MSTN是由组织细胞分泌的一种功能性糖蛋白,又称之为肌肉生长负控因子,属于TGF-β超家族,对肌肉生长起到负调控的作用。自然界MSTN基因突变的小鼠会出现双肌表型,该基因剔除的小鼠肌肉组织重量增加2-3倍。由于MSTN的重要性以及其在动物育种中的潜在应用前景日益得到动物育种学家的关注,生产上可以通过抑制MSTN的活性,提高养殖品种的肌肉含量,促进养殖品种的生长。 由于鱼类在系统发生过程中,有基因重复现象发生,从而导致MSTN产生两种基因型。本实验室在已获得黑鲷（Sparus macrocephalus）MSTNⅠ的基础上,采用同源克隆的方法,从基因组DNA中获得了黑鲷MSTNⅡ基因DNA序列,含起始密码子及终止密码子,包括3个外显子及2个内含子;并且以DNA为模板,通过基因步移技术扩增得到562bp 5’-UTR（5’-untranslated region）;同时以黑鲷脑组织cDNA为模板,通过RT-PCR、RACE技术（Rapid Amplification cDNA Ends,RACE）获得了黑鲷MSTNⅡ1080bp完整开放阅读框（Opening Reading Frame,ORF）及160bp的3’-UTR（3’-untranslated region）。这是目前国内关于黑鲷MSTNⅡ的首次报道。序列分析发现黑鲷MSTNⅠ与MSTNⅡ基因序列存在较大差异,不仅序列的长度不同,序列间相似度也不高,但在外显子Ⅲ部分,不仅序列的长度一致,且序列间相似度也很高,说明MSTNⅡ外显子Ⅲ在物种间的保守性很高。 黑鲷MSTNⅡ呈现出典型的TGF-β超家族成员的特点,预测的MSTNⅡ蛋白序列由359个氨基酸组成,包含三个结构域,分别为1-16位氨基酸残基间的一个潜在的信号肽序列,33-241位氨基酸残基间的TGF-βpropeptide domain和262-359位氨基酸残基间的TGF-βdomain,其中在TGF-βpropeptide domain的C末端含有一个保守的蛋白酶加工位点（RXRR）,在TGF-βdomain含有9个保守的Cys残基。 设计一对跨内含子Ⅰ的引物,用常规RT-PCR检测了MSTNⅠ与MSTNⅡ在黑鲷成体10个组织（肌肉、脑、眼、心脏、肝脏、肾脏、肠、脾脏、脂肪）中的表达情况。其中MSTNⅠ主要在肌肉、脑、眼和心脏中表达,而MSTNⅡ则主要在脑和脂肪组织中表达,在肌肉中未检测到表达。这表明黑鲷两型MSTN由于基因的复制及不同的进化历程,可能使它们的功能产生分歧,MSTNⅠ主要执行抑制肌肉生长的作用,而MSTNⅡ可能与脑和脂肪等的发育调控有关。