【摘 要】
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目的幽门螺杆菌毒力因子CagA在胃癌细胞中会导致粘蛋白MUC5AC表达上调,使其更易于定植于胃内,但其具体机制目前尚不清楚。故本课题在研究幽门螺杆菌毒力因子CagA对粘蛋白MUC5AC表达影响的基础上,进一步探讨CagA导致粘蛋白MUC5AC表达变化的相关分子机制。这不仅为幽门螺杆菌的根除提供新的治疗途径,也为胃癌的预防、诊断及治疗提供新的思路和方法。方法1.将CagA过表达质粒和空白质粒分别转染
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目的幽门螺杆菌毒力因子CagA在胃癌细胞中会导致粘蛋白MUC5AC表达上调,使其更易于定植于胃内,但其具体机制目前尚不清楚。故本课题在研究幽门螺杆菌毒力因子CagA对粘蛋白MUC5AC表达影响的基础上,进一步探讨CagA导致粘蛋白MUC5AC表达变化的相关分子机制。这不仅为幽门螺杆菌的根除提供新的治疗途径,也为胃癌的预防、诊断及治疗提供新的思路和方法。方法1.将CagA过表达质粒和空白质粒分别转染至人胃癌AGS、SGC7901细胞株,用WB和q PCR分别检测两组细胞中CagA蛋白和m RNA的表达情况,验证CagA是否转染成功。2.采用WB检测以上两组细胞中p-p65蛋白、p65蛋白和MUC5AC蛋白的表达情况,并用q PCR检测MUC5AC m RNA表达情况。3.将成功构建的沉默p65表达的干扰质粒shp65转染至已成功过表达CagA蛋白的人胃癌AGS、SGC7901细胞内,用WB分别检测p-p65蛋白、p65蛋白、MUC5AC蛋白的表达情况。4.在此基础上,再转染p65过表达质粒提高p65水平后,用WB分别检测p-p65蛋白、p65蛋白、MUC5AC蛋白的表达情况。结果1.WB（p＜0.001）和q PCR（p＜0.001）检测结果显示转染CagA过表达质粒组的人胃癌AGS、SGC7901细胞中CagA蛋白和m RNA表达水平高于转染空白质粒组。2.WB检测结果显示转染CagA过表达质粒组的人胃癌AGS、SGC7901细胞中p-p65蛋白（p＜0.001）和MUC5AC蛋白（p＜0.001）表达水平高于对照组,p65蛋白表达水平与对照组无明显差异（p＞0.05）,q PCR（p＜0.001）检测结果显示转染CagA过表达质粒组的人胃癌AGS、SGC7901细胞中MUC5AC m RNA表达水平高于对照组。3.沉默p65的表达后,WB（p＜0.001）检测结果显示p-p65蛋白、MUC5AC蛋白表达水平低于对照组。p65蛋白表达水平与对照组无明显差异（p＞0.05）。4.转染p65过表达质粒提高p65表达后,WB（p＜0.001）检测结果显示p-p65蛋白、MUC5AC蛋白表达水平显著增高。p65蛋白表达水平与对照组无明显差异（p＞0.05）。结论1.幽门螺杆菌毒力因子CagA可导致人胃癌细胞中粘蛋白MUC5AC表达上调。2.幽门螺杆菌毒力因子CagA可能通过NF-κB信号通路导致人胃癌细胞中粘蛋白MUC5AC表达上调。
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