论文部分内容阅读
目的:亲环素A(简称CypA)由PPIA基因编码,是典型的Cyclophilin家族蛋白,具备肽酰脯氨酸异构酶活性,在多种细胞生物学过程中有重要的作用,如:信号通路信号转导、蛋白质折叠和转运、细胞凋亡、病毒复制,以及炎症、免疫调节。亲环素A与CD147共同参与细胞凋亡、单核细胞募集、泡沫细胞形成、血栓过程如血小板聚集形成和稳定,进而参与冠心病的发病与进展。本研究旨在探讨PPIA基因rs6850单核苷酸多态性与冠心病的相关性。
方法:选取2008年1月至2016年12月就诊的患者1004例,包括698例冠心病组患者和306例对照组研究对象。冠心病组研究对象的纳入标准为经冠脉造影提示主要冠状动脉血管至少有50%的狭窄,对照组研究对象的纳入标准为冠脉造影或冠状动脉CTA提示冠状动脉壁几乎光滑、未见明显狭窄。通过询问病史,我们采集了两组研究对象的年龄、性别、吸烟史、饮酒史、高血压、2型糖尿病等基本信息,全部研究对象接受标准化临床和实验室检查检测血液学指标,包括肌酐水平、空腹血糖、血脂水平等,并记录。利用在线软件(http://sg.idtdna.com/Primerquest/Home/Index)设计并合成rs6850的引物序列。基因组DNA是通过磁珠法提取试剂盒提取的,然后通过PCR扩增目的片段,电泳检测PCR产物。PCR产物通过AxyPrepDNA回收试剂盒回收。通过NanoDropOne微量测定仪测定割胶回收产物的浓度。采用Sanger法测序,完成测序反应的实验结果,导出结果,利用SequencingAnalysis5.2软件分析测序结果。通过与已知的rs6850序列的对比,分析rs6850位点的基因型。
通过SHEsis分析平台计算检验两组间等位基因及基因型构成比是否符合Hardy-Weinberg平衡定律。用SPSS18.0软件对数据进行统计学分析。其中用均值±标准差(x±s)表示正态分布的计量资料,采用两独立样本t检验比较两组有无差异;用中位数和范围表示正态分布的计量资料,用Mann-WhitneyU检验比较两组有无差异。用频数和构成比表示计数资料,用x2检验比较两组有无差异。对PPIA基因rs6850单核苷酸多态性(A/G)的等位基因及基因型构成比用x2检验比较,检验在冠心病组及对照组间差异是否有统计学意义。利用二元Logistic回归分析校正混杂因素,探讨PPIA基因rs6850单核苷酸多态性(A/G)与冠心病是否有独立相关性,以P<0.05为差异有统计学意义。
结果:两组间的饮酒率无显著差异(x2=1.444,P=0.230),冠心病组的男性多于对照组的男性(72.6%vs46.7%,P<0.05),冠心病组的吸烟率、高血压病罹患率、2型糖尿病罹患率显著高于对照组(均P<0.05)。舒张压、血清总胆固醇、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白、载脂蛋白AI浓度在两组间无显著差异(均P>0.05)。冠心病组的年龄显著高于对照组(65.78±11.012vs61.42±10.351,P<0.05),收缩压、空腹血糖、甘油三酯、脂蛋白(a)、载脂蛋白B浓度均显著高于对照组(均P<0.05)。等位基因及基因型频率与冠心病相关性经Hardy-Weinberg平衡检验,均符合Hardy-Weinberg平衡原则(均P>0.05),提示本研究能代表rs6850在整体人群分布情况。冠心病组PPIA基因位点rs6850的AA基因型少于对照组,GG型多于对照组,构成比差异有统计学意义(x2=24.462,P<0.05)。冠心病组rs6850的G等位基因构成比高于对照组(59.5%vs48.2%),差异有统计学意义(x2=18.402,P<0.05)。用二元Logistic回归分析校正混杂因素后,PPIA基因位点rs6850多态性与冠心病易感性有独立相关性(P<0.01),其中相对于GG基因型,AA基因型的OR=0.445,95%CI:0.291-0.558,P<0.01,相对于GG基因型,AG基因型的OR=0.797,95%CI:0.558-1.138,P=0.212。采用显性模型,rs6850单核苷酸多态性(A/G)PPIA基因rs6850单核苷酸多态性(A/G)与冠心病发病风险有独立相关性(GG+AGvsAA:OR=1.945,95%CI:1.945-2.777,P<0.01)。同时,采用隐性模型,PPIA基因rs6850单核苷酸多态性(A/G)与冠心病发病风险有独立相关性(GGvsAG+AA:OR=1.514,95%CI:1.081-2.120,P=0.016)。
