【摘 要】
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第一部分 生物信息学分析RUNX2在甲状腺癌中的表达及其生物学功能目的:本研究旨在通过综合的生物信息学分析探讨RUNX2在甲状腺癌中的表达及其可能的生物学功能。方法:从癌症基因组图谱（The Cancer Genome Atlas,TCGA）数据库和GEO数据库下载甲状腺癌RUNX2基因表达数据库,分析RUNX2在甲状腺癌组织和癌旁组织中的表达差异;通过TCGA数据库分析RUNX2在甲状腺癌及其他
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第一部分 生物信息学分析RUNX2在甲状腺癌中的表达及其生物学功能目的:本研究旨在通过综合的生物信息学分析探讨RUNX2在甲状腺癌中的表达及其可能的生物学功能。方法:从癌症基因组图谱（The Cancer Genome Atlas,TCGA）数据库和GEO数据库下载甲状腺癌RUNX2基因表达数据库,分析RUNX2在甲状腺癌组织和癌旁组织中的表达差异;通过TCGA数据库分析RUNX2在甲状腺癌及其他癌组织中的遗传变异类型;利用HPA数据库分析RUNX2在各种不同类型的细胞中的表达变化情况;从TCGA数据库中筛选与RUNX2相关的基因,利用DAVID数据库进行KEGG和GO富集分析;利用UALCAN数据库分析甲状腺癌和癌旁组织中RUNX2甲基化水平,及其与临床特征的关联性;利用GEPIA数据库分析RUXN2表达与甲状腺癌患者预后的关联性。结果:生信分析发现RUNX2在甲状腺癌组织中的水平显著高于正常组织,其高表达与甲状腺癌患者淋巴结转移相关联（P＜0.05）;RUNX2 mRNA在小胶质细胞、早期精子、抑制性神经元、树突状细胞、浆细胞中特异性高表达;RUNX2mRNA在尿道细胞、胃粘膜细胞、前列腺基底腺细胞、早期精子、乳腺细胞、乳腺肌上皮细胞、晚期精子中特异性高表达;RUNX2 mRNA在NK细胞中特异性高表达;甲状腺癌组织中RUNX2启动子甲基化水平明显低于癌旁正常组织（P＜0.01）;RUNX2可能参与调控分子功能调节活动、细胞过程、新陈代谢过程、Cadherin信号通路、integrin信号通路、PDGF信号通路、突触小泡转运、Wnt信号通路等生物过程和信号通路。结论:RUNX2在甲状腺癌组织中高表达,且与甲状腺癌患者淋巴结转移相关。甲状腺癌中高表达RUNX2可能通过调控分子功能调节活动、细胞过程、Cadherin信号通路、integrin信号通路等,影响甲状腺癌的生长和转移。第二部分细胞生物学实验验证RUNX2基因在甲状腺癌侵袭及进展中的作用目的:本研究旨在通过检测甲状腺癌组织及癌旁正常组织中RUNX2基因和蛋白的表达,以及其下游与侵袭、转移相关的蛋白表达水平以及通过体外实验验证RUNX2在甲状腺侵袭发展中的作用及其机制。方法:采用实时定量PCR和免疫组化检测甲状腺癌组织及癌旁正常组织中RUNX2 mRNA和蛋白的表达水平,并分析RUNX2表达与患者临床特征的相关性。利用siRNA敲低甲状腺癌细胞系TPC-1中RUNX2的表达后通过MTT法检测细胞增殖能力变化,通过Traswell小室实验检测细胞迁移、侵袭能力,以及Western blot法检测蛋白表达情况。结果:与癌旁正常组织相比,甲状腺癌组织中RUNX2mRNA和蛋白的表达均显著升高（P＜0.01）,并且RUNX2表达与甲状腺癌患者淋巴结转移、肿瘤直径、临床分期密切相关（P＜0.05,P＜0.01）;甲状腺癌细胞RUNX2下调表达能够有效地抑制甲状腺癌细胞增殖、迁移和侵袭（P＜0.01）;RUNX2下调表达能显著抑制间质标志物Vimentin和N-cadherin蛋白的表达（P＜0.01）,明显促进上皮标志物E-cadherin蛋白的表达（P＜0.01）;RUNX2下调表达能明显地降低AKT的磷酸化表达（P＜0.01）。结论:RUNX2在甲状腺癌中高表达,且其高表达与甲状腺癌患者淋巴结转移、肿瘤直径、临床分期相关。RUNX2可能通过调控EMT和AKT通路来促进甲状腺癌细胞增殖、迁移和侵袭。
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