甲磺酸仑伐替尼对肝癌患者肠道菌群影响的实验研究

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目的:分析仑伐替尼对肝癌患者肠道菌群的影响,初步筛选出仑伐替尼治疗肝癌患者的潜在微生物标志物。方法:1.收集接受仑伐替尼治疗的肝癌患者的粪便标本进行肠道微生物检测。实验分组:仑伐替尼治疗前为对照组,仑伐替尼治疗后为实验组;3周为1个治疗周期,仑伐替尼治疗1周期为Time1组,仑伐替尼治疗2周期为Time2组。2.采用SPF级BALB/c小鼠按性别随机分为雌性对照组CF,雄性对照组CM,雌性实验组TF,雄性实验组TM。实验组予仑伐替尼灌胃,对照组予等量的DMSO灌胃,干预2周。干预前留取实验组小鼠粪便标本作为空白组,干预后留取所有小鼠粪便标本。3.采用16s rRNA Illumina高通量测序技术,对所有标本进行物种组成及丰度分析,揭示用药前后肠道菌群的物种构成,并进行物种多样性比较及组间物种差异性分析和宏基因组功能预测。结果:1.门、纲、目、科、属各分类水平,仑伐替尼对肝癌患者肠道菌群组成产生影响。从属水平上,用药后组较用药前组患者菌属相对丰度降低的有拟杆菌属、韦荣氏球菌属、埃希氏-志贺氏菌属、普雷沃氏菌属、Eisenbergiella;用药后组较用药前组患者菌属相对丰度升高的有链球菌属、巨球型菌属、粪杆菌、Subdoligranulum、双歧杆菌属。粪杆菌、双歧杆菌相对丰度较用药前组明显升高,Time2组较Time1组韦荣氏球菌属相对丰度升高,差异有统计学意义。2.仑伐替尼用药后肝癌组的生物标记物有梭菌纲、双歧杆菌属、双歧杆菌科、双歧杆菌目、粪杆菌、Butyricicoccus、Butyricicoccaceae、瘤胃菌科-uncultured、瘤胃菌科-Incertae_Sedis、毛螺菌科_NK4A136_组、瘤胃菌科、毛螺菌科_UCG_010共12种。3.宏基因组功能分析,在KEGG功能上两组样本在脂质代谢方面差异显著。用药后肝癌患者肠道菌群ko00121次级胆汁酸的生物合成和ko00120初级胆汁酸生物合成相对丰度较用药前患者显著升高,差异有统计学意义。4.小鼠菌群Lefse结果差异显著,各组间菌属差异较多,共筛选出101种具有统计学差异的菌类(LDA值>2)。其中TM.after组17种,TM组15种,TF.after组27种,TF组11种,CM组7种,CF组24种。结论:1.仑伐替尼可降低肝癌患者肠道菌群中致病菌的相对丰度,提升益生菌的相对丰度。2.仑伐替尼可调节小鼠肠道菌群,提升益生菌的相对丰度。
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