研究背景血管性痴呆（Vascular Dementia,VD）是继阿尔茨海默病之后痴呆的第二大常见亚型,也是目前唯一可以防治的痴呆性疾病,但是目前并没有药物被FDA批准并应用于临床治疗,因此控制危险因素在VD的防治中占有重要作用。脂质中高密度脂蛋白胆固醇过低、低密度脂蛋白胆固醇过高是导致动脉粥样硬化的已知危险因素,可能导致大脑低灌注从而继发认知障碍或脑栓塞。既往文献表明,ApoE基因是影响血脂调控的重要因素,血脂控制不佳的患者,较大程度存在携带有ApoE4等位基因。《Nature Medicine》上的一篇研究表明:ApoE4易感基因是一个主要遗传风险因素,它的出现甚至于会将认知障碍的发生概率提高12倍,但是他们研发出一种小分子结构矫正剂,使ApoE4在结构和功能上与ApoE3相似的小分子结构校正剂得到改善。现有的研究表明虽然ApoE基因型不会发生改变,但是ApoE4型基因所产生的不良影响可以得到一定程度的缓解。血脂调控中应用最多的药物为他汀类药物,现有的多项研究证实,长期应用他汀类药物可预防和治疗VD,可降低VD的发生风险、延缓病情进展以及改善相关生物学指标。导师既往研究结果提示对气虚血瘀型VD患者应用阿托伐他汀可能导致药效下降,有升高血脂的风险。因此,ApoE基因型和气虚血瘀型证候是影响VD患者血脂调控效果的两个重要因素。基于上述背景,本研究提出了三个假说:不同ApoE基因型-血脂调控效果-气虚血瘀证候三者之间是否存在联系相互影响?气虚血瘀型血管性痴呆患者对证治疗后,是否能够促进机体的证候发生变化,达到阴平阳秘状态,从而改善临床应用他汀的疗效,达到对血脂的有效控制;以及是否能减轻不同ApoE分型在VD患者治疗中对血脂调控的不良影响?研究目的初步探索气虚血瘀型VD患者对证治疗后“ApoE基因型-血脂调控效果-气虚血瘀证候”三者之间是否存在相互影响,并基于非靶向代谢组学对相关机制进行初步探讨,为血管性痴呆的临床诊疗提供理论基础及研究思路。研究内容1效-证研究（血脂调控效果-气虚血瘀证候）:评价气虚血瘀型VD患者对证治疗前后认知功能变化、证候变化、血脂变化。2ApoE-效研究（ApoE基因型-血脂调控效果）:评价不同ApoE分型的气虚血瘀证VD患者对证治疗前后认知功能变化、血脂变化。3 ApoE-证研究（ApoE基因型-气虚血瘀证候）:评价不同ApoE分型的气虚血瘀型VD患者对证治疗前后的证候变化。4基于非靶向代谢组学技术分析气虚血瘀型血管性痴呆患者对证治疗前后体内的代谢通路变化。研究方法本研究为自身前后对照研究,入组患者皆为气虚血瘀型血管性痴呆患者,予基础治疗+对证治疗（塞络通胶囊）,研究周期共12周。采用简易精神状态检查量表（MMSE）评价患者治疗前后认知功能情况;采用治疗前后的总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、甘油三酯（TG）四项指标的变化及降脂率作为血脂调控效果的评判;证候变化参考《中药新药临床研究一般原则》（2015年）并结合疾病特点,对乏力、精神萎靡、肢体麻木/疼痛、头晕这4项症状的疗效进行评价,比较症状消失率;对入组患者进行ApoE基因型检测,分析不同ApoE分型患者治疗前后的证候变化、认知功能变化、血脂变化;对入组患者治疗前、治疗后、健康人之间进行非靶向代谢组学的比较分析。安全性指标为实验室检查（包括血常规、肝肾功能、肌酸激酶、肌红蛋白）及不良事件发生情况。研究结果1.一般情况共纳入33名气虚血瘀型血管性痴呆患者,脱落5例,最终纳入28例,其中男性21例,女性7例,平均年龄65.96±8.56岁。2.气虚血瘀型VD患者治疗前后认知功能变化、证候变化、血脂变化认知功能变化:气虚血瘀型VD患者对证治疗前后的MMSE评分差异具有显著意义（P＜0.01）。证候变化:气虚血瘀型VD患者对证治疗前后主要症状消失率分别为乏力（71.4%）、精神萎靡症状（64.3%）、肢体麻木/疼痛症状（60.7%）、头晕症状（57.1%）。