中药商陆具有利水消肿，解毒散结的传统功效，在临床上多用于肾性、心源性和肝硬化腹水的治疗，但利尿的活性部位或成分却不明确。本课题采用天然药物化学和药理学结合的方法，拟探明商陆的利尿活性部位或成分，主要研究内容有：药材品种的生药鉴定；不同溶媒提取部位的制各；利尿药理实验筛选；药材及与利尿有关活性部位的HPLC图谱表征；商陆生物碱成分的提取分离；垂序商陆脂溶性成分的GC-MS分析。研究结果：初步筛选得到商陆利尿的活性部位为商陆粗生物碱与商陆粗皂苷的混合物；建立了商陆及与利尿相关活性部位的HPLC图谱；从商陆中分离得到两种生物碱单体成分；鉴定了8种脂溶性成分。 药材来源鉴定：中药商陆是指商陆科植物商陆(Phytolacca acinosa Roxb.)和垂序商陆(Phytolacca americana L.)两个品种来源的干燥根，据文献报道商陆与垂序商陆在化学成分、药理作用、毒性等方面均有很大的差异。因此，本文通过对药材性状鉴定，横切面及粉末的显微鉴定、特异性的理化鉴定反应和薄层色谱层析行为研究，实验结果与文献报道的垂序商陆性质一致，鉴定反应呈阳性，薄层层析与正品药材相应位置呈相同颜色斑点，证明本课题所用药材为商陆科植物垂序商陆的干燥根。 商陆利尿活性的药理筛选：首先，设立了大鼠公斤给药剂量为人公斤体重剂量的10倍、20倍及40倍三个剂量组，根据大鼠代谢笼利尿实 山西医科大学2003届硕士毕业论文验结果，并与空白对照组(生理盐水)、阳性对照组(氢氯唆嗦)比较，表明20倍量是商陆利尿的有效剂量;其次，将药材依次用COZ超临界流体萃取、正丁醇和水提取，得到COZ超临界提取物(1一C仇一2)、正丁醇提取物(1一正一3)、水提物(1一水一4)，同时取药材粉末经炽灼残渣得到灰分成分(1一灰一5)共四个样品组，根据大鼠代谢笼利尿实验结果，并与空白对照组(生理盐水)、阳性对照组(氢氯唾嗦)比较，表明正丁醇部位(1一正一3)是商陆利尿的活性部位，灰分(1一灰一5)具有一定利尿作用，但并不显著;再次，将剩余的正丁醇部位(1一正一3)再等分为三部分(2一正一1、2一正一2、2一正一3)，其中2一正一2部位依次用乙醚、乙酸乙醋超声振荡提取得到乙醚提取物(3一乙一1)、乙酸乙酷(3一乙酸一2)、残渣(3一正一3)三个样品组，根据大鼠代谢笼利尿实验结果，并与空白对照组(生理盐水)、阳性对照组(氢氯唾嗦)比较，表明残渣部位(3一正一3)有弱的利尿作用，其他两部位无利尿作用;最后，将2一正一3部位先做化学成分的理化鉴别反应，发现生物碱和皂昔为正丁醇部位含有的两类主要成分，因此，将此部位分离为商陆粗生物碱(4一甲一1)和商陆粗皂昔(4一皂一2)两个部分，同时将商陆粗生物碱和粗皂昔按(1:1)混合作为混合部位(4一混合一3)共三个样品组，根据大鼠代谢笼利尿实验结果，并与空白对照组(生理盐水)、阳性对照组(氢氯唾嗦)比较，表明混合部位为商陆利尿的有效部位。 药材及与利尿有关活性部位的HPLC图谱:本文采用反相高效液相色谱法(即一HPLC)和溶剂梯度洗脱(乙睛与水)建立了垂序商陆药材及与利尿相关部位的HPLC图谱，在此色谱条件下，各种成分得到有效的分离，峰形稳定，分离度好，为中药商陆的质量控制奠定了基础。 商陆生物碱成分的分离:根据生物碱成分性质，采用离子交换树脂、甲醇索氏回流提取、氯仿萃取及雷氏盐沉淀得到脂溶性粗碱和水溶性粗碱;采用氨水浸润、苯温浸得到脂溶性粗碱;再分别对粗碱反复进行氧 4化铝柱层析，制备性薄层层析分离，得到两个成分，它们均对三种生物碱沉淀试剂呈阳性反应，其中每种成分分别用三种溶剂展开系统展开，均为单一斑点，表明从生物碱中分离得到两种生物碱单体。 GC－MS联用技术分析比较垂序商陆根不同提取物的脂溶性化学成分：本文首次利用气质联用（GC－MS）技术分析比较了垂序商陆根石油醚提取、石油醚革取、乙醚提取及CO。超临界军取得到的脂溶性成分，结果鉴定了8种相对百分含量大于0．5％的化学成分，其中3种成分，2一甲氧基一4丙烯基苯酚、带状网翼自醇、邻苯M甲酸M丁酯，与商陆根中的3中脂溶性成分相同；乙醚提取物与CO；超临界革取物含有的主要化学成分种类相同，但含量不同；石油醚提取物含有的化学成分种类较少，石油醚革取物所含成分种类相对较多，且两者间有较大差异。 本文首次系统筛选得到商陆利尿的活性成分，并阐明商陆粗生物碱与粗皂昔的混合物是商陆利尿的活性部位，揭示了商陆利尿的物质基础，为进一步研究利尿机理及从中药中开发一种新型利水药物提供基础研究方法：根据药理学结果，首次系统研究与利尿有关的商陆生物碱成分，并从中分离得到两个生物碱单体成分，进行了初步的理化鉴定；并首次采用GC－MS联用技术对垂序商陆的脂溶性成分进行系统研究，同时鉴定了其中的8种成分，对垂序商陆的药理和临床研究有一定的参考价值。