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目的:通过对54例甲状腺乳头状癌(palliary thyroid carcinoma,PTC)、16例结节性甲状腺肿(nodular goiter,NG组)和10例癌旁正常组织ALCAM、E-cadherin和β-catenin基因和蛋白表达水平的检测,结合PTC、NG患者和正常人血清中ALCAM和E-cadherin含量测定,分析三者在甲状腺癌发生、发展过程中的作用及三者之间的相关性。探讨ALCAM、E-cadherin和β-catenin在甲状腺乳头状癌中的作用机制。为甲状腺癌诊断和治疗提供依据。 方法: 1、病例收集与分组:收集2013年1月1日~2014年1月1日间由河北北方学院附属第一医院手术切除病例,经病理诊断证实且临床病理资料完整的54例PTC组织及血液(PTC组),16例NG组织及血液(nodulargoiter,NG组),10例瘤旁正常组织及10名正常人血液(normal thyroidtissues,N组)。 2、ELISA法检测ALCAM和E-cadherin在54例甲状腺乳头状癌、16例结节性甲状腺肿和10例正常人血清中的含量。 3、应用Western blot、免疫组织化学SP法检测ALCAM、E-cadherin和β-catenin蛋白在PTC、NG及癌旁正常组织中的表达,并结合完整的临床病例资料,分析三者的变化与临床病理特征的关系。Real-time PCR法检测三组中ALCAMmRNA的转录水平。 4、应用SPSS17.0统计学软件进行实验结果分析,血清、western blot及qPCR数据结果以(x)±S表示,组间差异及两两比较采用方差分析及q检验。P<0.05有统计学意义,P<0.01有显著性差异。相关性分析采用Spearman非参数相关分析,P<0.05为具有统计学意义。免疫组化结果阳性率的比较采用卡方检验,P<0.05为具有统计学意义。 结果: 1、ELISA检测结果:PTC、NG和正常人血清中均可检测到ALCAM和E-cadherin蛋白;PTC患者血清ALCAM和E-cadherin的含量明显高于NG组和正常人(P<0.05),NG组和正常人血清中ALCAM和E-cadherin的含量无明显差异(P>0.05)。 2、免疫组织化学结果:PTC中ALCAM阳性信号位于细胞膜和细胞质,呈棕黄色颗粒,NG组及癌旁组织中阳性信号主要在细胞膜,少量表达于细胞质为浅黄色颗粒,PTC组织中ALCAM的阳性率明显高于NG和癌旁正常组织(P<0.05);E-cadherin在癌旁正常组织及结甲组织中阳性信号主要位于细胞膜,细胞质弱表达,呈棕黄色的颗粒,在PTC中少量表达,PTC组织样本中E-cadherin的阳性表达率明显低于NG和癌旁正常组织(P<0.05);β-catenin在癌旁正常组织中表达于细胞膜,NG组织中β-catenin出现表达异常,表现为膜阳性表达不连续并伴有少量细胞质阳性表达,PTC中β-catenin异位表达明显,表现为膜阳性表达缺失,出现大量细胞质表达,偶见细胞核表达,PTC样本中β-catenin的异位表达率明显高于NG和癌旁正常组织(P<0.05)。三者的阳性率在结节性甲状腺肿和癌旁正常组织中无明显差异(P>0.05)。三者的异常表达与PTC淋巴结转移有关(P<0.05),与患者年龄、性别、肿瘤大小无关(P>0.05)。 3、Real-time PCR检测结果:PTC组织中ALCAM mRNA转录水平明显高于NG和癌旁正常组织(P<0.05),结节性甲状腺肿和癌旁正常组织中无明显差异(P>0.05)。 4、Western Blot检测结果:PTC中ALCAM、β-catenin蛋白表达量明显高于二者在NG和癌旁正常组织(P<0.05),E-cadherin在PTC组织中的蛋白表达明显低于NG和癌旁正常组织(P<0.05),三者的蛋白表达水平在NG和癌旁正常组织中无明显差异P>0.05)。 5、相关分析显示:ALCAM阳性表达与β-catenin和E-cadherin异常表达呈正相关(r=0.404, P=0.002; r=0.269,P=0.049);β-catenin异位表达与E-cadherin异常表达呈正相关(r=0.309,P=0.023)。 结论:1、ALCAM、β-catenin在PTC组织高表达,E-cadherin在PTC组织中呈现低表达,并与淋巴结转移相关。2、术前检测血清ALCAM与E-cadherin的含量,在甲状腺乳头状癌早期诊断和预后评估方面有重要价值。