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目的:明确英夫利西单抗(Infliximab)对出血性脑卒中小鼠脑部炎症反应的改善作用及机制,探索英夫利西单抗对脑出血小鼠预后的影响。方法:1.实验动物分组:本实验共选择C57BL/6 10月龄雄性小鼠144只,体重均在24g-26g,随机分为四组:(1)假手术组:36只,仅在左侧尾状核处颅骨打孔,微量注射器只进针不泵入胶原酶;(2)假手术+英夫利西单抗组:36只,仅在左侧尾状核处颅骨打孔,微量注射器只进针不泵入胶原酶,术后按照10毫克/千克的英夫利西单抗尾静脉给药,之后每天相同时间给药,连续用药3天;(3)脑出血组:36只,左侧尾状核处颅骨打孔,微量注射器进针并泵入0.5 ul含有0.075 U Ⅶ型胶原酶,造脑出血模型,术后NDS评分≥4分视为造模成功;(4)脑出血+英夫利西单抗组:36只,左侧尾状核处颅骨打孔,微量注射器进针并泵入0.5 ul含有0.075 U Ⅶ型胶原酶,造脑出血模型,术后NDS评分≥4分视为造模成功,在造模成功后按照10毫克/千克的英夫利西单抗尾静脉给药,之后每天相同时间给药,连续用药3天;2.Western blot法检测血肿周围炎症因子及c-Jun N末端激酶通路相关蛋白:各组小鼠脑出血术后24小时采用Western Blot法检测4组小鼠血肿周围肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)等炎症因子及JNK、P-JNK蛋白的相对表达水平;3.免疫荧光染色法检测炎症细胞的浸润情况:脑出血组及脑出血加用英夫利西单抗组小鼠于脑出血术后3天采用免疫荧光染色法检测并用荧光显微镜观察拍照及Image J软件定量统计星形胶质细胞、小胶质细胞及外周血中中性粒细胞的浸润情况;4.LFB/CV染色法检测脑部血肿体积:脑出血组及脑出血加用英夫利西单抗组小鼠于脑出血术后的第3天采用LFB/CV染色法检测脑损伤体积和脑肿胀程度,于术后第28天采用LFB/CV染色法检测残余病灶体积和脑萎缩程度;5.干湿重法测定脑含水量:各组小鼠于脑出血术后72小时,采用干湿重法根据Eliot公式计算脑组织含水量:脑含水量=(湿重-干重)/湿重×100%,对比观察英夫利西单抗对脑出血小鼠出血侧半球水肿程度的影响;6.神经功能缺损评分:于术后的第1天、3天、7天、14天和28天采用NDS、Corner turn实验检测各组小鼠神经功能行为学变化。结果:1.血肿周围炎症因子及c-Jun N末端激酶通路相关蛋白表达:Western blot法检测结果显示:与假手术组相比,脑出血组小鼠术后24h血肿周围TNF-α、IL-1β、IL-6及JNK、P-JNK的表达均有所升高,差异有统计学意义(P<0.05);与脑出血组相比,脑出血加用英夫利西单抗组小鼠术后24h血肿周围TNF-α、IL-1β、IL-6及JNK、P-JNK的表达均有所降低,差异有统计学意义(P<0.05);2.血肿周围小胶质细胞、星形胶质细胞的活化和中性粒细胞的浸润情况:免疫荧光染色法检测结果显示:与脑出血组相比,脑出血+英夫利西单抗组小鼠术后72h血肿周围活化的星形胶质细胞、小胶质细胞及外周血中中性粒细胞的浸润数量均有所降低,差异有统计学意义(P<0.05);3.脑部血肿体积、脑肿胀程度、残余病灶体积、脑萎缩程度:LFB/CV染色法检测结果显示:与脑出血组相比,脑出血+英夫利西单抗组小鼠术后72h的脑肿胀程度有所减轻,两组小鼠术后脑肿胀程度的差异性比较有统计学意义(P<0.05),但脑损伤体积比较无统计学意义(P>0.05);脑出血+英夫利西单抗组小鼠与脑出血组小鼠脑出血术后28天均有不同程度的残余病灶及脑萎缩,但两组小鼠残余病灶及脑萎缩体积的比较无统计学意义(P>0.05);4.脑含水量检测结果显示:与假手术组相比,脑出血组小鼠术后72h脑出血侧的含水量均明显增高,差异有统计学意义(P<0.05);与脑出血组相比,脑出血+英夫利西单抗组小鼠术后72h手术侧大脑半球含水量比较有所降低,差异有统计学意义(P<0.05);与脑出血组相比,脑出血+英夫利西单抗组小鼠术后72h非手术侧大脑半球和小脑的含水量对比无明显变化,差异无统计学意义(P>0.05);5.神经功能缺损评分结果:与假手术组相比,脑出血组1天、3天、7天、14天和28天的左转率及NDS评分总分在脑出血术后明显增高,差异性比较均有统计学意义(P<0.05);脑出血术后脑出血组及脑出血+英夫利西单抗组小鼠左转率及NDS评分总分在第1天最高,之后均有所好转;与脑出血组相比,脑出血+英夫利西单抗组术后第7天及第14天的左转率相比有所降低,差异性比较有统计学意义(P<0.05),但第1天、第3天及第28天的左转率差异性比较无统计学意义(P>0.05);与脑出血组相比,脑出血+英夫利西单抗组小鼠术后第3天、第7天及第14天的NDS评分总分相比有所降低,差异性比较有统计学意义(P<0.05),但第1天及28天的NDS评分总分差异性比较无统计学意义(P>0.05)。结论:1.英夫利西单抗可降低脑出血小鼠血肿周围TNF-α、IL-1 β、IL-6等炎症因子的表达及c-Jun N末端激酶通路相关蛋白的表达;2.英夫利西单抗可降低脑出血小鼠血肿周围小胶质细胞、星形胶质细胞的活化及外周血中中性粒细胞的浸润;3.脑出血+英夫利西单抗组小鼠术后72h相比脑出血组脑损伤程度虽然未减轻但脑肿胀程度及脑含水量有所减轻,术后28天的残余病灶体积及脑萎缩程度均无统计学意义,英夫利昔单抗对脑出血小鼠的远期病灶的恢复可能并无明显影响;4.脑出血+英夫利西单抗组小鼠术后第7天、14天的左转率及第3天、第7天、第14天的NDS评分总分相比脑出血组有所降低,但第1天、第3天、第28天的左转率及第1天、第28天的NDS评分总分相比脑出血组差异无统计学意义,在第28天,脑出血+英夫利西单抗组的NDS评分和左转率虽与脑出血组相比无统计学差异,但英夫利西单抗组仍有一定程度减轻,有好转趋势,后续治疗效果尚不明确,需增加观察时间。