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研究背景与目的:视神经脊髓炎（neuromyelitis optica,NMO）是中枢神经系统（CNS）炎症性脱髓鞘疾病,由体液免疫介导,细胞免疫广泛参与。临床表现为无法忽视的严重急性视神经炎（optic neuritis,ON）和长节段横贯性脊髓炎（longitudinally extensive transverse myelitis,LETM）,其中急性视神经炎（optic neuritis,ON）会反复发作且病症十分严重。该病年患病率约为（0.34-10）/10万,其中以非高加索人群为主,亚洲人和黑人族裔NMO患病率高于白人族裔,发病以中年女性为主,女性患者是男性患者的3～10倍。在多数患者中,存在致病性血清IgG自身抗体,尤其是针对水通道蛋白4（aquaporin4,AQP4）的抗体。尽管70%-90%的NMO患者血清中存在阳性表达的抗AQP4抗体,不少研究也证明抗AQP4的抗体参与NMO患者的发病机制。有动物实验研究报道,把AQP4-IgG和特异性的T细胞同时转移到小鼠体内,可以准确地诱导出实验小鼠的NMO病理改变,即中枢神经系统炎性脱髓鞘病变,然而,当单独转移AQP4-IgG时,并不能诱导小鼠产生典型的NMO病理改变。这提示我们仅有AQP4抗体的参与是不够的,T细胞在NMO的潜在发病机制中起不可或缺的重要作用。T辅助细胞17（Th17）细胞是发现较Th1/Th2晚的较新的一种T辅助细胞类型,这种细胞在白介素-6（IL-6）与转化生长因子-β（TGF-β）双重组合的诱导下可以产生较高水平的IL-17、IL-21、IL-22等促炎因子,具有非常强烈的促炎作用。越来越多的自身免疫性疾病相关研究中发现Th17发挥促炎等作用。趋化因子C-C基序配体20（chemokine ligand 20,CCL20）是一种含有70个氨基酸的成熟肽,本身所属为β类的趋化因子家族,是C-C趋化因子家族一员,主要参与自身免疫疾病和炎症性疾病的致炎过程,趋化因子C-C基序受体6（chemokine receptor 6,CCR6）为其对应的特异性受体,而且是其唯一的高亲和力受体,二者作用可诱导树突状细胞、T细胞定向迁徙。在CD4+T细胞的各种亚群中,CCR6在Treg和Th17细胞上高度表达,并驱动这些细胞迁移到富含CCL20的炎症组织中。CCL20/CCR6的重要作用主要表现在参与不同的自身免疫性疾病的组织炎症。Th17表面特异性表达高水平的CCR6,能趋化调节Th17细胞至炎症部位,参与炎症反应。CCR6+IL-17A+Th细胞（CCR6+Th17细胞）在多发性硬化（MS）,银屑病,系统性红斑狼疮（SLE）,类风湿性关节炎（RA）等涉及不同系统的自身免疫性疾病中被多数学者广泛研究,而对于NMOSD中研究少之又少,可能受制于NMOSD本身发病率低的影响。在AQP4阳性的NMO患者外周血中通过检测Th17细胞、CCR6+Th17细胞及血清CCL20水平,得到CCR6+Th17细胞亚群在Th17细胞中的比例及血清中CCL20的表达水平,统计学分析二者与患者临床特征如分期,严重程度和年复发率之间的相关关系。对CCR6+Th17细胞和CCL20在NMO发病和复发中的作用进行探讨。也为了寻找CCL20/CCR6趋化因子作为NMO全新的生物标志物的可行性,提供一些NMO接下来的靶向分子治疗研究的线索。方法:标本收集方法为2021年1月到2022年1月期间,收集AQP4+NMO的患者的血样,均来自于郑大一附院的神经内科,包括循环外周血和经过处理的血清,一并收集临床资料,共收集到NMO急性期28例,缓解期32例。健康对照组（healthy control,HC）选取则为30例自愿参加本研究的同期体检健康人的标本。实验方法选用流式细胞分析技术和酶联免疫吸附法（ELISA）,分别检测CD3+CD4+IL-17A+Th细胞比例及CCR6+IL-17A+Th细胞占总Th17细胞比例,和测定各组血清CCL20水平。