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绞股蓝Gynostemma pentaphyllum(Thunb.)Makino(GP)为葫芦科绞股蓝属多年生草质藤本植物,又称七叶参、七叶胆、甘茶蔓。全世界有16种和3变种,我国有15种和3变种,主要分布于长江以南各省区,其中以云南种类最多。关于绞股蓝的研究,上世纪九十年代文献报道较多,主要集中在绞股蓝皂苷成分上,较少涉及绞股蓝多糖(Gynostemma pentaphyllum polysaccharides,GPS)的研究,而且涉及绞股蓝多糖的也是绞股蓝粗多糖的研究,未对绞股蓝粗多糖进行分离纯化。根据文献报道,绞股蓝粗多糖的主要药理作用有抗肿瘤和增强免疫力两个作用,另外还有抗氧化等作用。本论文对绞股蓝粗多糖进行了分离纯化,得到了两种精制多糖组分,并对其结构和药理活性进行了初步研究。论文主要内容如下: 1、绞股蓝粗多糖提取方法的优化。绞股蓝药材粉碎后,先用乙醇回流除去单糖、寡糖等小分子物质,然后采用正交实验设计考察了料液比(A)、提取时间(B)、提取温度(C)和提取次数(D)对绞股蓝粗多糖提取率的影响,并结合实际综合考虑提取效率,多糖的性质等,最终确定最佳提取工艺A2B1C3D2,即:10倍量水、100℃、0.5小时提取3次。 2、绞股蓝多糖的分离纯化。绞股蓝粗多糖经氯化钙脱果胶,双氧水脱色得到纯化多糖。纯化多糖经DEAE-Sephrose分离,氯化钠溶液洗脱,紫外210nm结合苯酚硫酸法检测组分,得到GPS-2、GPS-3、GPS-4三个多糖组分。GPS-2、GPS-3、GPS-4各多糖组分再分别经Superdex G-200柱分离,0.15mol/L氯化钠溶液洗脱,紫外210nm检测,收集各组分,冷冻干燥,再经Sephadex G-25脱盐,最后冷冻干燥得绞股蓝精制多糖GPS-2、GPS-3、GPS-4。