【摘 要】
：
手足口病是一种由多种人类肠道病毒感染引起的传染性疾病,多发于5岁以下儿童。其主要特征是发热和手、足、口腔等部位出现皮肤粘膜皮疹、疱疹和溃疡等病症。该病于1957年首次在新西兰报道,随后在全球范围内传播流行,现已成为全球性的公共卫生问题。相比其它肠道病毒,肠道病毒71型（Enterovirus71,EV71）更易引起中枢神经系统症状,是引发手足口病重症病例的主要病原体,对患者的危害性更大。对于手足口
【基金项目】
：
国家重点研发计划项目（2018YFC1602500）； 国家自然科学基金项目（31871888）；
论文部分内容阅读
手足口病是一种由多种人类肠道病毒感染引起的传染性疾病,多发于5岁以下儿童。其主要特征是发热和手、足、口腔等部位出现皮肤粘膜皮疹、疱疹和溃疡等病症。该病于1957年首次在新西兰报道,随后在全球范围内传播流行,现已成为全球性的公共卫生问题。相比其它肠道病毒,肠道病毒71型（Enterovirus71,EV71）更易引起中枢神经系统症状,是引发手足口病重症病例的主要病原体,对患者的危害性更大。对于手足口病患者,尽早鉴别出是否为EV71感染,对该病的早期诊治具有重要意义。EV71感染人体后,机体的免疫应答首先产生IgM抗体,血液中其含量快速升高。因此,IgM抗体是一种常用的早期诊断指标。目前临床上使用的检测方法是酶联免疫吸附试验（ELISA）和胶体金试纸条,但存在显色信号单一和灵敏度不足的缺点。纳米材料被广泛应用于分析检测领域,促进了检测技术的发展。本研究分别采用金棒（AuNRs）、金核铂壳纳米材料（Au@Pt NPs）和石墨烯量子点（GQDs）,从裸眼判定结果和提高检测灵敏度等方面建立新型免疫学检测方法,为满足EV71 IgM抗体的检测需求提供新的解决办法。主要研究内容如下:1.EV71 IgM抗体的间接ELISA和捕获ELISA检测方法的建立。EV71阳性样品的敏感性试验、临床样品检测结果表明,间接ELISA优于捕获ELISA。因此,选择在间接ELISA的基础上,构建基于纳米材料的EV71 IgM抗体新型检测方法。2.基于TMB2+蚀刻AuNRs的EV71 IgM抗体多色检测方法的建立。采用种子生长法制备纵向吸收峰在730 nm的AuNRs。利用TMB2+蚀刻AuNRs时,出现鲜艳的颜色变化和纵向吸收峰的移动,建立基于裸眼比色和光谱扫描两种结果判定方式。敏感性试验中,EV71阳性样品在稀释200～3200倍时仍可以检出。临床样品检测结果表明,该方法的敏感性为100.00%,特异性为91.06%,符合率为92.57%。该方法与间接ELISA相比,裸眼比色的结果判定方式不需要仪器辅助,能够满足在资源有限地区或场景对EV71感染的快速分析和检测应用。3.基于Au@Pt NPs类过氧化物酶活性的EV71 IgM抗体比色检测方法的建立。制备四种不同铂厚度的Au@Pt NPs,并筛选出催化能力最佳的Au@Pt NPs制备探针,用于构建检测方法。敏感性试验中,EV71阳性样品在稀释200～6400倍时仍可以检出。临床样品检测结果表明,该方法的敏感性为96.00%,特异性为92.68%,符合率为93.24%。该方法与间接ELISA相比,采用纳米酶Au@Pt NPs代替天然酶HRP,检测成本降低,检测性能更优,具有代替现有ELISA检测方法的潜力。4.基于Au@Pt NPs和GQDs的EV71 IgM抗体比率荧光检测方法的建立。Au@Pt NPs探针能够催化邻苯二胺（OPD）生成氧化态OPD,后者猝灭GODs在410 nm的发射光,并在580 nm出现新的发射光。采用580 nm和410 nm的荧光比值作为信号,建立比率荧光检测方法。敏感性试验中,EV71阳性样品在稀释200～12800倍时仍可以检出。临床样品检测结果表明,该方法的敏感性为96.00%,特异性为90.24%,符合率为91.22%。该方法与间接ELISA相比,结合纳米酶和比率荧光检测模式的优势,具有检测灵敏度更高和结果稳定等优点,能够满足EV71感染早期诊断的需求。综上所述,EV71 IgM抗体是临床上确诊EV71感染的早期诊断指标。本研究首先建立了EV71 IgM抗体的间接ELISA和捕获ELISA检测方法。通过比较检测性能,选择在间接ELISA基础上,构建三种基于纳米材料的EV71 IgM抗体新型检测方法。这三种新型检测方法可以满足EV71 IgM抗体的多种检测需求,能够应用于手足口病EV71型的早期诊断,也为其它疾病的免疫学检测方法研究提供了新思路。
