【摘 要】
：
目的:抗中性粒细胞胞浆抗体相关性小血管炎（AAV）是一类涉及全身多器官小血管的自身免疫性疾病。多项研究均证实,抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA）具有致病性,直接参与了AAV的病程。病因学研究提示,ANCA相关性小血管炎的发病与慢性支气管炎等长期慢性炎症疾病相关。本研究提出假说:慢性支气管炎炎症微环境下反复感染可通过释放NETs,胞内抗原暴露,激活免疫系统,导致抗中性粒细胞胞浆抗体的产生。本研究将通过
论文部分内容阅读
目的:抗中性粒细胞胞浆抗体相关性小血管炎（AAV）是一类涉及全身多器官小血管的自身免疫性疾病。多项研究均证实,抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA）具有致病性,直接参与了AAV的病程。病因学研究提示,ANCA相关性小血管炎的发病与慢性支气管炎等长期慢性炎症疾病相关。本研究提出假说:慢性支气管炎炎症微环境下反复感染可通过释放NETs,胞内抗原暴露,激活免疫系统,导致抗中性粒细胞胞浆抗体的产生。本研究将通过LPS反复刺激NETs产生,诱导WKY大鼠ANCA产生,以及人重组髓过氧化物酶蛋白交叉免疫慢性支气管炎WKY大鼠产生ANCA产生两个角度验证假说。方法:1.LPS反复刺激慢性支气管炎WKY大鼠模拟反复感染过程40只WKY大鼠随机分为慢性支气管炎LPS刺激组（CB+LPS组）、LPS对照组（Sham+LPS组）、慢性支气管炎溶剂对照组（CB+PBS组）、空白对照组（Sham+PBS组）。其中CB+LPS组为实验组,使用脂多糖气管内滴注联合香烟烟雾暴露法构建慢性支气管炎模型后,连续4周LPS气管内注入,模拟反复感染过程。2.ELISA法检测血清MPO-ANCA及NETs相关标志性蛋白Cit H3水平4组大鼠每次LPS/PBS刺激24h后取血清,使用酶联免疫吸附法检测血清中MPO-ANCA滴度及Cit H3水平。3.免疫荧光双标法检测各组肺部NETs产生情况荧光双标法标记4组大鼠肺部NETs相关蛋白MPO、Cit H3并用DAPI定位细胞核,根据三种荧光的共定位情况及组织染色形态判断是否有NETs的生成。4.免疫组织化学法半定量评估肾脏炎症细胞浸润情况4次刺激后人道处死大鼠,取每只大鼠肾组织制作石蜡切片,分别使用抗CD3抗体及抗CD20抗体标记肾组织T、B淋巴细胞,使用H-SCORE法定量每张切片染色情况。5.人重组MPO蛋白交叉免疫慢性支气管炎大鼠与对照组15只WKY大鼠随机分为慢性支气管炎疾病背景免疫组（CB+h MPO组）,正常免疫组（Sham+h MPO组）,溶剂对照组（Sham+vehicle组）。CB+h MPO组与Sham+h MPO组分别在第1天与第14天,用400μg/kg的h MPO与等体积弗氏佐剂联合多点皮下免疫WKY大鼠。第21天ELISA法检测并比较三组大鼠血清MPOANCA水平。结果:1.脂多糖气管内滴注联合香烟烟雾暴露法建立了稳定的慢性支气管炎WKY大鼠模型2.CB+LPS大鼠体内MPO-ANCA滴度随刺激次数增加而增加。4次刺激结束后,CB+LPS组大鼠体内MPO-ANCA滴度显著高于Sham+LPS组、CB+PBS组及Sham+PBS组。3.根据NETs相关蛋白MPO、Cit H3及DAPI的免疫荧光染色共定位情况可见,CB+LPS组大鼠肺部有明显大量NETs产生,Sham+LPS组大鼠肺部有少量NETs产生,而Sham+PBS组与CB+PBS组无明显NETs的产生。4.CB+LPS组大鼠肾间质见到明显T、B淋巴细胞浸润,而对照组无T、B淋巴细胞浸润。5.慢性支气管炎疾病背景免疫组（CB+h MPO组）血清MPO-ANCA水平显著高于正常免疫组（Sham+h MPO组）与溶剂对照组（Sham+vehicle组）。结论:反复多次LPS刺激模拟感染可通过诱导NETs释放聚集导致慢性支气管炎大鼠产生MPO-ANCA,慢性支气管炎肺部慢性炎症环境可加强大鼠免疫系统对人重组MPO蛋白的免疫反应。提示慢性支气管炎的疾病背景是ANCA相关性小血管炎ANCA产生的易感因素。
其他文献
目的引入加拿大护理信息能力评估量表（Canadian Nursing Informatics Competency Assessment Scale,C-NICAS）,对其进行翻译、本土化修订与信效度检验;应用汉化完成的护理信息实践能力评估量表评价我国部分三级医院临床护士的护理信息能力水平现状并分析影响因素,同时基于三元交互理论构建临床护理信息能力三元交互关系模型。方法第一部分:获取C-NICAS
