黄绿青霉素对低硒低蛋白大鼠心肌损伤的初步研究

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黄绿青霉素(citreoviridiN,CIT)主要是黄绿青霉的次级毒性代谢物,分子由吡喃酮色基、多烯烃和氢呋喃环三部分组成,广泛存在于低温高湿地区被黄绿青霉等真菌污染的谷物中。黄绿青霉素具有神经毒性和心肌毒性,可引起生物机体广泛损伤,被怀疑是克山病的始动因子。本课题从CIT的生物合成、实验动物心肌损伤的病理形态,以及酶学改变等三个方面初步探讨CIT对低硒低蛋白大鼠心肌的损伤作用。   目的:研究黄绿青霉素致低硒低蛋白大鼠心肌损伤的特点   方法:购4周龄健康Wistar大鼠40只,按2×2析因设计以体重随机分为4组,每组10只,雌雄各半:(A)低硒低蛋白组;(B)低硒低蛋白加CIT组:(C)常硒常蛋白组;(D)常硒常蛋白加CIT组。正常喂养2个月后,开始在饲料中加5mg/kg体重CIT继续喂养1个月处死。观察心肌细胞病理改变,测定各组大鼠血清谷胱甘肽过氧化物酶活力、肌酸激酶活力、白蛋白定量与心肌SOD活力。   结果:1.黄绿青霉素粗毒素的生物合成与纯化。市售大米加入40%的蒸馏水,高压灭菌后,将长满黄绿青霉菌的琼脂接种于灭菌的大米中混匀,置于25℃培养5d待肉眼观察粮食发生绿色霉变后,再于15℃培养14d。霉变的粮食用无水乙醇没过浸泡4h,纱布滤出提取液,渣滓再于无水乙醇中浸泡过夜,第2d过滤,与前一天的滤液合并,于旋转蒸发仪内60℃浓缩,得到黄绿青霉素浓缩提取夜,即得到粗毒素。   2.CIT对低硒低蛋白模型大鼠心肌损伤观测。每天5mg/kg体重CIT光镜下未见大鼠心肌发生改变;电镜下观察,实验组心肌细胞核轻度固缩状态,核周可见大量游离核蛋白体,肌丝间出现大量糖原堆积,线粒体膜改变不很明显,但核旁细胞器数量明显减少。生化检测表明CIT可使大鼠血清中谷胱甘肽过氧化物酶、心脏体重比、血清Se水平、白蛋白等指标各组之间产生统计学差异。
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