子宫是女性体内重要的生殖器官,除了具有月经、生育以及免疫功能外,还有内分泌的作用。近年来子宫内膜癌的发病率持续上升,这严重影响了女性的生殖健康,而雌激素刺激是其发病的高危因素。玉米赤霉烯酮（ZEA）作为类雌激素,在体内与雌激素受体结合后可引发雌激素效应,使机体内生殖激素发生紊乱,最终破坏生殖系统。有研究表明,ZEA可致使动物机体生殖器官异常,引起生殖系统肿瘤、男女不孕不育、胎儿及婴幼儿发育障碍等生殖健康损伤,ZEA对人子宫内膜癌Ishikawa细胞的增殖可能有所影响。随着对mi RNAs的深入研究发现,在子宫内膜癌发生发展的不同阶段mi RNAs表达谱明显异常,开拓了对子宫内膜癌研究的另一新的领地,mi RNAs有望成为子宫内膜癌的一种新的诊断手段。在Ishikawa细胞中关于ZEA诱导的mi RNAs对Ishikawa细胞增殖影响的报道并不多见,因此本研究以人子宫内膜癌Ishikawa细胞系为研究对象,探讨ZEA处理Ishikawa细胞后差异表达的mi RNAs对细胞增殖能力的影响及其作用机制。本研究前期使用不同浓度的ZEA（0、10、50μM）处理Ishikawa细胞48 h,采用形态观察和CCK-8检测细胞活力,通过高通量测序结果,分析测序数据,筛选出目标分子mi R-326,再使用Edu法、流式细胞术、过表达、双荧光素酶报告载体验证等实验方法研究mi R-326对Ishikawa细胞增殖的影响及其功能,研究结果如下:低浓度的ZEA（10μM）对Ishikawa细胞有轻微的促增殖作用,高浓度的ZEA（50μM）对Ishikawa细胞有明显的抑增殖作用。高通量测序结果显示,低浓度组与空白组比较,p<0.05作为差异基因筛选的阈值,满足条件的mi RNAs有60个,上调的mi RNAs有22个,下调38个;p<0.01差异极显著的有11个,其中上调5个,下调6个;进一步分析p<0.05,log2≥1为筛选标准,上调的有7个。高浓度组与空白组比较,p<0.05作为差异基因筛选的阈值,满足条件的mi RNAs有220个,上调的mi RNAs有89个,下调131个;p<0.01差异极显著的有60个,其中上调19个,下调41个;p<0.05,log2≥1为筛选标准,上调的有48个。GO分析显示有860条显著富集的GO terms（p<0.05）,KEGG富集性分析显示,有100条显著性富集的信号通路（p<0.05）,其中多条与细胞增殖相关。测序分析和实时荧光定量PCR结果显示ZEA能显著降低mi R-326在Ishikawa细胞中的表达量,mi R-326可能具有调控Ishikawa细胞增殖能力的作用。CCK-8、流式细胞术、Edu结果显示过表达mi R-326能明显降低细胞增殖能力,抑制mi R-326的表达,细胞增殖活力显著增强。过表达mi R-326,细胞周期蛋白CCND1显著下调,细胞活力降低,抑制mi R-326的表达,CCND1显著上调,细胞增殖活力显著增强。双荧光素酶报告载体验证CCND1为mi R-326的靶基因。结论:ZEA可以影响Ishikawa细胞的增殖,低浓度促增殖,高浓度抑制增殖。在Ishiakwa细胞中过表达mi R-326,可引起细胞G1期阻滞,影响细胞周期进程,细胞活力减弱;抑制mi R-326表达,G2期细胞增多,细胞增殖能力增强。mi R-326可以靶向CCND1调控Ishikawa细胞活力和增殖能力,也可以调节细胞周期相关基因的表达变化。