目的牙周炎是一种由菌斑微生物引起的慢性破坏性疾病,彻底消除炎症和获得组织再生是治疗牙周炎的理想目标。近年来,高脂血症与牙周炎的高度相关性为学者所共识,两者形成的恶性循环成为伴高血脂症性牙周炎治疗的难点。巨噬细胞是早期即参与牙周炎症反应的主要免疫细胞之一,涉及损伤和修复等过程。巨噬细胞的异质性和可塑性使其在复杂的局部环境中可极化为促进炎症发展的M1型和促进炎症消退的M2型,对巨噬细胞极化方向的调控是
目的:隐球菌性脑膜炎（Cryptococcal Meningitis,CM）是由新型隐球菌引起的中枢神经系统的感染,是艾滋病（Acquired Immune Deficiency Syndrome,AIDS）晚期常见的机会性感染之一,虽然抗逆转录病毒治疗（antiretroviral therapy,ART）和抗真菌药物已在临床广泛应用,但CM仍是AIDS患者死亡的重要原因。人体的免疫系统与神经系
研究目的:青少年骨性Ⅱ类错畸形是正畸临床中的常见疾病,对轻中度的青少年骨性Ⅱ类患者多采用功能矫治器治疗。临床资料发现,患者佩戴功能矫治器前导下颌,有助于髁突的适应性改建,而如果功能矫形力过大,下颌过度前伸,关节会出现不适的症状,严重者甚至会出现颞下颌骨关节炎。有学者的研究表明,内质网应激作为细胞对外界刺激做出的首要反应之一,过大或持续时间过长的刺激可激活下游的凋亡信号分子,其中PERK/CHOP信
目的:腰椎间盘突出症术后形成的瘢痕,会引起患者的疼痛,不适,瘙痒等。与其他类型瘢痕相似,腰椎间盘突出症术后形成的瘢痕也是一种良性皮肤病,成纤维细胞的异常增殖和细胞外基质的大量沉积是瘢痕的基本特征。阐明瘢痕形成的具体机制对瘢痕的预防和治疗具有重要意义。本研究收集女性腰椎间盘突出症术后瘢痕成纤维细胞,在体外细胞水平阐明RAB27B基因对女性瘢痕成纤维细胞的影响及其分子机制,加深对瘢痕发生发展的了解,并
目的:重症急性胰腺炎（Severe Acute Pancreatitis,SAP）常伴有肠粘膜屏障功能的损伤。近年来,细胞焦亡是炎性疾病的研究热点之一,而Gasdermin D（GSDMD）是细胞焦亡的关键蛋白,在Caspase激活后,GSDMD可裂解为N端和C端,其中N端可以在细胞膜上打孔,使细胞裂解焦亡。细胞焦亡在感染性疾病肠道损伤中发挥重要作用,但在SAP所造成的肠粘膜屏障功能损伤中是否发挥
目的肺癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一,严重威胁着人类的健康和生命,全球每年约有160万人死于肺癌。肺癌分为非小细胞肺癌和小细胞肺癌,其中非小细胞肺癌约占85%,是肺癌临床诊疗和科学研究工作中的重中之重。虽然近年来肺癌的诊疗技术有了很大进展和提高,但是由于局部复发和远处转移等问题,肺癌的治愈率和五年生存率仍然很低。因此,探索肺癌复发转移的机制是迫在眉睫的重要问题。造血底物相关蛋白1（HAX-1）是由
目的:类风湿关节炎（RA）是一种以滑膜关节慢性炎症为主要临床表现的系统性疾病,心血管疾病相关死亡是RA患者第一位死因。RA患者发生血管钙化的机制不清,现有研究提示血管平滑肌细胞（VSMC）在血管钙化的发生、发展中起关键作用。研究发现,IL6在诱导平滑肌血管钙化中发挥重要作用,但机制不明。本研究旨在探讨IL6诱导人脐动脉平滑肌细胞（HUASMC）成骨样分化及钙化的跨膜信号转导机制。方法:1.体外培养
目的:本研究旨在探讨脂氧素A4（lipoxin A4,LXA4）在烟曲霉菌（Aspergillus fumigatus,A.fumigatus）性角膜炎中的抗炎作用及机制。方法:（1）烟曲霉菌感染C57BL/6小鼠角膜,建立小鼠烟曲霉菌性角膜炎动物模型。通过ELISA检测正常组和感染组小鼠角膜中的LXA4的含量;（2）建立小鼠烟曲霉菌性角膜炎动物模型,使用5μL浓度为6μmol/L LXA4局部滴
目的:探究TAGLN在甲状腺乳头状癌中的作用及影响,发现与之相关的信号通路,寻找治疗甲状腺乳头状癌潜在的干预治疗靶点。方法:在青岛大学附属医院收集自2018年6月至2019年6月因患甲状腺乳头状癌（PTC）并行甲状腺切除术的100例患者的PTC组织及配对癌旁正常甲状腺组织,提取RNA及蛋白,分别采用实时定量PCR技术、Western blot方法分析PTC组织及其配对癌旁正常甲状腺组织中TAGLN