血脂变化:气虚血瘀型VD患者对证治疗前后的TC、HDL-C、TG的指标变化具有统计学差异,其中 TC（P＜0.01）、HDL-C（P＜0.05）、TG（P＜0.01）。3.不同ApoE分型患者治疗前后认知功能变化、血脂变化、证候变化ApoE分型情况:ApoE2型患者2例（7%）、ApoE3型患者21例（75%）、ApoE4型患者5例（18%）,由于E2型患者人数太少,故仅对ApoE3、ApoE4型患者进行统计分析及差异比较。认知功能:ApoE3型患者与ApoE4型患者对证治疗前后MMSE评分差异无统计学意义（P＞0.05）。证候变化:ApoE3型患者治疗前后主要症状消失率分别为乏力（71.4%）、精神萎靡症状（52.3%）、肢体麻木/疼痛症状（57.1%）、头晕症状（52.3%）;ApoE4型患者治疗前后主要症状消失率分别为乏力（80%）、精神萎靡症状（80%）、肢体麻木/疼痛症状（60%）、头晕症状（80%）。血脂变化:治疗前,ApoE3型与ApoE4型两组患者的LDL-C和TC指标存在组间显著性差异（P＜0.05）,且ApoE4型患者TG、LDL-C指标的血脂水平要高于ApoE3组;治疗后,ApoE3型与ApoE4型两组患者的TC、TG、LDL-C、HDL-C指标变化无组间显著性差异（P＞0.05）;在降脂率方面,ApoE3型与ApoE4型两组患者的TC、TG、LDL-C、HDL-C指标的降脂率无组间显著性差异（P＞0.05）,但ApoE4患者的LDL-C、TC、HDL-C指标的降脂幅度要高于ApoE3型患者。4.非靶向代谢组学结果非靶向代谢组学单变量分析结果表明:治疗前后气虚血瘀型VD患者的差异代谢物主要归属为Lipids and lipid-like molecules;治疗前与健康人之间的差异代谢物主要归属为 Lipids and lipid-like molecules、Organic acids and derivatives、Organic nitrogen compounds;治疗后与健康人之间的差异代谢物主要归属为Lipids and lipid-like molecules、Organic acids and derivatives。对筛选出的显著性差异代谢物进行KEGG数通路富集分析,结果表明:治疗前后的显著性差异代谢通路主要为:Protein digestion and absorption、Choline metabolism in cancer、ABC transporters;治疗前与健康人间的显著性差异代谢通路主要为:Basal cell carcinoma、mTOR signaling pathway、Bile secretion;治疗后与健康人间的显著性差异代谢通路主要为:Choline metabolism in cancer、Steroid hormone biosynthesis、ABC transporters;治疗前、治疗后、健康人三者间的显著性差异代谢通路主要为:ABC transporters、Central carbon metabolism in cancer、Protein digestion and absorption。结论1.气虚血瘀型VD患者临床治疗中“ApoE基因型-血脂调控效果-气虚血瘀证候”之间存在相互影响,对证治疗后能够改善气虚血瘀型VD患者的认知功能,能够通过对乏力、精神萎靡、肢体麻木/疼痛、头晕症状不同程度改善来调节证候,且安全性较好。2.ApoE4型气虚血瘀型VD患者在对证治疗前后可能存在异于他汀的有效降脂途径,可能通过升高HDL-C,降低TC、LDL-C达到调脂效果。3.初步探索发现对证治疗前后可能通过调控气虚血瘀型VD患者体内Basal cell carcinoma、mTOR signaling pathway、Bile secretion 代谢通路改善认知功能,影响血脂代谢,且可能通过影响ABC transporters代谢通路,使药物疗效得到更好的发挥。