[目 的]皮肤是人体的第一道防线,也是人体最大的器官,承载各种重要功能。皮肤创伤愈合障碍,如慢性非愈合性皮肤溃疡、严重烧伤创面和肥厚性瘢痕愈合,给患者和社会造成严重生理、心理和经济负担。目前临床对皮肤创伤的治疗仍然缺乏有效方法,存在相当大的挑战,因此迫切需要开发新的干预措施来促进修复。两栖类动物来源的活性多肽因其高选择性和特异性,具有开发为治疗创伤愈合优秀候选药物先导分子的巨大潜能。鉴于此,本研究将促愈合肽RL-QN15负载到纳米颗粒上或与生物聚合材料结合,以此形成活性肽/纳米颗粒和海藻酸钠制备的水凝胶并探索其潜在的生物学功能和组织再生的能力。[方 法]此研究中,活性肽RL-QN15被负载到介孔聚多巴胺纳米颗粒（MPDA）和中空二氧化硅纳米颗粒（HSN）中,从而形成HSN@RL-QN15和MPDA+RL-QN15 纳米复合物,并用扫描电镜（Scanning electron microscopy,SEM）、透射电镜（Transmission electron microscopy,TEM）、傅里叶变换红外光谱（Fourier transform infrared spectroscopy,FTIR）和 X 光电子能谱（X-ray photoelectron spectroscopy,XPS）对其进行表征。在第一部分,我们直接通过小鼠全皮层创伤、烫伤和猪全皮层创伤模型评估MPDA+RL-QN15的促愈合能力。在第二部分,HSN@RL-QN15纳米复合材料被加入海藻酸钠溶液中,在锌离子交联下形成复合水凝胶（HSN@RL-QN15/ZA）。用FTIR和SEM分析复合水凝胶的化学成分和微观结构。接下来,通过检测水凝胶的血液相容性、粘附性、生物相容性和溶胀率对其生物学特性进行了探索。另外,我们还评估了水凝胶的止血性能、体内外毒性和抗菌性。用体外细胞划痕实验检测水凝胶的促细胞迁移活性。最后,构建小鼠全皮层缺损和生物膜感染模型以评估复合水凝胶的促皮肤组织再生能力。[结 果]（1）SEM、TEM、FTIR和XPS结果显示活性肽RL-QN15被成功负载到HSN和MPDA上,负载率分别为53.27%、67.31%。（2）经MPDA负载,RL-QN15促全皮层损伤（猪和小鼠）及烫伤（小鼠）的愈合能力显著增加。（3）制备的HSN@RL-QN15/ZA复合水凝胶呈现三维网状结构,孔径大小均一,且可见HSN@RL-QN15纳米复合物镶嵌。（4）水凝胶具有良好的血液相容性:将小鼠红细胞与水凝胶孵育1h后未检测到血红蛋白;止血性:将水凝胶涂抹在小鼠尾部的出血位置,可促进止血。（5）水凝胶有良好的溶胀率:水凝胶有很强吸水能力,将其浸泡在PBS中5 h,其溶胀率高达1400%。（6）水凝胶缓释RL-QN15:水凝胶承载HSN@RL-QN15并支持RL-QN15的缓慢释放,前12 h释放率小于50%,48 h时释放率高达72.48%。（7）水凝胶有广谱抗菌活性:水凝胶能够抑制革兰氏阳性菌（S.aureus）、革兰氏阴性菌（E.coli）、真菌（C.albicans）和多重耐药菌（MRSA）的生长。（8）水凝胶促进皮肤细胞增殖:水凝胶在低浓度（5～500 μg/mL）促进HaCaT及HSF细胞增殖并呈浓度依赖性。（9）水凝胶在体外促细胞划痕愈合:与对照组相比RL-QN15能显著促进HaCaT细胞划痕的愈合,且经HSN和海藻酸锌（ZA）负载后,其细胞划痕愈合活性增强。（10）水凝胶通过模拟细胞外基质和缓慢释放促愈合肽RL-QN15而加速小鼠全皮层伤口的愈合;在组织水平上它能加速创区再上皮化进程和肉芽组织形成,并增加创面胶原含量,对伤口瘢痕的增生有一定改善作用;在分子水平上,免疫组织荧光显示水凝胶下调炎症因子TNF-α和IL-6的表达。（11）在MRSA感染模型中,水凝胶首先通过抗菌活性杀死创面微生物,再释放活性肽RL-QN15以加速感染创面的愈合,组织学结果表明水凝胶能增加胶原的沉积,并促进血管和毛囊的形成。[结 论]本研究成功制备了纳米复合物和水凝胶。其中纳米复合物能提高RL-QN15对不同创面促愈合活性;水凝胶具有多种生物学功能,能在体内和体外促进伤口的愈合。重要的是,复合水凝胶显示出广谱抗菌活性,并促进MRSA感染伤口的愈合。我们的结果强烈支持基于活性肽的纳米复合物或水凝胶是组织再生领域一种有潜力的伤口敷料,可为新型促组织再生干预措施的开发提供新的参考和选择。