杜鹃兰丛生芽的诱导研究

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本研究以杜鹃兰原球茎为试验材料,探究了其丛生芽发生的诱导途径及其影响因素,在成功建立杜鹃兰丛生芽诱导方法的基础上,对其丛生芽发生过程中生理生化动态变化进行了探索。主要研究结果如下:1、以杜鹃兰种子无菌萌发的原球茎为外植体材料,探究了不同基础培养基、植物生长调节剂以及抗褐化剂的种类及其浓度等因素对杜鹃兰丛生芽诱导的影响。结果表明:1/4 MS培养基为适宜丛生芽发生的基本培养基,诱导率可达45.37%;植物生长调节剂噻苯隆(TDZ)浓度为2.0 mg·L-1、吲哚乙酸(IAA)浓度为0.2 mg·L-1时,丛生芽诱导率较高,分别为72.58%和55.63%;抗褐化剂为聚乙烯吡咯烷酮(PVP),浓度为2000 mg·L-1时,丛生芽诱导率较高,为79.90%。杜鹃兰丛生芽诱导适宜条件为:1/4 MS+TDZ 2.0mg·L-1+IAA 0.1 mg·L-1+PVP 2000 mg·L-1,诱导率可达81.16%。2、杜鹃兰丛生芽发生过程中可溶性糖和可溶性蛋白含量呈规律性变化,各处理下可溶性糖含量呈先下降再上升的趋势,在丛生芽诱导启动到诱导初期可溶性糖含量降低,在诱导中期到诱导后期可溶性糖含量显著增加并维持较高水平。丛生芽发生过程中可溶性蛋白含量整体呈“M”型,在丛生芽诱导启动到诱导初期可溶性蛋白含量增加,在诱导初期到中期可溶性蛋白含量下降,诱导后期显著上升并达到峰值。可溶性糖含量与可溶性蛋白含量主要成负相关,可溶性蛋白含量与碳氮比呈显著负相关,且诱导率较高处理相关系数较其他处理低,碳氮比的变化主要呈先下降后上升的趋势。综上所述,杜鹃兰丛生芽发生受可溶性糖和可溶性蛋白含量变化的综合调控。3、对杜鹃兰丛生芽发生过程中内源激素(脱落酸ABA、玉米素ZT、3-吲哚乙酸IAA、赤霉素GA3)变化进行测定,并对丛生芽发生过程中内源激素比值变化进行分析,结果表明:不同内源激素在丛生芽发生过程中含量变化不同;在丛生芽诱导启动至诱导中期,IAA、GA3、ZT含量增加,ABA含量降低;诱导中期ABA、IAA含量增加,GA3、ZT含量下降;诱导后期IAA含量下降,ABA、GA3、ZT含量增加。在丛生芽发生过程中,ABA/GA3比值在诱导启动至中期呈下降趋势,诱导中期至后期上升;ZT/IAA比值在诱导启动至中期呈下降趋势,在中期至后期上升。
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