目的： 膜性肾病(membranousne nephropathy MN)是以肾小球基底膜上皮细胞下免疫复合物沉积为特点的一种肾小球疾病，常表现为肾病综合征。临床以大量蛋白尿、低蛋白血症、高度水肿和高脂血症为主要表现。本病的发病率较高，国内10594例肾活检病理资料分析显示，原发性肾小球疾病中膜性肾病占第3位(9.54％)，且近10年来明显增多<'[1]>。其病变呈慢性进行性发展，多发展为肾小球硬化和肾间质纤维化，约25％的患者最终出现肾功能衰竭<'[2]>，严重影响患者身心健康和生活质量。目前西医治疗主要是通过糖皮质激素或免疫抑制剂调节体液和细胞免疫功能，但单用糖皮质激素或免疫抑制剂难以全面的控制疾病，且有较大的副反应<'[3]>。中医药治疗本病疗效较好，毒副作用小，所以被广泛的应用于临床。 导师陈志强教授根据膜性肾病的病因病机特点，提出了健脾补肾固其本，活血化瘀通络、清热利湿泄浊治其标，多法并举的治疗思路，并在此法指导下结合现代药理研究，创立了治疗膜性肾病的有效中药复方-肾舒康(ShenshukangSSK)。 本课题通过复制与人类膜性肾病极其相似的大鼠主动型Heymann肾炎(Active Heymann Nephropathy AHN)模型，并用肾舒康对其进行干预性治疗，同时用免疫抑制剂雷公藤多甙(Tripterygium wilfordii Glycoside TWP)为对照，旨在通过观察AHN模型大鼠的尿蛋白、血生化指标与肾脏病理形态学改变，明确肾舒康在AHN疾病过程中的干预作用，为该方临床应用提供科学的实验依据。 方法： (1)制备肾皮质匀浆：选取健康雄性SD大鼠(清洁级)，戊巴比妥钠麻醉，在无菌条件下剖开腹腔，结扎肾动脉，自结扎处向肾脏插管，剪断肾静脉，经插管用生理盐水反复冲洗肾脏后，取下肾脏；剪取肾皮质，充分研磨后加入适量生理盐水，通过铜丝筛网过滤，收集滤液，离心取上清，然后经超速离心后，双蒸水洗涤3次，收集沉淀；每次用时，取20g皮质，加完全弗氏佐剂40ml。 (2)造模：选用同种清洁级SD大鼠40只，普通饲料适应性喂养1周，检测尿蛋白和尿红细胞均为阴性。按体重随机分为2组，正常组(Normal groupes,10只)和造模组(Model Made groupes,30只)。造模组大鼠腹腔注射上述大鼠肾皮质十弗氏佐剂乳液，每次2ml/只，每两周注射1次，共注射4次。造模8周后，造模组随机抽取3只，正常组随机抽取1只大鼠，麻醉后摘取肾脏，分别取样行光镜及电镜检查，结果提示造模组AHN模型成功。在此基础上，根据24h尿蛋白将造模组大鼠随机分为3组：模型组(Model groupe)、雷公藤多甙组(Tripterygitimwilfordii Glycoside group TWG)和肾舒康组(Shenshukanggroupe SSK)，每组9只。 (3)药物干预：实验第9周开始给药，连续4周。雷公藤多甙组按9.45mg/Kg/d灌胃给药，肾舒康组按人与大鼠体表面积换算的等效剂量19.38g/kg/d灌胃给药，正常组和模型组灌服等量蒸馏水，均每日一次，治疗连续4周。各组动物自由进食、饮水。 (4)观察指标：于实验第4，8，10，12周放入大鼠代谢笼中(每笼1只)收集24h尿液，测定各组大鼠24h尿蛋白的含量。第12周末杀检动物，股静脉取血，用全自动生化分析仪检测各组大鼠血总蛋白(TP)、白蛋白(Alb)、血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、全血黏度(ηb，高切、低切)、血浆黏度(ηp)、纤维蛋白原(Fig)、红细胞压积比(HCT)、尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)。肾组织行光镜、电镜、免疫荧光检查。 结果： (1)24h尿蛋白定量免疫第4周末开始除正常组外造模组大鼠均出现明显尿蛋白，与正常组比有明显差异(P<0.05)；免疫第8周末造模组尿蛋白明显升高，与正常组相比有非常显著性差异(P<0.01)；肾舒康组与雷公藤多甙组第10周末24h尿蛋白定量与模型组相比明显下降(P<0.05)；第12周末两治疗组尿蛋白与模型组相比，出现非常显著性差异(P<0.01)，肾舒康组与雷公藤多甙组第10、12周末24h尿蛋白相比，无明显差异(P>0.05)。 (2)实验第12周末各组生化检测模型组血TP、Alb较正常组明显降低(P<0.01)；两治疗组TP、Alb与模型组相比明显升高(P<0.01)；两治疗组之间相比无明显差异(P>0.05)；模型组与正常组相比，血清TC、TG、LDL均明显增高(P<0.01)，HDL则明显降低(P<0.01)；两治疗组与模型组相比，血清TC、TG、LDL明显降低(P<0.01)，而HDL则显著升高(P<0.01)；两治疗组之间无明显差异(P>0.05)；模型组血清BUN、Scr与正常组相比显著升高(P<0.01)；两治疗组与模型组相比，血清BUN、Scr明显降低(P<0.01)；两治疗组之间无明显差异(P>0.05)；模型组血液粘稠度(ηb、ηp、Fig、HCT)与正常组相比显著升高(P<0.01)；两治疗组与模型组相比，血液粘稠度(ηb、ηp、Fig、HCT)明显降低(P<0.01)；两治疗组之间无明显差异(P>0.05)。 (3) 肾组织病理形态学观察光镜检查：模型组肾小球基底膜弥漫增厚，毛细血管腔狭窄或消失，肾小球部分代偿性增大，可见肾小球硬化；两个治疗组与模型组相比，上述病理改变明显减轻，肾小球基底膜节段性增厚，毛细血管腔部分狭窄，多数毛细血管腔开放；肾舒康组较雷公藤多甙组基底膜增生稍轻。电镜观察：模型组肾小球毛细血管基底膜增厚明显，薄厚不均，肾小球基底膜上皮下大量电子致密物沉积，上皮细胞足突肿胀，排列紊乱，足突广泛融合。两治疗组肾小球毛细血管基底膜轻中度增厚，呈丘状，部分上皮细胞足突肿胀、融合。肾舒康组与雷公藤多甙组相比，基底膜增厚、足突融合程度稍轻。免疫荧光观察：模型组IgG沿肾小球毛细血管壁呈细颗粒状、高强度沉积(++++)，肾舒康组与雷公藤组高倍镜下呈细颗粒状、中低强度(++～+++)沉积。 结论： 1 肾舒康可以减少AHN大鼠24h尿蛋白含量，提高白蛋白水平，降低尿素氮、血肌酐，保护肾功能。 2 肾舒康可以减低血液粘稠度，改善脂代谢。 3 肾舒康能减轻肾组织的病理损害。 4 本研究提示肾舒康对膜性肾病大鼠模型的干预作用与雷公藤基本相同，推测两者可能有相同的作用机理。