研究背景及目的乳腺癌是世界上的主要公共卫生问题,其快速的增殖和转移问题是导致乳腺癌患者死亡的主要原因。职业暴露与环境雌激素污染都会促进其发生发展,但是,现如今对于乳腺癌发展分子机制还尚未尚未完全清楚,乳腺癌的临床治疗仍缺乏有效相关的靶点。序列相似性家族64位,成员A（Family with Sequence Similarity 64,Member A,FAM64A）是有丝分裂调节蛋白,其主要作用是促进细胞时相中有丝分裂由中期向后期推进。尽管以往有文献报道过FAM64A基因与白血病和其他疾病相关,但关于乳腺癌的致癌机制仍没有直接证据的报道。该分子在乳腺癌的发生发展过程中扮演了什么角色,目前仍缺乏数据。因此,通过本研究可阐明FAM64A在乳腺癌发展过程中的作用,并初步探讨它的调控机制。研究方法1.通过TCGA数据库、乳腺癌细胞系和临床样本分析了 FAM64A在乳腺癌样本中的表达情况;2.采用KMplotter数据库分析FAM64A mRNA表达量对乳腺癌病人预后的影响;3.对乳腺癌MDA-MB-231和MCF-7细胞转染FAM64A过表达质粒和干扰序列构建了瞬转型细胞模型,并采用Western blot实验验证了转染效率;4.采用过CCK-8细胞增殖实验、平板克隆实验、流式细胞术以及Transwell迁移实验评价FAM64A对乳腺癌细胞体外增殖能力和迁移能力的改变;5.采用Western blot实验验证了周期蛋白Cyclin B1和迁移相关蛋白Vimentin和E-Cadherin的丰度变化;6.采用双荧光素酶报告基因实验检测FAM64A对靶基因Cyclin B1的调控作用;7.采用RT-qPCR实验验证了 EMT相关转录因子Snail、Twist、Slug mRNA丰度变化。结果1.通过查询TCGA数据库发现FAM64A mRNA在乳腺癌样本中普遍高表达,同时选用乳腺癌细胞系和临床乳腺癌组织样本进行了验证,并得出了一致的结果;2.KMplotter数据库也表明了FAM64A mRNA表达水平与乳腺癌患者生存时间之间存在负相关关系;3.FAM64A蛋白在乳腺癌细胞系上的表达量与其增殖速度和迁移能力呈正相关关系;4.干扰FAM64A的表达可降低乳腺癌MDA-MB-231和MCF-7细胞的增殖速度,平板克隆形成能力并造成细胞G1期阻滞;5.TCGA数据库表明FAM64A与Cyclin B1表达呈强正相关关系;6.FAM64A过表达和干扰细胞模型表明,干扰了 FAM64A蛋白表达可下调Cyclin B1蛋白的表达量;7.荧光素酶报告实验表明FAM64A通过调控靶基因Cyclin B1的表达从而介导细胞增殖;8.过表达FAM64A可促进乳腺癌细胞的迁移,此时间质标志物Vimentin表达上调而上皮标志物E-Cadherin表达下调,同时促进EMT相关转录因子Snail、Twist、Slug mRNA的表达;反之亦然。结论通过实验,我们认为干扰FAM64A蛋白的表达,可以降低乳腺癌细胞的增殖速度和迁移能力,而过表达FAM64A蛋白则能促进乳腺癌细胞的迁移。这些发现为乳腺癌治疗提供了新的潜在性的分子治疗策略和提供潜在性的治疗靶点。