【摘 要】
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目的:探讨黄芩素（Baicalein,BAI）对人滑膜肉瘤SW982细胞的细胞增殖、凋亡和迁移的影响及相关分子机制。方法:将SW982细胞经浓度为0μM、15μM、25μM、50μM、75μM、100μM的BAI处理24h、48h、72h、96h,采用MTT实验检测细胞增殖能力,并筛选BAI的用药浓度;将SW982细胞经BAI处理2周,平板克隆形成实验检测细胞的集落形成能力;将SW982细胞经BA
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目的:探讨黄芩素（Baicalein,BAI）对人滑膜肉瘤SW982细胞的细胞增殖、凋亡和迁移的影响及相关分子机制。方法:将SW982细胞经浓度为0μM、15μM、25μM、50μM、75μM、100μM的BAI处理24h、48h、72h、96h,采用MTT实验检测细胞增殖能力,并筛选BAI的用药浓度;将SW982细胞经BAI处理2周,平板克隆形成实验检测细胞的集落形成能力;将SW982细胞经BAI处理48h,Annexin V-FITC/PI双染结合流式细胞术分析SW982细胞的凋亡情况;BAI处理SW982细胞0h、24h、48h、72h,划痕愈合实验检测横向迁移的情况;将SW982细胞经BAI处理48h,行蛋白印迹实验成功检测凋亡相关蛋白（Bcl-2、Bax、Caspase-3、Cleaved-caspase 3）、EMT相关蛋白（E-Cadherin、Vimentin、Snail）、MMP家族蛋白（MMP2、MMP9）及PI3K/Akt/mTOR信号通路相关的蛋白的表达水平。结果:1.MTT实验结果显示:SW982细胞用不同浓度的BAI处理24h、48h、72h、96h,与对照组比较,BAI用药组SW982细胞增殖能力受到明显抑制,并呈浓度和时间依赖性抑制（P＜0.01）,并选用0μM、15μM、25μM、50μM的BAI进行后续实验。2.平板克隆形成实验结果表明:SW982细胞经不同浓度的BAI处理后,与对照组比较,BAI用药组SW982细胞的集落形成能力显著被抑制,且抑制作用呈浓度依赖性（P＜0.01）。3.流式细胞术Annexin V-FITC/PI双染色法结果显示:经BAI处理SW982细胞48h后,0μM BAI（对照组）凋亡率为15.9%,而BAI浓度为50μM时细胞凋亡率高达31.6%,与对照组比较,BAI用药组SW982细胞的细胞凋亡率呈浓度依赖性升高（P＜0.01）。4.划痕愈合实验表明:与对照组比较,BAI用药组SW982细胞的横向迁移能力在48h和72h时均受到明显抑制,并呈浓度依赖性（P＜0.01）。5.蛋白印迹实验结果显示:（1）与对照组比较,BAI用药组SW982细胞中的促凋亡蛋白Cleaved-caspase 3、Caspase-3的表达水平显著升高,而抗凋亡蛋白Bcl-2的表达水平显著降低且Bcl-2/Bax比值明显降低（P＜0.05或P＜0.01）;（2）与对照组比较,BAI用药组SW982细胞中的Vimentin、Snail蛋白及MMP9、MMP2蛋白的表达水平显著降低,而EMT标志蛋白E-Cadherin的表达水平明显升高（P＜0.05或P＜0.01）;（3）与对照组比较,BAI用药组SW982细胞中的PI3K/Akt/mTOR信号通路相关蛋白p-PI3K、p-Akt和p-mTOR的表达水平明显下调（P＜0.05或P＜0.01）,而与其相关的总蛋白的表达水平无显著改变。结论:1.BAI抑制SW982细胞增殖、克隆形成、迁移和EMT进程并诱导细胞凋亡;2.BAI对SW982细胞增殖、凋亡、迁移的影响与PI3K/Akt/mTOR信号通路的调控相关。
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