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目的:建立慢性应激卵巢早衰大鼠模型(POF)并用中药木尼孜其进行干预,检测其血清中代谢物的变化,寻找慢性应激POF大鼠血清代谢标志物,研究中药木尼孜其的作用靶点。方法:(1)选出90只具有正常性周期的雌性SD大鼠,用随机抽取法抽10为正常组(N组),80只为慢性应激模型组,正常组大鼠在正常环境(温度T为18-22℃,湿度H为55-65%)下进行饲养,模型组大鼠在湿寒环境(温度T为7℃,湿度H为85%)下进行造模。在造模期间观察所有大鼠的生物学特征并记录。模型建立以后,检测所有大鼠的血清雌性激素FSH、E2及LH含量。之后根据大鼠的生物学特征、发情周期的紊乱情况以及血清雌性激素水平的变化情况从该模型组中筛选出已经成为卵巢早衰的大鼠,分为应激POF模型组(S-POF组)和应激POF药物干预组(S-PTD组);将没有完全成为卵巢早衰的大鼠分为应激模型组(S组)和应激药物干预组(STD组)。应激POF药物干预组和应激药物干预组进行药物灌胃两个星期后,所有的实验大鼠采用ELISA法检测外周血清FSH、E2、LH含量;(2)采用~1H-NMR技术检测各组大鼠血清代谢物变化;(3)采用ELISA法对乳酸在各组大鼠血清中的含量进行检测和验证;用免疫组织化学方法检测TGF-β1、Smad2在各组大鼠卵巢中的表达。结果(1)与N组相比,S-POF组、S组大鼠外周血清中E2含量明显下降(P<0.05),FSH和LH含量较N组显著上升(P<0.05),通过药物干预后,能调节各组大鼠激素水平;(2)与N组相比较,S-POF组大鼠血清中乳酸、乙酰天冬氨酸、α-酮异戊酸、γ-氨基丁酸、赖氨酸、酪氨酸、胆碱、抗坏血酸、β-葡萄糖含量显著降低;β-羟丁酸、丙酮酸、谷氨酸、天冬氨酸、胍基乙酸、肌酸、苯丙氨酸含量显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。(3)与S-POF组相比较,S-PTD组大鼠血清中乳酸、乙酰天冬氨酸、赖氨酸、胆碱、抗坏血酸、β-葡萄糖含量显著升高;β-羟丁酸、丙酮酸、谷氨酸、肌酸含量明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。(4)ELISA试验结果显示,与N组相比,S-POF组的血清乳酸含量明显降低(P<0.05),通过中药木尼孜其干预后S-PTD组乳酸含量较S-POF组显著升高(P<0.05)。(5)免疫组织化学结果显示:TGF-β1蛋白主要在初级卵泡卵母细胞,膜细胞及颗粒细胞中表达,TGF-β1蛋白在S-POF组和S组卵巢组织细胞中的表达较N组相比显著降低,差异具有统计学意义(P<0.05),通过药物干预后,在S-PTD组和STD组卵巢组织细胞中的表达明显上升;Smad2在黄体和闭锁卵泡中高表达,在原始卵泡和生长卵泡中低表达,Smad2蛋白在S-POF组和S组卵巢组织细胞中的表达较N组相比显著下降,差异具有统计学意义(P<0.05),通过药物干预后,在S-PTD组和STD组卵巢组织细胞中的表达显著升高。结论:(1)α-酮异戊酸、乳酸、乙酰天冬氨酸等16种代谢物可能是应激POF大鼠模型候选血清代谢标志物;乳酸、β-羟丁酸、丙酮酸、谷氨酸等10种代谢物初步可能是木尼孜其治疗慢性应激卵巢早衰的血清候选代谢标志物靶点。(2)乳酸可初步确定为应激POF大鼠模型血清代谢标志物和木尼孜其治疗该应激POF模型的血清代谢标志物。(3)代谢物乳酸含量的异常改变可能是通过影响TGF-β1和Smad2蛋白的正常表达,从而在慢性应激卵巢早衰大鼠模型发生中发挥重要的作用,中药木尼孜其可能是通过修复大鼠内分泌系统的紊乱,调节代谢物含量的异常变化而影响卵巢功能相关蛋白质的正常表达,改善POF。