SPSS26.0统计软件在本次数据处理中全程应用,数据均经过严格的正态性检验。定量数据根据分布的离散程度,采用均数和中位数分别描述;定性数据采用率和构成比描述。同时,采用差异性比较的方法来探讨不同组间有无统计学差异。例如,K-W检验或ANOVA方差分析和邦弗伦尼（bonferroni）法分别在多组和两组间进行差异性探讨;多组比较选择适用于两正态分布资料的pearson相关分析和偏态分布资料的Spearman相关分析,当P＜0.05时,有意义。结果:1.外周血中,NMO急性期组、缓解期组和对照组中Th17细胞比例急性期组、缓解期组和对照组中Th17细胞比例分别为（2.25±0.616）%、（1.35±0.481）%、（0.91±0.419）%,差异有统计学意义（p＜0.001）,统计分析处理后,急性期组高于缓解期组、对照组,且差异具有统计学意义（p＜0.001,p＜0.001）,缓解期组也高于健康对照组,差异也有统计学意义（p=0.003）。2.外周血中,NMO急性期组、缓解期组和对照组CCR6+Th17占总Th17细胞的比例外周血中NMO急性期组、缓解期组和对照组中CCR6+Th17占总Th17细胞比例分别为（96.94±1.04）%,（92.67±2.85）%,（89.20±2.84）%,差异有统计学意义（p＜0.001）,急性期组高于缓解期组和健康对照组,且差异具有统计学意义（p＜0.001,p＜0.001）,缓解期组也高于健康对照组,差异也有统计学意义（p＜0.001）。3.血清中,NMO急性期组、缓解期组和对照组中CCL20水平NMO 急性期组、缓解期组和对照组中血清CCL20,分别为58.25±19.20pg/mL,41.96±15.08 pg/mL,31.09±10.35 pg/mL,差异有统计学意义（p＜0.001）,急性期组高于缓解期组、健康对照组,且差异均具有统计学意义（p＜0.001,p＜0.001）,缓解期组高于健康对照组,差异有统计学意义（p=0.004）。4.NMO急性期和缓解期外周血中CCR6+Th17细胞占总Th17细胞的比例和血清CCL20水平的相关性急性期、缓解期组外周血CCR6+Th17细胞占比和血清CCL20水平存在正相关,有统计学意义（r=0.600,p=0.001;r=0.543,p=0.001）5.NMO患者急性期与缓解期拓展残疾量表（EDSS）评分与外周血CCR6+Th17细胞在总Th17细胞的占比的相关性急性期EDSS评分与外周血CCR6+Th17细胞占比存在正相关,相关系数r=0.514,有统计学差异（p=0.005）。缓解期EDSS与外周血CCR6+Th17细胞占比无明显相关关系,相关系数r=0.346,p=0.052。6.NMO患者急性期与缓解期拓展残疾量表（EDSS）评分与血清CCL20表达水平的相关性急性期组EDSS评分与血清CCL20表达水平存在正相关,相关系数r=0.529,有统计学差异（p=0.004）。而缓解期组EDSS评分与血清CCL20表达水平无明显相关,相关系数r=0.227,p=0.211。7.NMO患者急性期与缓解期组年复发率ARR与外周血CCR6+Th17细胞在总Th17细胞的占比的相关性急性期组、缓解期组年复发率ARR与外周血CCR6+Th17细胞占比均无明显相关（r=0.307,p=0.112;r=0.206,p=0.258）。8.NMOSD患者急性期与缓解期组ARR与血清中CCL20表达水平的相关性急性期组、缓解期组ARR与血清中CCL20水平均无明显相关性（r=0.26,p=0.182;r=0.05,p=0.788）。结论:1.NMO患者外周血CCR6+Th17细胞、血清CCL20参与NMO的发病,且在急性期作用更显著。2.NMO患者外周血CCR6+Th17细胞占比和血清CCL20水平存在正相关,CCL20/CCR6可能是通过发挥趋化因子对的趋化效应参与NMO发病,可作为潜在的分子治疗靶点。3.急性期NMO外周血CCR6+Th17细胞占Th17细胞比例和血清CCL20表达水平可反映疾病严重程度,可作为NMO急性期的潜在生物标志物。