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目的:研究丹冰花精油鼻腔给药对线栓法致大鼠脑缺血再灌注模型、结扎双侧颈总动脉法致大鼠反复脑缺血再灌注模型的影响;检测丹冰花精油的成分、Cy7-丹冰花精油溶液鼻腔给药后的入脑情况。方法:实验一:采用气相色谱-质谱联用法,检测丹参精油、人参精油成分,以乙酸乙酯处理样品后过滤,以EI离子源温度230℃,传输线温度250℃,电子轰击能量EI 70 ev,轰击电压1.0 kv;扫描范围33～550 amu,溶剂延迟时间3 min的条件进样。通过NIST2.2标准质谱数据库进行谱库检索,解析数据,结合文献报道,分别对丹参精油、人参精油化学成分进行鉴定。实验二:采用小动物活体成像分析法和共聚焦显微镜法观察Cy7-丹冰花精油鼻腔给药大鼠后荧光剂Cy7的入脑情况。取大鼠,将Cy7-丹冰花精油鼻腔给予大鼠,结束后立即麻醉,采用小动物活体成像法分别观察给药前、给药后3 min、5 min、10 min、20 min、30 min、45 min、60 min、90 min、120 min时的扫描结果。取大鼠,将Cy7-丹冰花精油鼻腔给予大鼠,结束后立即麻醉,将空白大鼠、给药后3 min、5 min、10 min、20 min、30 min、45 min、60 min、90 min、120 min大鼠,立即完整分离大鼠大脑,冷冻切片,采用激光共聚焦显微镜观察Cy7-丹冰花精油鼻腔给药不同时间脑组织中荧光显象情况。实验三:丹冰花精油对线栓法致大鼠脑缺血再灌注模型的影响,将动物随机分组,除假手术组、模型组外,其余各组均给药,每天给药1次,连续给药7 d。给药第6天,除假手术组外,其他各组均造模。采用激光多普勒仪器测造模前后大鼠脑部血流量;造模2 h后,进行LONGA评分;于末次给药4 h,称大脑全脑组织湿重和干重,计算脑组织含水量,观察各组大鼠脑水肿变化;红四氮唑染色法观察大鼠左侧大脑组织的梗死灶;左侧大脑组织匀浆检测上清指标;HE染色观察脑组织形态变化;免疫组化法测定大鼠脑中p38MAPK的表达。实验四:丹冰花精油对大鼠反复脑缺血再灌注损伤的影响,将大鼠随机分组,除假手术组、模型组外,其余各组均给药,每天给药1次,连续给药10 d。于给药第3天,除假手术组外,其他各组均采用结扎双侧颈总动脉法致大鼠反复脑缺血再灌注模型。采用激光多普勒仪器检测造模前后大鼠脑部血流量;于给药第6天,各组大鼠进行Y迷宫学习训练,给药第7天测试Y迷宫记忆,观察大鼠学习记忆功能;于最后一次给药4 h后,腹主动脉取血,以兽用血液细胞分析仪检测各组大鼠全血的细胞因子含量;解剖分离出大鼠完整脑组织,每组取10只大鼠大脑左半脑组织固定于福尔马林溶液中,做HE染色,观察组织形态;每组取12只大鼠大脑右半脑组织,制备脑组织匀浆,离心,取上清液备用。结果:实验一:GC-MS方法分析丹参精油成分和人参精油成分,丹参精油成分63个,人参精油成分59个。按照化学结构分类,其挥发性成分主要为萜类化合物、芳香族化合物、脂肪族化合物和含硫、含氮化合物。实验二:以小动物活体成像法观察,结果显示:大鼠鼻腔给Cy7-丹冰花精油3 min-120min内,大鼠脑部荧光强度增强,提示Cy7可经鼻腔进入脑部;以共聚焦显微镜法观察,大鼠鼻腔给Cy7-丹冰花精油3 min-120 min内,随着时间延长,大鼠大脑组织切片荧光强度变大,提示以荧光剂为示踪的Cy7-丹冰花精油鼻腔给药后可入脑组织显示荧光,且随着时间的增长,荧光强度变大。实验三:与假手术组比,模型组大鼠体重先增高再降低;MCAO大鼠死亡率显著升高;LONGA神经功能评分升高;MCAO模型插栓前后大鼠脑部血流显著降低;大鼠脑组织梗死面积显著增大;脑组织含水量显著升高;脑组织匀浆IL-10、T-AOC、Bcl-2、CAT、SOD活力、GSH-Px水平显著降低,Caspase-3、MDA、IL-23、TNF-α、Bax、ICAM-1、ASP、IL-1β、NOS、GLU、IL-6水平显著升高;大鼠皮质和海马组织出现显著病理变化,大鼠脑组织p38MAPK水平显著升高。与模型组比,丹冰花大、小剂量组均可降低MCAO模型的LONGA神经功能评分;降低大脑组织梗死面积;降低大鼠脑组织含水量;降低大鼠大脑组织IL-23、ICAM-1、IL-1β、IL-6、TNF-α、GLU、NOS、ASP、MDA、Caspase-3、Bax水平;升高大鼠脑组织匀浆IL-10、T-AOC、CAT、SOD、GSH-Px、Bcl-2水平;改善大鼠脑皮质组织、海马组织的病理变化;抑制大鼠大脑组织中p38MAPK的表达。实验四:与假手术组比,模型组大鼠体重略有降低,反复缺血再灌注模型大鼠在缺血时r CBF值显著降低,再灌注时r CBF值升高;Y迷宫连续学习次数显著升高,记忆测试时大鼠记忆正确次数显著降低;模型大鼠血液中白细胞数目、淋巴细胞数目显著升高,红细胞数目升高;模型大鼠脑组织匀浆TNF-α、ICAM-1、Bax、IL-6、IL-1β、NO、LD、NOS、MDA水平显著升高,LDH、ACHE、Bcl-2、ATP、SOD水平显著降低;模型大鼠脑组织出现显著病理变化。与模型组比,丹冰花大、小剂量组均可显著升高r CBF值;显著降低学习次数,显著升高连续测试的记忆正确次数;显著降低大鼠血液白细胞数目和淋巴细胞数目;降低大鼠脑组织匀浆TNF-α、ICAM-1、NO、IL-6、MDA、IL-1β、NOS、LD、Bax水平,升高大鼠脑组织匀浆LDH、ACHE、ATP、SOD、Bcl-2水平;显著改善大鼠脑组织病理变化。结论:丹冰花精油具有多种挥发性成分,以荧光剂为示踪的Cy7-丹冰花精油溶液可通过鼻腔进入脑部,对大鼠脑缺血再灌注模型和反复脑缺血再灌注模型具有显著的改善作用。