目的:探讨表达CHRM5的上皮细胞在角膜新生血管形成过程中的作用。方法:利用碱烧伤、上皮大范围刮除、缝线三种方法建立损伤性的小鼠角膜新生血管和Corn1小鼠自发性的角膜新生血管模型,经裂隙灯及体视荧光显微镜检查眼表情况后,取角膜组织进行RNA和蛋白的提取、冰冻和石蜡及透射电镜切片样本的制备,以qRT-PCR、蛋白质免疫印迹、免疫荧光或组化染色等方法检测CHRM5、ADRA1A、KRT12、KRT14、GSTA4、HMGN1、HK2、IL-1β、FGF2、VEGFA、CPT1A的表达变化,透射电镜检测角膜上皮超微结构的改变,并通过多种转基因小鼠模型验证角膜上皮的表型变化及其与新生血管的关系,18F-FDG PET检测角膜葡萄糖摄取量的变化。结果:损伤和Corn1的小鼠角膜CHRM5mRNA和蛋白的表达均显著减少。免疫荧光显示CHRM5主要表达在角膜上皮和内皮细胞中,损伤和Cornl小鼠的角膜上皮CHRM5阳性细胞显著减少,而ADRA1A阳性细胞增多。上皮CHRM5阳性细胞的减少导致角膜上皮细胞表型的改变,表现为表达KRT12的细胞减少,而表达KRT14的细胞增加。Krt12Cre-Tomatof fGFP和Krt14Cre-Tomatof fGFP小鼠的角膜上皮大范围刮除,直观显示了角膜新生血管的形成伴随着KRT12上皮细胞的消失和KRT14上皮细胞的修复,Krt12Cre-TomotoffGFP-Corn1小鼠也证明角膜新生血管的形成是由于KRT12上皮细胞的显著减少。上皮细胞发生表型改变的损伤和Corn1小鼠角膜,新生血管的形成并不伴有IL-1 β、FGF2和VEGFA表达的相应增加,而是显示出上皮细胞的不成熟,对葡萄糖的利用增加,表现为GSTA4、HMGN1的表达减少,HK2的表达及18F-FDG的摄取增加,CPT1A的表达下降及透射电镜中角膜上皮存在大量可能为不饱和脂肪酸的高电子致密物。结论:角膜上皮CHRM5阳性细胞的减少导致角膜上皮细胞发生不成熟的表型改变和代谢变化,因而引起角膜新生血管的形成。角膜上皮细胞代谢的变化可能会成为角膜新生血管治疗的新靶点。