王草不同时间刈割青贮发酵品质研究

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本论文主要研究了不同生长天数不同时间点收获王草青贮发酵品质,在此基础上,从新鲜王草和王草青贮饲料中筛选出优良乳酸菌菌株,并进一步探究乳酸菌菌株对王草青贮发酵的影响,为热带地区牧草的青贮提供理论依据。主要研究内容包括三个试验。试验1.不同生长天数不同时间点刈割王草青贮发酵品质和微生物组成王草生长90、110和130天后,分别于当天的8:00、12:00和18:00收获,青贮1、3、7、14、30和60天后测定发酵品质。试验结果表明:在8:00,12:00和18:00三个刈割时间点中,生长130天王草的粗蛋白(CP)含量显著低于生长90天组(P<0.05),DM含量显著高于另外两组(P<0.05),110天组王草酵母菌,霉菌和肠杆菌的数量低于90和130天组的数量。生长110天的王草在青贮过程中pH下降较快,乳酸含量较高。青贮60天后110天组的pH值最低,CP降解较少,NH3-N含量最低,三组王草青贮的BA含量较高。随生长天数延长王草青贮饲料的微生物Alpha多样性呈下降趋势。生长110天王草青贮后属水平上的乳酸菌相对丰度高于另外两组。三个生长天数的王草的青贮饲料细菌的优势菌门为变形菌门(Proteobacteria)。三个刈割时间点中,110天组青贮饲料细菌的优势菌属为乳杆菌(Lactobacillus)和乳球菌(Lactococcus),梭菌(Clostridium)相对丰度较低,生长90和130天的王草于12:00和18:00收获后青贮饲料细菌的优势菌属为Lactobacillus和Clostridium。生长110天王草的青贮发酵品质优于90和130天王草。试验2.新鲜王草和王草青贮饲料中优良乳酸菌的筛选从王草鲜样和王草青贮饲料中分离筛选生长能力强且产酸效率高的乳酸菌菌株,并通过16S rRNA鉴定确定所筛选的乳酸菌菌属。结果显示:王草鲜草和青贮样中总共得到4株乳酸菌菌株。其中,2株为戊糖片球菌,粪肠球菌和乳酸片球菌各1株。2株戊糖片球菌的能够在pH3.5~8.0范围内生长,粪肠球菌能够在50℃的条件下生长,粪肠球菌和乳酸片球菌的pH耐受范围为4.0~8.0,乳酸片球菌在45℃下的产酸性能和生长能力较弱。试验3.添加乳酸菌对王草青贮品质和微生物群落的影响在王草青贮中接种植物乳杆菌、戊糖片球菌、粪肠球菌、植物乳杆菌+粪肠球菌、植物乳杆菌+戊糖片球菌、布氏乳杆菌,青贮1、3、7、14、30、60天后开袋测定王草青贮发酵品质。试验结果表明:王草含水量较高,在青贮过程中容易出现BA发酵。青贮后王草的优势菌门从Proteobacteria和蓝菌门(Cyanobacteria)转变为厚壁菌门(Firmicutes)。布氏乳杆菌(Lactobacillus buchneri)能够增加王草青贮饲料的乙酸含量,同时对酵母菌的抑制效果显著,所有乳酸菌处理组均能加速抑制青贮饲料中霉菌的活性。植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、粪肠球菌(Enterococcus faecalis)、戊糖片球菌(Pediococcus pentosaceus)、和Lactobacillus buchneri对青贮饲料中Lactobacillus plantarum的生长有协同作用。
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