背景:作为最常见的单基因常染色体遗传性疾病,家族性高胆固醇血症(familial hypercholesterolemia,FH)患者以极度升高的血浆低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)为特征,冠状动脉性心脏病(coronary artery disease,CAD)的发病风险较高,发病年龄提前。低密度脂蛋白受体(low-densitylipoprotein receptor,LDLR)、载脂蛋白B(apolipoproteinB,APOB)和前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白酶/可馨 9 型(proprotein convertase subtilisin/kexin type 9,PCSK9)是目前已知最为常见的致病性基因。尽管FH增加了全球性健康负担,但FH的诊断率在世界范围内不足1%。FH国际专家共识指出基因检测是FH诊断的金标准,扩大的基因检测可能提高FH的诊断率,对于FH患者应该早期诊断和干预。尽管在世界范围内关于FH患者基因研究的文章较多,但尚未有关于极早发CAD患者FH相关基因检测的研究。因此,本研究拟评估中国极早发CAD(≤35岁)人群中FH患者的比例、临床和基因突变特征。方法:本研究连续入选105例极早发CAD(≤35岁)且血浆LDL-C≥3.4 mmol/L的患者,采用下一代高通量基因测序技术(nextgenerationsequencing,NGS)对9个FH相关基因(LDLR,APOB,PCSK9,APOE,STAP1,LIPA,LDLRAP1,ABCG5/8)进行全外显子测序,对突变位点进行生物信息学分析和功能预测,确定突变位点的致病性,并对未报道过的突变位点进行Sanger测序验证。同时还对入选的患者采用荷兰临床血脂网络标准(Dutch Lipid Clinc Network,DLCN)和西蒙标准(Simon Broom,SB)进行诊断。结果:(1)在105例极早发CAD(≤35岁)的患者中,经遗传学分析确认的FH相关基因致病性突变的比例为38.1%(N=40),其中LDLR基因突变位点为15个,APOB基因突变位点为7个,PCSK9基因突变位点为2个,STAP1基因突变位点为1个,LDLR纯合子4名,复合型杂合子11名;(2)根据不同基因突变情况对血浆LDL-C水平进行分析,发现携带FH相关基因致病性突变的患者,尤其是纯合子患者,具有显著升高的血浆LDL-C水平;(3)根据DLCN诊断标准,有28(26.7%)例患者被诊断为可能性大和确诊的FH,而根据SB标准仅有将18(17.1%)例患者被诊断为可能和确诊的FH;(4)在40例携带FH相关基因致病性突变的患者中,根据DLCN标准有17(42.5%)例患者诊断为非FH,根据SB标准有25例患者诊断为非FH;(5)在本研究中,用于预测FH相关基因致病性突变的最佳LDL-C阈值为 4.56 mmol/L。结论:本研究通过对中国极早发CAD(≤35岁)人群的研究,发现FH是极早发CAD患者的常见致病原因,其中有38.1%的患者携带FH相关基因致病性突变,预测FH基因致病性突变的最佳LDL-C阈值为4.56 mmol/L。临床诊断标准的漏诊率约为42.5%-62.5%,这表明扩大的基因检测可以促进极早发CAD人群FH的诊断。背景:动脉粥样硬化性心血管疾病(arteriosclerotic cardiovascular disease,ASCVD)是目前危险人类健康的最重要的疾病之一,其主要病理学基础为血脂沉积导致全身动脉血管粥样硬化(arteriosclerosis,AS)斑块形成,根据累及部位的不同分为冠状动脉性心脏病(coronary artery disease,CAD)和周围血管性疾病(peripheral arterial disorder,PAD)。前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白酶/可馨9型(proprotein convertase substilisin/kexin type 9,PCSK9)已被证实为参与胆固醇代谢调节的重要蛋白之一,越来越多的研究指出在一般人群中它与CAD的发生发展有关。脂蛋白(a)[lipoprotein(a),Lp(a)]是一种类似于低密度脂蛋白胆固醇(Low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)的特殊大分子脂蛋白,有促进冠状动脉AS斑块形成的作用,随着对Lp(a)认识的加深其已成为心血管与血脂领域的研究热点之一。家族性高胆固醇血症(familial hypercholesterolemia,FH)是常见的遗传性高脂血症之一,其主要的特点是极度升高的血浆LDL-C和早发CAD。研究发现FH患者血浆PCSK9和Lp(a)远高于普通人群,且二者与血浆LDL-C水平关系密切。在一般人群中,PCSK9和Lp(a)血浆水平与ASCVD的关系已得到广泛研究,但在FH患者中这两者与ASCVD的存在,以及不同部位AS病变的关系尚未见报道。因此,本研究拟分析在FH患者中,血浆PCSK9和Lp(a)水平是否可作为ASCVD的危险因子,以及二者与不同部位AS斑块的关系。方法:使用荷兰临床脂质网络(Dutch Lipid Clinc Network,DLCN)标准对患者进行诊断,经下一代高通量基因测序技术(next generation sequencing,NGS)对9个FH相关基因(LDLR,APOB,PCSK9,APOE,STAP1,LIPA,LDLRAP1,ABCG5/8)进行检测分析,纳入DLCN总分大于6分的杂合型FH(heterozygous FH,HeFH)患者。使用冠状动脉造影、颈动脉彩色多普勒超声以及下肢动脉彩色多普勒超声对患者血管AS斑块进行检查。使用Gensini评分和Crouse评分评估冠状动脉和颈动脉的AS斑块的严重程度。