【摘 要】
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目的:通过探究在脉络膜新生血管（choroidal neovascularization,CNV）中髓样细胞触发受体-1（triggering receptor expressed on myeloid cells-1,TREM-1）的表达及其对CNV的作用和机制,为CNV发病机制的研究和诊断治疗方式的探索提供新思路。方法:1.建立激光诱导小鼠CNV模型,Western Blot检测激光诱导后1d
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目的:通过探究在脉络膜新生血管（choroidal neovascularization,CNV）中髓样细胞触发受体-1（triggering receptor expressed on myeloid cells-1,TREM-1）的表达及其对CNV的作用和机制,为CNV发病机制的研究和诊断治疗方式的探索提供新思路。方法:1.建立激光诱导小鼠CNV模型,Western Blot检测激光诱导后1d、3d、7d、14d和28d脉络膜视网膜组织TREM-1、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor alpha,TNF-α）和血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）的表达趋势,并与对照组比较。2.在激光诱导后7天,将小鼠按照处理方式分组:（1）正常对照组;（2）损伤对照组;（3）玻璃体腔注射（intravitreal injection,IVI）雷珠单抗（ranibizumab,RBZ）组;（4）腹腔注射（intraperitoneal injection,IPI）LP17（TREM-1抑制剂,LQVTDSGLYRCVIYHPP）组;（5）联合用药组,同时对小鼠行IVI RBZ和IPI LP17。3.免疫组织化学染色检测TREM-1的表达,Western Blot检测不同处理方式对TREM-1、VEGF和TNF-α的表达影响。4.荧光素眼底血管造影（fundus fluorescein angiography,FFA）、吲哚菁绿血管造影（indocyanine green angiography,ICGA）评估不同处理方式对CNV渗漏面积的影响。HE染色检测不同处理组CNV区域视网膜结构及完整性。组织切片免疫荧光检测在不同处理组TREM-1和VEGF在CNV中的定位。脉络膜铺片免疫荧光染色检测不同处理组巨噬细胞在CNV区域的聚集情况。结果:1.在激光光凝诱导的小鼠CNV模型中,免疫组化结果显示,与正常对照组相比,激光光凝后7天TREM-1在CNV的脉络膜区域表达增加。2.Western Blot结果显示,与正常对照组相比,TNF-α、TREM-1以及VEGF的表达随着激光光凝后时间的延长逐渐增加（P＜0.05）,在7-14天达到顶峰,之后逐渐减少。3.小鼠激光光凝后7天给予不同的药物处理方式,Western Blot结果显示,与损伤对照组相比,RBZ组VEGF的表达明显减少,但TREM-1和TNF-α的表达却无统计学差异（P＞0.05）;另外与损伤对照组相比,LP17组和联合用药组VEGF、TNF-α和TREM-1的表达均显著减少,并且差异均有统计学意义（P均＜0.05）。FFA和ICGA结果显示,RBZ组、LP17组以及联合用药组均能减少CNV区域的渗漏面积。HE染色也可明显看出,LP17、RBZ和联合用药显著减小了CNV面积,并对CNV区域视网膜结构的完整性具有保护作用。4.组织切片免疫荧光检测显示,激光光凝后7天,TREM-1和VEGF定位表达于CNV区域的脉络膜层,LP17通过抑制TREM-1可显著下调TREM-1和VEGF的表达。脉络膜铺片免疫荧光染色显示RBZ组、LP17组和联合药物组巨噬细胞聚集明显减少。结论:下调TREM-1表达可以显著抑制激光诱导的小鼠CNV形成,这种作用与TREM-1对VEGF和TNF-α的调节有关。TREM-1可能是CNV治疗的重要分子靶点,单独拮抗TREM-1或联合抗VEGF治疗有望提高CNV治疗效果。
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