根癌农杆菌GV3103介导的马铃薯遗传转化体系的建立及FtsZ1基因表达研究

来源 :甘肃农业大学 | 被引量 : 3次 | 上传用户:tm7749
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马铃薯(Solanum tuberosum L.)是世界上广泛种植的作物。马铃薯淀粉在工业领域应用越来越广泛,通过在植物体内调控淀粉合成酶或表达异源酶来改变淀粉的成分和结构,制造具有新的理化特性的淀粉能够带来具有巨大的经济和环境效益。高等植物中的FtsZ1基因控制叶绿体的分裂,造粉体与叶绿体都来源于前质体,所以,FtsZ1基因也能调控造粉体的分裂,通过转基因技术抑制FtsZ1基因表达,控制造粉体的分裂从而影响淀粉特性成为可能。在转基因技术应用中构建完整的再生体系和高效的转化体系,获得转基因植株成为利用转基因技术研究FtsZ1基因表达影响淀粉特性的前提。本研究以四个遗传背景不同的马铃薯栽培种为材料,对四个品种的马铃薯再生体系进行研究,并对再生体系进行筛选和优化,以期建立相应的再生体系。并通过农杆菌菌株GV3103介导反义FtsZ1基因导入不同马铃薯品种,对农杆菌GV3103用于马铃薯转化的可行性进行分析,以及获得相应的高效转化体系,同时对获得转FtsZ1基因植株进行基因表达研究。取得以下研究结果:(1)品种“Favorita”和“Atlantic”适合采用以茎段为外植体的愈伤再生体系。(2)品种“甘农薯2号”、“Shepody”和“Atlantic”适合采用试管薯薄片为受体的直接分化再生体系。(3)抗生素是Cef适合用于农杆菌菌株GV3103介导马铃薯遗传转化,最佳抑菌浓度为200mg/L。(4)农杆菌菌株GV3103介导的遗传转化体系中,“甘农薯2号”和“Shepody”适合采用试管薯薄片为受体材料的转化体系;“Favorita”适合采用茎段为受体的转化体系; Atlanticμ两种转化体系都不适合。(5)获得含转反义FtsZ1基因马铃薯植株94株。其中“甘农薯2号”38株,“Shepody”27株,“Favorita”20株,“Atlantic”9株。(6)反义FtsZ1基因在马铃薯植株表达并抑制叶绿体的分裂。
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