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目的胃癌（gastric cancer,GC）是全球癌症死亡的重要原因,死亡率一直居高不下,原因主要在与大多数GC病例诊断出来的时候已经处于癌症晚期,进而影响患者的预后。不幸的是,现有的用于GC诊断和预后生物标志物的敏感性和特异性较低。GC作为一种复杂且高度异质的疾病,进一步探索特定的生物标志物是改善GC诊断和预后的医学需求。Wnt信号转导级联是生命体内调节生长发育的关键步骤,Wnt通路的稳定也是组织干细胞以及各组织细胞交互系统的基础。低密度脂蛋白（LDL）受体相关蛋白8（LRP8）已经在许多癌症中发现是Wnt/β-catenin信号传导的正调节因子。此外,在幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,Hp）导致胃癌的多种机制中,Wnt/β-catenin信号通路的激活是其中重要的作用机制之一。Hp感染导致β-catenin从细胞质转移至细胞核内,并诱导大量的肿瘤相关基因的编码。鉴于在胃癌中LRP8对肿瘤的影响尚未得到深入的研究,因此本研究探索了LRP8在胃癌及Hp感染过程中的表达及其发挥的功能,以探索LRP8作为Hp感染相关胃癌潜在治疗靶点的可能性。方法1.)数据库中比较了LRP8在胃癌375个胃癌患者样本以及32个正常人健康胃粘膜样本中表达量差异。通过RT-qPCR技术计算了30例胃癌患者癌组织及癌旁组织中LRP8的相对表达量。在胃正常细胞系GES-1,胃癌细胞系MGC803和SGC7901中使用RT-q PCR和Western Blot方法分析了LRP8的表达量。2.在TCGA公共数据库中,使用共表达分析筛选出在胃癌数据中LRP8共表达的前200个基因进行GO功能和KEGG通路富集分析,然后通过PPI分析LRP8与Wnt通路相关蛋白可能的相互作用关系。3.对LRP8相对高表达的MGC803细胞使用RNA干扰技术敲低了LRP8的表达,对LRP8相对低表达的SGC7901细胞使用转染质粒来从TCGA(https://portal.gdc.cancer.gov过表达LRP8。通过迁移实验,细胞划痕实验以来分析了LRP8对胃癌细胞的迁移的影响,并通过补充wnt3a因子观察细胞迁移能力的改变。4.通过Western Blot技术,在LRP8敲低的MGC803细胞中观察了Wnt通路相关蛋白的表达水平,以及补充Wnt3a因子对LRP8和Wnt相关蛋白的影响。5.使用Hp感染MGC803和SGC7901细胞,通过Western Blot观察细胞内LRP8表达水平的变化。进一步运用免疫荧光技术,分析了LRP8对HP感染导致的β-catenin核转位的影响。6.在TCGA数据库中,计算了LRP8表达与胃癌患者临床特征的关系（年龄和胃肠型等）,以分析LRP8表达与胃癌患者临床特征的相关性。结果1.TCGA数据库中使用Wilcoxon的符号秩检验分析了肿瘤和正常组织之间LRP8的差异表达,结果显示在肿瘤内有着显著升高（P＜0.0001）。根据样本名进行匹配,可以发现LRP8在肿瘤内表达量比癌旁正常组织表达量显著升高（P＜0.0001）。收集的胃癌组织和癌旁组织RT-PCR结果显示,在胃癌组织中,LRP8的相对表达量增加（P＜0.05）。细胞系GES-1,MGC803和SGC7901的RT-PCR和Western Blot结果显示,MGC803中LRP8相对表达量较高,SGC7901中LRP8相对表达量较低。2.TCGA数据库胃癌数据中,LRP8共表达的前200个基因的GO功能和KEGG通路富集结果显示与Wnt通路有关。进一步对LRP8和Wnt通路相关蛋白构建蛋白相关作用网络,结果显示LRP8可能通过调控AXIN2和β-catenin来影响Wnt信号通路。3.细胞功能实验结果表明,LRP8敲低的MGC803和过表达的SGC7901细胞均较对照组表现出明显的侵袭能力变化。在LRP8敲低的MGC803中,细胞迁移能力下降,但在补充Wnt3a因子以后迁移增加;在LRP8过表达的SGC7901细胞中,迁徙能力明显增加。细胞增殖方面,LRP8敲低的MGC803细胞以及补充Wnt3a后,细胞的增殖并未出现明显差异;LRP8过表达的SGC7901细胞增殖率对比空载质粒明显增加（P＜0.01）。4.Western Blot结果显示,在LRP8敲低的MGC803细胞中Wnt通路相关蛋白（AXIN2和CYD1）的表达水平下降,补充Wnt3a因子后LRP8和Wnt相关蛋白（AXIN2和CYD1）的表达量增加。5.LRP8过表达的SGC7901相较于空载质粒,对5-FU的耐受度明显提高（LRP8过表达:IC50=14.75μg/ml;PCDH IC50=6.26μg/ml）。6.HP感染可以导致肿瘤细胞内LRP8蛋白表达水平的增加,并且与感染时长呈正相关。Hp感染可以引起细胞质内的β-catenin转移到细胞核内,而LRP8的敲低,可以对这一过程产生一定的抑制作用。7.LRP8与胃癌患者临床特征的相关性显示,LRP8高表达与胃癌患者较高的年龄（≥65岁）和更差的分型（肠型）有关。结论LRP8在胃癌组织中高表达,通过参与激活胃癌细胞中wnt通路促进胃癌细胞迁移表型和Hp感染诱导的β-catenin核转位,从而促进Hp对细胞的损伤,有望成为胃癌治疗过程中的新靶点。