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目的： 慢性根尖周炎多为牙髓病的继发感染引起,是一种发生于人根尖周组织的炎症性疾病.在人根尖周病损组织中存在的各种炎症细胞、细胞因子和趋化因子可导致根尖周胶原纤维破坏,形成持续的炎症并伴随骨质的破坏吸收.研究显示,在人根尖周的病变组织中存在着大量的淋巴细胞(Lymphocytes,LYMs)、巨噬细胞(Macrophages,M(o))和浆细胞等,另外可见成纤维细胞(Fibroblasts,FBs)增生,新生的毛细血管常衬以肿胀的内皮细胞(Endothelial cells,ECs). 干细胞因子(Stem cell factor,SCF)又称为青灰因子(Steel factor,SF)或c-Kit配体,具有膜结合型(membrane-bound SCF,mSCF)和可溶解型(soluble SCF,sSCF)两种蛋白表达形式.目前研究证实SCF/c-Kit信号与炎症反应、过敏性哮喘以及肝组织纤维化等疾病均有密切的关系.然而关于SCF在人慢性根尖周炎病变组织中FBs、ECs和M(o)上表达的研究尚未见报道.本课题通过HE染色法和双重免疫荧光标记法,在荧光显微镜下分别观察不同组别的根尖周组织标本中CD334-SCF(FBs标记蛋白)双阳性的FBs、CD31-SCF(ECs标记蛋白)双阳性的ECs以及CD14-SCF(M?标记蛋白)双阳性的M?的表达情况,进一步探讨SCF阳性的FBs、ECs和M?在人慢性根尖周炎发病机制中的作用,研究结果将为后续研究以SCF为靶点的人慢性根尖周炎的免疫防治机制提供理论基础和实验依据. 方法： 自愿参与本研究的50名受试对象均选自于2014年10月到2016年5月间在暨南大学研究生联合培养基地(广州市荔湾区口腔医院)就诊的患者.根据纳入标准分为三组:其中,根尖周囊肿组和肉芽肿组分别为15例;正常对照组20例.临床采集的组织标本取出后立即置于10%的中性福尔马林溶液中固定48h以上,经石蜡包埋后,制作5μm厚度的连续切片.HE染色后,在光学显微镜下分别对3组标本切片进行观察分析.采用双重免疫荧光标记法,在荧光显微镜下观察3组组织标本中CD334-SCF双阳性FBs、CD31-SCF双阳性ECs及CD14-SCF双阳性M(o)的数目及表达情况.采用SPSS13.0统计软件处理数据,各组标本组织中CD334-SCF双阳性FBs、CD31-SCF双阳性ECs、CD14-SCF双阳性M(o)平均密度之间的比较,采用完全随机设计的多个独立样本比较的Kruskal-Wallis检验,采用Nemenyi检验进行三个独立样本两两间比较分析.以P<0.05为差异具有统计学意义. 结果： 1.HE染色结果: 正常对照组:牙周膜组织的结构完整,未见明显的炎症细胞浸润;根尖周肉芽肿组:可见毛细血管增生以及大量慢性炎症细胞分布,包括浆细胞、M(o)、LYMs和中性粒细胞等;根尖周囊肿组:上皮层可见细胞间水肿和大量以中性粒细胞为主的炎症细胞浸润,纤维组织层以胶原纤维为主,未见明显的炎症细胞浸润. 2.免疫荧光双染色结果: 1)与正常对照组相比较,两组慢性根尖周炎病变组织中的CD334-SCF双阳性FBs、CD31-SCF双阳性ECs以及CD14-SCF双阳性M?的表达密度明显增多(P<0.01); 2)CD334-SCF双阳性FBs及CD31-SCF双阳性ECs的密度在两组慢性根尖周炎组织间无显著性差异(P>0.05); 3)根尖周肉芽肿组中CD14-SCF双阳性M(o)的密度明显高于根尖周囊肿组(P<0.01). 结论： 1.慢性根尖周炎病变组织中FBs、ECs及M?的数量明显增多,同时两组实验组中CD334-SCF双阳性FBs、CD31-SCF双阳性ECs及CD14-SCF双阳性M(o)的密度较正常对照组均显著增高. 2.根尖周肉芽肿组中CD14-SCF双阳性M?的密度水平高于根尖周囊肿组. 3.CD334-SCF双阳性FBs、CD31-SCF双阳性ECs及CD14-SCF双阳性M(o)可能与慢性根尖周炎的致病机制有关,尤其可能在促进根尖周炎的发展和炎症的局限上起双重作用.