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【研究背景】胃癌（Gastric cancer,GC）是常见的恶性肿瘤,在全世界范围内,其发病率和死亡率分列第五和第三位。在中国,胃癌的发病率和死亡率在恶性肿瘤中均排名第二。据统计,每年因胃癌死亡人数达到67.9万人。肠型胃癌的发展模式遵循Correa模型,其中肠化生（Intestinal metaplasia,IM）是重要的胃癌癌前病变。无论是否根除幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,H.pylori）,胃黏膜IM都能显著增加胃癌风险,是胃癌发生的独立危险因素。根据我国胃癌年死亡人数与IM患者3‰的年胃癌进展率计算,预计至少有2亿以上的IM患者都需要根据指南推荐进行内镜或组织病理学随访。但由于现实中内镜医生相对缺乏、检查费用昂贵等原因,难以对所有IM患者进行内镜随访。因此临床急需能够高效对IM患者进行风险分层及胃癌预警的方法。目前,胃癌癌前病变风险分层方法如可操作的与胃癌风险联系的胃炎评估（Operative link for gastritis assessment,OLGA）和可操作的与胃癌风险联系的肠化生评估（Operative link for gastric intestinal metaplasia assessment,OLGIM）分期系统,不完全型IM表型和血清胃蛋白酶原（Pepsinogen,PG）等血清学标志物都曾在中外指南中被推荐。但由于上述方法识别高危IM患者的能力有限,胃癌预测效率不够理想,临床适用性较差等原因,还未在临床广泛应用。更重要的是,上述三种方式所识别的“高危”IM患者最终真正进展为胃癌年进展率也仅为不到2%。我们进行文献回顾、搜索和分析后,筛选出了三个对IM癌变可能具有预测价值的分子,包括胃癌相关抗原MG7-Ag、人类端粒酶逆转录酶（human telomerase reverse transcriptase,hTERT）和三叶因子2（Trefoil factor family 2,TFF2）。在正常胃黏膜和慢性胃炎组织,MG7-Ag和hTERT不表达或呈弱表达。在IM等癌前病变组织,MG7-Ag和hTERT表达水平相对升高。而在胃癌组织,MG7-Ag和hTERT表达显著升高,并呈现强阳性表达水平。研究发现,MG7-Ag联合环氧化酶（Cyclooxygenase-2,Cox-2）对胃癌癌前病变进展具有较高的预警价值,hTERT与IM组织中细胞的增殖状态密切相关。TFF2在IM中表达水平较正常胃黏膜显著降低。研究表明,TFF2表达缺失与胃癌发生有关。由此提示,表达MG7-Ag和hTERT且低表达或不表达TFF2的IM组织发生癌变的可能性最大。本研究将借助发生癌变的IM队列和未发生癌变的IM队列,以上述三个分子为对象和指标,构建并验证IM的癌变预测模型,为IM随访和胃癌预警提供实验依据。第一部分MG7-Ag、hTERT及TFF2对高危肠化生的识别及胃癌预测模型构建【目的】对比MG7-Ag、hTERT及TFF2在不同结局IM组织的表达水平,并构建胃癌风险预测模型。【方法】本部分采用病例对照研究,纳入2009年7月到2019年9月西京医院就诊的68名患者,病例组为进展为胃癌的高危IM组（IM-GC组）,对照组为自身前后对照胃癌组（GC组）、同期对照为未进展为胃癌的低危IM组（IM-No GC组）和慢性胃炎（Chronic gastritis,CG）组（CG-No GC组）,各17例。通过免疫组化检测,对MG7-Ag、hTERT及TFF2表达水平进行组间对比和组内对比。对IM进展为胃癌的相关因素进行单因素及多因素Logistic回归分析,并构建联合预测模型。对IM癌变时间相关因素进行单因素及多因素COX回归分析。【结果】MG7-Ag、hTERT及TFF2的表达水平在病例组和对照组中存在显著差异（P＜0.05）。组间比较发现MG7-Ag在IM-GC组和IM-No GC组间表达水平无显著差异（P＞0.05）,在GC组表达水平升高,在CG-No GC组呈低表达或不表达;hTERT在IM-GC组表达水平高于IM-No GC组（P＜0.05）,在GC组呈高表达,在CG-No GC组呈低表达或不表达;TFF2在IM-GC组表达水平低于IM-No GC组（P＜0.05）,在GC组呈低表达,在CG-No GC呈高表达。组内比较发现,不同IM程度的患者MG7-Ag、hTERT及TFF2表达水平均无显著差异（P＞0.05）。hTERT和TFF2单分子染色评分与IM进展为胃癌相关。将MG7-Ag、hTERT和TFF2纳入构建胃癌预测模型,构建三分子联合模型1（MG7-Ag+hTERT+TFF2）和两分子联合模型2（hTERT+TFF2）。MG7-Ag、hTERT及TFF2表达水平与IM癌变时间无关。【结论】hTERT和TFF2单分子表达能够区分IM-GC和IM-No GC,与IM进展为胃癌相关。高表达MG7-Ag、hTERT和低表达TFF2能够较好地预测IM癌变。第二部分MG7-Ag、hTERT及TFF2联合预测模型的验证及对胃癌的预警价值【目的】验证模型1（MG7-Ag+hTERT+TFF2）和模型2（hTERT+TFF2）对IM患者的胃癌预警价值。【方法】本部分采用回顾性前瞻性队列研究,建模队列由第一部分研究的IM-GC组和IM-No GC组组成,进行内部验证;验证队列纳入西京医院2019年10月到2020年12月确诊为胃癌的IM-GC组患者8例,未进展为胃癌的同期对照IM-No GC组23例,共31例。对验证队列进行分子免疫组化染色评分。将建模队列和验证队列的实测评分数据代入模型1和模型2进行验证、评价及对比。在验证队列中对IM的癌变时间进行COX回归分析。【结果】验证队列中,hTERT在IM-GC组中表达水平显著高于IM-No GC组（P＜0.05）。MG7-Ag和TFF2表达水平在IM-GC组与IM-No GC组间均未见显著差异（P＞0.05）,MG7-Ag在IM-GC组中染色中强阳性率高于IM-No GC组（37.5%vs 4.35%）,TFF2在IM-No GC组中染色强阳性率高于IM-GC组（26.09%vs 12.5%）。验证队列中不同IM程度的患者MG7-Ag、hTERT及TFF2表达水平均无显著差异（P＞0.05）。内部验证中,模型1（MG7-Ag+hTERT+TFF2）和模型2（hTERT+TFF2）的AUC值均为0.971,模型1敏感度为88.2%,特异度为100%;模型2的敏感度为82.4%,特异度为100%;外部验证中,模型1的AUC值为0.87,敏感度为75%,特异度为87%;模型2的AUC值为0.84,敏感度为100%,特异度为65.2%。两个预测模型均有较好的区分度和校准度。【结论】MG7-Ag、hTERT及TFF2单分子识别进展为胃癌的IM能力有限,联合预测模型能弥补单分子的不足。两模型都能对IM患者进行胃癌风险预测,并表现出了较好的区分和校准能力,MG7-Ag、hTERT和TFF2联合预测模型效果优于hTERT和TFF2联合预测模型,且显著优于既往报道。该发现可能具有重要的临床应用价值。