其他文献
本论文以乌干达作为案例,论述中国援建的东非农业技术示范中心（ATDCs）,展示这一农业援助模式如何成功提出了应对了粮食安全问题、推动南南合作以及如何减少全球贫困和促进可持续发展的新路径。本论文研究的三个关键问题是:首先,中国援建乌干达的农业技术示范中心（以下均称为‘该项目’）对当地经济发展到底产生了哪些影响?其中包括“该项目”对乌干达本国经济发展、技术转让以及人民生活的影响,尤其是那些适用于本国你
普通小球藻（Chlorella Vulgaris）作为处理富营养化水体的优良生物吸附剂,在大量内源P污染水体会引起P污染持续加剧。为了探明普通小球藻与内源P再释放的关系及过程,并通过调控水体条件实现藻生物量宏观可控,论文选用普通小球藻作为实验对象,以富Fe-P共沉物水体为应用环境,围绕普通小球藻、Fe-P共沉物和上覆水的研究体系,运用柱实验、全面批实验、正交实验和共培养等方法,研究了富Fe-P共沉
为了解小流域尺度下生物地球化学过程对径流水体的影响及花岗岩化学风化对CO2的吸收,对亚热带典型花岗岩区不同利用条件下的2个相邻小流域（F-森林、FA-森林/农田）的地表径流及其常量离子和溶解Si含量进行了连续3年的定期观测和分析.结果表明,溶解Si,Na+和HCO3-构成地表径流的主要化学成分,FA流域离子总量高于F流域,反映了流域内农业活动对其化学径流的贡献.皖南典型花岗岩小流域（F、FA）径流
原发性肝细胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）占原发性肝癌的85%～90%,是我国第四位常见恶性肿瘤及第三位肿瘤致死病因,严重威胁我国居民的生命和健康。HCC肿瘤组织中血管丰富,血供模式复杂,存在血管生成拟态（vasculogenic mimicry,VM）现象,VM阳性的患者生存期短。目前针对HCC血管生成的靶向治疗主要集中在血管内皮细胞,对由肿瘤细胞组成的VM无效。
羊传染性脓疱病（Orf）又称羊接触传染性脓疱皮炎,俗称“羊口疮”,是由羊传染性脓疱病毒（Orf virus,ORFV）感染引起的一种急性、高度接触性传染病。ORFV主要感染绵羊、山羊,牧民及从事屠宰、兽医等行业的工作人员也常发生感染,因此该病原也是一种重要的人兽共患病病原,对养羊业及人类健康构成严重威胁。ORFV基因组庞大,编码蛋白众多,ORFV120基因位于病毒基因组末端,与其它痘病毒无明确匹配
制度政策的薄弱以及执行规范的欠缺,都对非洲之角追求环境治理的进程产生了极大的影响。因此,由于缺乏有效的制度体系,环境治理的安排与进展都遭遇了困境。目前来看,这种制度安排以及其发展趋势已经反映出,国际间、区域间以及国家间的制度合作仍面临着挑战。在制度上付诸的努力之所以失败,是因为应对环境挑战的系统过于复杂,需要区域和国内共同采取行动。因此,保护环境免受污染的项目与政策在非洲之角地区及其成员国中严重受
大量堆置的粉煤灰造成了严重的资源浪费、土地侵占和环境污染,其超细化、规模化利用是资源可持续和环境保护的双重需求。目前粉煤灰利用呈现低效、低值、高能耗等关键行业痛点,超细粉碎对粉煤灰高值化、规模化利用至关重要,传统粉碎技术因不能超细化或大型化等诸多不足限制了粉煤灰大规模利用,急需研发规模化的粉煤灰超细粉碎工艺、技术和装备。为此,本文采用工业余热制备过热蒸汽作为粉碎介质实现粉煤灰的规模化、低成本超细粉
许多学者认为,联合国维和行动在处理武力冲突时通常发挥正面的作用。维和部队的部署是为了以遏制冲突的爆发、升级、持续和反复,其在促进稳定并最终实现长久和平和安全中发挥着至关重要的作用。维和行动帮助处于冲突中的国家创造条件以实现可持续的和平。20世纪90年代以来,维和行动已成为国际社会应对国际政治危机的基石。时至今日,联合国维和行动扩展了行动范围,涵盖了为解决国家间冲突的复杂多维度行动。由于维和行动的开
早期研究表明RNA分子负责细胞的多种功能,包括遗传信息的转录和翻译,分子作用元件的结构性支撑,调控基因表达或沉默及催化功能等。掌握RNA的动态迁移,包括实时定位、起点和终点,有助于我们研究细胞在健康和疾病状态下的行为和功能,加深对RNA的认识。人们开发了多种RNA成像技术,应用于RNA的亚细胞定位成像。RNA原位杂交（FISH）作为主流的RNA成像系统,实现了高分辨率的RNA亚细胞成像,但RNA