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整合素连接激酶相关磷酸酶(ILKAP)是蛋白磷酸酶2C(PP2C)家族的新成员,虽然目前国际上对它的认识还很有限,但初步的研究结果已显示这是一种与细胞凋亡信号通路密切相关的蛋白磷酸酶。ILKAP广泛表达于人体组织中,在骨骼肌、肾脏、肝脏中有高水平的表达。介导细胞凋亡是ILKAP的主要生理功能,因而与肿瘤的发生、发展密切相关。ILKAP可能通过负调控整合素激酶信号通路,以及正调控c-Jun氨基末端激酶/促分裂原活化蛋白激酶(JNK/MAPK)信号通路发挥作用。另外,在很多肿瘤细胞中,存在ILKAP基因的杂合性缺失或突变体,使ILKAP不能正确表达,从而不能介导肿瘤细胞的凋亡。尽管ILKAP通过调节ILK的活性,起到负调控细胞周期并促进细胞凋亡的作用。有关于ILKAP抑制ILK-Integrin信号通路的机制目前还不清楚。在本文中我们提出了一种ILKAP调节ILK-Integrin信号通路的机制。我们发现在多种肿瘤细胞中,ILKAP的表达水平很低,通过筛查多种肿瘤细胞系及肿瘤组织中ILKAP的突变情况,我们发现HeLa细胞及一种胃癌组织中ILKAP基因存在突变。导致细胞内最终翻译的ILKAP移码突变,不能表达有催化功能ILKAP。我们已将发现的mRNA序列递交到GeneBank数据库。我们还发现介导ILKAP细胞核定位的核定位信号序列(NLS)存在于ILKAP-N截短体(ILKAP 1-107氨基酸)中。在致死性刺激(50 mM乙醇,冰水混合物,43度水浴,UV照射)存在的条件下,ILKAP表达水平明显的上升,并且ILKAP的细胞定位有向细胞膜Integrin亚结构聚集的改变。我们还发现,在致死性刺激存在下,ILKAP可以与Integrin-β1亚基以及ILK-1共定位。并且ILKAP可以影响Integrin通路关键因子GSK3β活性,即通改变GSK3β第9位丝氨酸磷酸化性质。然而ILKAP并不能调节Integrin通路另一关键因子PKB的活性。PKB关键磷酸化位点丝氨酸473位并没有被ILKAP调节。通过以上研究,我们认为ILKAP可能为ILK-integrinβ1信号通路的负调控因子,其与ILK-integrinβ1形成复合体是其对ILK-integrinβ1信号通路调节的关键因素。另一方面,我们发现了一种新的与ILKAP相互作用的蛋白palladin。我们发现palladin 710-1106氨基酸截短体以及ILKAP-C(108-392氨基酸)截短体介导了ILKAP与palladin的相互作用。而ILKAP所导致的细胞凋亡作用可以被palladin沉默表达所抑制。我们提出palladin与ILKAP相互作用的生物学意义就是palladin运输细胞浆ILKAP并参与ILKAP介导的细胞凋亡过程。