结论:PPIA基因rs6850单核苷酸多态性(A/G)与冠心病发病风险有独立相关性。
方法:选取2008年1月至2016年12月就诊的患者1004例,包括698例冠心病组患者和306例对照组研究对象。冠心病组研究对象的纳入标准为经冠脉造影提示主要冠状动脉血管至少有50%的狭窄,对照组研究对象的纳入标准为冠脉造影或冠状动脉CTA提示冠状动脉壁几乎光滑、未见明显狭窄。通过询问病史,我们采集了两组研究对象的年龄、性别、吸烟史、饮酒史、高血压、2型糖尿病等基本信息,全部研究对象接受标准化临床和实验室检查检测血液学指标,包括肌酐水平、空腹血糖、血脂水平等,并记录。利用在线软件(http://sg.idtdna.com/Primerquest/Home/Index)设计并合成rs6850的引物序列。基因组DNA是通过磁珠法提取试剂盒提取的,然后通过PCR扩增目的片段,电泳检测PCR产物。PCR产物通过AxyPrepDNA回收试剂盒回收。通过NanoDropOne微量测定仪测定割胶回收产物的浓度。采用Sanger法测序,完成测序反应的实验结果,导出结果,利用SequencingAnalysis5.2软件分析测序结果。通过与已知的rs6850序列的对比,分析rs6850位点的基因型。
通过SHEsis分析平台计算检验两组间等位基因及基因型构成比是否符合Hardy-Weinberg平衡定律。用SPSS18.0软件对数据进行统计学分析。其中用均值±标准差(x±s)表示正态分布的计量资料,采用两独立样本t检验比较两组有无差异;用中位数和范围表示正态分布的计量资料,用Mann-WhitneyU检验比较两组有无差异。用频数和构成比表示计数资料,用x2检验比较两组有无差异。对PPIA基因rs6850单核苷酸多态性(A/G)的等位基因及基因型构成比用x2检验比较,检验在冠心病组及对照组间差异是否有统计学意义。利用二元Logistic回归分析校正混杂因素,探讨PPIA基因rs6850单核苷酸多态性(A/G)与冠心病是否有独立相关性,以P<0.05为差异有统计学意义。
结果:两组间的饮酒率无显著差异(x2=1.444,P=0.230),冠心病组的男性多于对照组的男性(72.6%vs46.7%,P<0.05),冠心病组的吸烟率、高血压病罹患率、2型糖尿病罹患率显著高于对照组(均P<0.05)。舒张压、血清总胆固醇、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白、载脂蛋白AI浓度在两组间无显著差异(均P>0.05)。冠心病组的年龄显著高于对照组(65.78±11.012vs61.42±10.351,P<0.05),收缩压、空腹血糖、甘油三酯、脂蛋白(a)、载脂蛋白B浓度均显著高于对照组(均P<0.05)。等位基因及基因型频率与冠心病相关性经Hardy-Weinberg平衡检验,均符合Hardy-Weinberg平衡原则(均P>0.05),提示本研究能代表rs6850在整体人群分布情况。冠心病组PPIA基因位点rs6850的AA基因型少于对照组,GG型多于对照组,构成比差异有统计学意义(x2=24.462,P<0.05)。冠心病组rs6850的G等位基因构成比高于对照组(59.5%vs48.2%),差异有统计学意义(x2=18.402,P<0.05)。用二元Logistic回归分析校正混杂因素后,PPIA基因位点rs6850多态性与冠心病易感性有独立相关性(P<0.01),其中相对于GG基因型,AA基因型的OR=0.445,95%CI:0.291-0.558,P<0.01,相对于GG基因型,AG基因型的OR=0.797,95%CI:0.558-1.138,P=0.212。采用显性模型,rs6850单核苷酸多态性(A/G)PPIA基因rs6850单核苷酸多态性(A/G)与冠心病发病风险有独立相关性(GG+AGvsAA:OR=1.945,95%CI:1.945-2.777,P<0.01)。同时,采用隐性模型,PPIA基因rs6850单核苷酸多态性(A/G)与冠心病发病风险有独立相关性(GGvsAG+AA:OR=1.514,95%CI:1.081-2.120,P=0.016)。
结论:PPIA基因rs6850单核苷酸多态性(A/G)与冠心病发病风险有独立相关性。