谷氨酰胺诱导Hsp70上调表达对急性热应激鹅肠黏膜机械屏障的保护作用

来源 :吉林农业大学 | 被引量 : 4次 | 上传用户:ernie_dun
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本文研究了热应激状态下谷氨酰胺(Glutamine,Gln)诱导热休克蛋白70(Heat shock protein70,Hsp70)上调表达对吉林白鹅肠道组织形态结构、空肠黏膜组织中Occludin、Claudin-1、ZO-1蛋白及其mRNA相对表达量、血液中二胺氧化酶(DAO)、D-乳酸(DLA)、皮质酮(CORT)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、甲状腺素(T4)、三碘甲状腺原氨酸(T3)活性的影响,旨在探究Gln诱导Hsp70上调表达对热应激鹅肠道机械屏障的保护作用,为研究高效绿色的畜禽抗应激饲料提供理论基础与试验依据。试验一、Gln诱导鹅肠道Hsp70上调表达模型的建立试验选用1日龄吉林白鹅60只,随机分为6个组,每组10个重复,每个重复1只鹅。试验第69天试验鹅每kg体重分别腹腔注射Gln 0g、0.35 g、0.55 g、0.75 g、0.95 g和1.15 g,24h后进行屠宰。载玻片刮取空肠黏膜进行HSP70蛋白及mRNA相对表达量的分析测定。结果表明:Gln可诱导Hsp70产生高表达,且Hsp70表达随着Gln的浓度增加呈升高趋势(P<0.01)。综合文献与研究结果,选择0.75g/kg作为后续试验Hsp70上调表达模型剂量浓度。试验二、Gln诱导Hsp70上调表达对热应激吉林白鹅机械屏障的保护作用试验选取1日龄吉林白鹅180只,随机分为CON组,HS组,GLN组,每组6个重复,每个重复10只鹅。试验第69天CON组和HS组腹腔注射生理盐水,GLN组腹腔注射Gln(0.75g/kg)。24h后,HS组与GLN组进行4h急性热应激处理(41±1℃,相对湿度60%),结束后进行直肠温度测定与屠宰。取动脉血测定DAO、DLA、LDH、CORT、CK、T3、T4的活性水平测定;取回肠、空肠、十二指肠进行肠道形态结构光镜观察,另取空肠组织进行透射电镜超微结构观察;用载玻片刮取空肠黏膜组织测定Hsp70、Claudin-1、Occludin、ZO-1蛋白及mRNA相对表达量。结果表明:热应激状态下Hsp70上调表达对鹅血液指标具有显著影响,使血液中T3活性显著增强(P<0.01),CK(P<0.01)、LDH(P<0.01)、T4(P<0.01)、CORT(P<0.01)活性显著降低,其中CK、LDH恢复至对照组水平;Hsp70上调表达可显著提高热应激鹅肠黏膜Claudin-1(P<0.01)、Occludin(P<0.01)、ZO-1(P<0.01)蛋白及mRNA的表达水平,其中对Claudin-1的作用效果最为明显,其次为ZO-1。试验证实Gln诱导Hsp70的上调表达可显著性缓解热应激对鹅造成的肠道通透性升高问题,维持肠道机械屏障完整性,进而保护肠黏膜屏障系统结构和功能。
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