,FAS、FASL胞浆棕黄色表达加深,Caspase-3、Caspase-8胞浆胞核棕黄色表达加深。3 Western blot结果显示:在6 h、12 h分组中,与对照组相比,TGF-β1诱导组中HSP27、FAS、FASL、Caspase-3、Caspase-8蛋白表达增多,差异具有统计学意义（P＜0.05）;与TGF-β1诱导组相比,Ac-SDKP和J2干预组中HSP27、FAS、FASL、Caspase-3、Caspase-8蛋白表达降低,差异具有统计学意义（P＜0.05）。在24 h、48 h分组中,与对照组相比,TGF-β1诱导组中HSP27蛋白表达增多,而FAS、FASL、Caspase-3、Caspase-8蛋白表达降低,差异具有统计学意义（P＜0.05）;与TGF-β1诱导组相比,Ac-SDKP和J2干预组中HSP27蛋白表达降低,而FAS、FASL、Caspase-3、Caspase-8蛋白表达增多,差异具有统计学意义（P＜0.05）。Ac-SDKP干预组与J2干预组相比,差异不具有统计学意义（P＞0.05）。4实时荧光定量PCR结果显示:在6 h、12 h分组中,与对照组相比,TGF-β1诱导组中HSPB1、FAS m RNA表达上调;与TGF-β1诱导组相比,Ac-SDKP和J2干预组中HSPB1、FAS m RNA表达下调,差异具有统计学意义（P＜0.05）。在24 h、48 h分组中,与对照组相比,TGF-β1诱导组中HSPB1 m RNA表达上调,FAS m RNA表达下调;与TGF-β1诱导组相比,Ac-SDKP和J2干预组中HSPB1 m RNA表达下调,FAS m RNA表达上调,差异具有统计学意义（P＜0.05）。5免疫荧光染色结果显示:在6 h、12 h分组中,与对照组相比,TGF-β1诱导组HSP27（红色荧光）、FAS（绿色荧光）荧光强度增强;与TGF-β1诱导组相比,Ac-SDKP和J2干预组中HSP27（红色荧光）、FAS（绿色荧光）荧光强度减弱。在24 h、48 h分组中,与对照组相比,TGF-β1诱导组HSP27（红色荧光）荧光强度增强,FAS（绿色荧光）荧光强度减弱;与TGF-β1诱导组相比,Ac-SDKP和J2干预组中HSP27（红色荧光）荧光强度减弱,FAS（绿色荧光）荧光强度增强。6流式细胞术结果显示:在6 h、12 h分组中,与对照组相比,TGF-β1诱导组细胞凋亡百分比上升;与TGF-β1诱导组相比,Ac-SDKP和J2干预组细胞凋亡百分比下降,差异具有统计学意义（P＜0.05）。在24 h、48 h分组中,与对照组相比,TGF-β1诱导组细胞凋亡百分比下降;与TGF-β1诱导组相比,Ac-SDKP和J2干预组细胞凋亡百分比上升,差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论Ac-SDKP可能通过抑制HSP27的表达,促进激活FAS/FASL凋亡通路,介导A549细胞的凋亡,具有类似J2（HSP27抑制剂）的作用。图22幅;表13个;参91篇。