本文在Khudyakov的研究基础上，选择甲肝病毒的五个主要抗原结构区进行原核克隆表达，探究这些蛋白作为诊断抗原的可能性。鉴于这些区域长度稍短，在N端融合表达硫氧还蛋白以提高产量和便于纯化。P3B区域只有20个氨基酸，P3A和P3B一起融合为P3AB表达。表达出的四个蛋白经纯化后，经间接ELISA和Western blot检测甲肝病人恢复期血清。结果证明P2A有较好的抗原活性，能够很好的区分阴性和阳性血清。 目前的甲肝诊断试剂所用的诊断抗原都是细胞培养的甲肝病毒经灭活得到，甲肝诊断试剂的生产存在以下问题：①生产周期时间较长；②生产成本较高；③操作活病毒，存在一定的生物安全隐患；④不能区分甲肝自然感染和注射疫苗所产生的不同免疫。 本研究筛选出的非结构蛋白P2A具有较好的抗原活性，可以很好的区分甲肝急性患者血清和正常人血清，很有希望做为一种新的诊断抗原来克服目前甲肝诊断试剂的问题。利用大肠埃希菌发酵来表达P2a蛋白，生产周期短，成本低，并且不接触活病毒，避免了生物安全问题，并且可以区分甲肝自然感染者和疫苗注射者，有着良好的应用前景。