使用酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)测定血浆PCSK9浓度,使用免疫比浊法测定血浆Lp(a)浓度,评价二者与FH患者ASCVD的存在以及不同部位AS病变的关系。结果:本研究共纳入151例HeFH患者,其中男性88名(58.3%),平均年龄为47.2岁。血浆PCSK9和Lp(a)呈现偏态分布,并且发现它们之间有正相关关系。接受冠状动脉造影和颈动脉彩色多普勒超声检测的有151人,其中有55人接受了下肢动脉彩色多普勒超声检查。与无AS斑块组相比,检测出冠状动脉和颈动脉AS斑块的HeFH患者血浆PCSK9水平明显更高,而PCSK9在是否检测出股动脉AS斑块的两组中没有发现差异。检测出冠状动脉AS斑块的HeFH患者血浆Lp(a)水平显著升高,而在是否检测出颈动脉或股动脉AS斑块的两组中无统计学差异。相关性分析显示PCSK9和Lp(a)浓度升高的HeFH患者中,ASCVD的患病率和AS斑块的严重程度也显著升高。多元回归分析表明,血浆PCSK9与CAD和PAD独立相关,而Lp(a)仅与CAD相关。结论:HeFH患者中血浆PCSK9浓度的升高可作为CAD和PAD的风险预测因子,而血浆Lp(a)仅是HeFH患者CAD的风险标志物,这一结果强调了不同部位动脉AS斑块的形成机制有差异,提示PCSK9和Lp(a)水平在不同ASCVD中起到的作用不同,PCSK9相比于Lp(a)可能是更好的ASCVD预测因子。背景:作为最常见的单基因常染色体家系遗传性疾病,家族性高胆固醇血症(familial hypercholesterolemia,FH)患者以极度升高的血浆低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)为特征,冠心病(coronary artery disease,CAD)的发病风险较高。相比于一般人群,未经治疗的FH患者经历主要心血管不良事件(majorcardiovascularevents,MACEs)的风险显著增加。前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白酶/可馨 9 型(proproteinconvertase substilisin/kexintype 9,PCSK9)已被证实为参与胆固醇代谢调节的重要蛋白之一,且PCSK9基因突变是造成FH的原因之一。在普通人群中,PCSK9血浆水平与CAD的关系已得到广泛研究,越来越多的研究指出它与动脉粥样硬化(arteriosclerosis,AS)的发生发展有关且可作为CAD治疗的靶标之一。此外,血浆PCSK9水平也被发现可以作为普通人群MACEs的预测因子。近年来的研究发现FH患者血浆PCSK9水平远高于普通人群,且血浆PCSK9水平与FH的临床表型严重程度有关。考虑到FH患者MACEs的风险更高、程度更严重,因此寻找风险预测因子、早期识别MACEs高风险人群以启动早期诊断和治疗,以改善FH患者预后是十分关键的。血浆PCSK9水平是否与FH患者MACEs相关目前尚未见报道。因此,本研究拟分析在FH患者中,血浆PCSK9是否可作为FH患者未来MACEs的风险预测因子。方法:使用荷兰临床脂质网络(Dutch Lipid Clinc Network,DLCN)标准对患者进行诊断,经下一代高通量基因测序技术(nextgenerationsequencing,NGS)对9个FH 相关基因(LDLR,APOB,PCSK9,APOE,STAP1,LIPA,LDLRAP1,ABCG5/8)进行检测分析,纳入DLCN总分大于6分的杂合型FH(heterozygous FH,HeFH)患者。使用冠状动脉增强CT和冠状动脉造影对患者冠状动脉血管进行检查。使用钙化积分(coronary artery calcification score,CACS)和 Gensini 评分来评估冠状动脉钙化和狭窄的严重程度。酶联免疫吸附测定法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)测定血浆PCSK9浓度。多因素线性回归分析用于计算血浆PCSK9水平与CACS和Gensini评分的相关性。多因素Cox回归分析用于计算血浆PCSK9水平与MACEs的相关性,并计算风险比值(hazard ratios,HR)和95%置信区间(confidence intervals,CI)。结果:本研究共纳入338例HeFH患者,其中男性198名(58.6%),平均年龄为49.4±11.4岁。多因素线性回归分析表明血浆PCSK9水平与CACS呈独立的正相关(β=0.449,p<0.001),与 Gensini 评分也呈正相关(β=0.435,p=0.014)。平均随访期长为3年,这期间记录到33例(9.8%)MACEs。发生MACEs的HeFH患者相比于未发生MACEs的患者血浆PCSK9水平显著升高[332.47(294.74-448.96)vs.311.89(246.73-386.61),p=0.038]。将血浆PCSK9水平按照从小到大的顺序排列并分为三分位,Kaplan-Meier曲线分析观察到,PCSK9最高分位的患者无事件生存期相比于最低分位的患者较低(Log-Rank p=0.0017)。在校正了多种混杂因素后,PCSK9水平与MACEs独立正相关,PCSK9水平的最高分位比最低分位的HR为3.70,95%CI为1.16-11.82。当以连续性变量分析PCSK9水平时,PCSK9水平仍与MACEs独立正相关,PCSK9每升高一标准差时,MACEs风险升高86%(HR:1.86,95%CI:1.31-2.65)。根据常见的MACEs风险预测因子建立Cox预测模型,当将PCSK9加入到这一模型中时,显著提升了重分类改善指标(net reclassification)和综合判别改善指数(integrated discrimination)。结论:HeFH患者中血浆PCSK9浓度与冠状动脉CACS和Gensini评分呈独立的正相关,且无论以连续性变量或分类变量分析,PCSK9水平均可作为HeFH患者未来MACEs的风险预测因子,这一结果提示PCSK9浓度的测量可能有助于HeFH患者心血管事件的识别和风险分层。