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目的:测定常绿钩吻碱（Sempervirine,SPV）的理化性质,研究SPV微乳温敏凝胶的制备方法,并进行处方工艺优化。同时考察其对鼻纤毛的刺激性和毒性,保证制剂鼻腔给药安全性。比较游离药物与制剂药物的细胞毒性,通过体外释放和黏膜透过的体外评价方式推测药物在鼻腔内的释放透过机制;评价SPV微乳温敏凝胶药代动力学特征及鼻腔给药实现脑靶向的可行性。方法:1.处方前研究。建立常绿钩吻碱UPLC测定方法,测定SPV在不同p H中的溶解度和油水分配系数。2.微乳处方研究。溶解度法筛选乳化剂和助乳化剂,通过绘制伪三元相图确定油相。以SPV微乳的平均粒径和载药量为指标进行星点效应-响应面法对处方进行优化,并验证最优处方,进行质量评价。3.微乳温敏凝胶的处方研究。采用单因素考察凝胶基质的比例,以胶凝温度偏离32.5℃差值的绝对值为考察指标,进行星点效应-响应面法对处方进行优化,确定凝胶基质的比例。加入壳聚糖改善制剂渗透情况,并结合释放和渗透结果选择合适的壳聚糖浓度。4.体外释放及鼻黏膜透过率研究。采用Franz扩散池法考察凝胶体外累积释放度及鼻黏膜累积透过率,评价微乳凝胶的释放和黏膜透过行为。5.安全性考察及初步药效学研究。采用在体蟾蜍上颚模型及大鼠鼻黏膜病理切片两种方法,分别以纤毛持续摆动时间和大鼠鼻腔给药后鼻黏膜的形态结构评价SPV微乳温敏凝胶对鼻黏膜的刺激性及毒性。MTT法检测SPV微乳温敏凝胶对人神经胶质瘤的U251细胞毒性。6.药代动力学及脑靶向研究。取SD大鼠84只,分为SPV溶液尾静脉注射组、SPV溶液鼻腔给药组、SPV微乳鼻腔给药组和SPV壳聚糖微乳温敏凝胶鼻腔给药组,于给药后0.25、0.5、2、4、8、12、24 h腹主动脉取血（每个时间点3只大鼠）,同时采集脑组织,用UPLC-MS/MS测定血浆和脑组织中的药物含量,研究SPV壳聚糖微乳温敏凝胶在大鼠体内的药代动力学特征及脑靶向性。结果:1.SPV在pH 1.2～7.4的PBS中的溶解度为285.356 mg?L-1～557.945 mg?L-1,油水分配系数在0.316～5.803。2.SPV在乳化剂RH40、Tween-80和助乳化剂1,2-丙二醇中的溶解度较大,将助乳化剂1,2-丙二醇分别与两种乳化剂混合形成混合乳化剂后,仅能与油相中的蓖麻油、Labrafil M 1944 CS、MCT、EO的4种油相形成微乳,RH40、1,2-丙二醇、Labrafil M 1944CS的配伍所形成的微乳区域面积最大。通过伪三元相图和星点效应-响应面法优化得到的处方组成为Labrafil M 1944 CS:RH40:1,2-丙二醇:水=5%:19.53%:19.25%:56.22%。此时的微乳体系粒径分布均匀,载药量最高。载药微乳澄清透明,为黄绿色体系,长期稳定性（6个月）试验表明SPV微乳外观、粒径、载药量保持基本稳定。3.选择P407和P188温度敏感型凝胶基质材料,以胶凝温度偏离32.5℃差值的绝对值为考察指标,进行星点效应-响应面法对处方进行优化,最佳处方为P407含量16.92%,P188含量4.21%,平均胶凝温度为32.6℃。加入浓度为0.2%的壳聚糖改善药物在黏膜上的渗透情况,使药物在鼻黏膜上具有较好的渗透率。此时壳聚糖微乳凝胶的p H为6.03±0.03,黏度131.17 m Pa·s,属于低黏度流体,且在稳定性考察期间其p H、含量和黏度无明显变化。4.通过Franz扩散池法考察微乳温敏凝胶体外累积释放度及鼻黏膜累积透过率,其体外释药符合一级释放模型。游离SPV的释放速率高于SPV微乳温敏凝胶,但微乳温敏凝胶的透膜能力明显优于游离药物。5.SPV壳聚糖微乳温敏凝胶在蟾蜍上颚给药后发现,蟾蜍纤毛持续摆动时间为阴性组的90.21%,在大鼠鼻腔给药1周后的鼻黏膜病理切片上发现并没有对鼻黏膜结构产生损坏,因此认为可以作为较为安全的制剂进行鼻腔给药。在细胞毒性试验中发现,72h时SPV壳聚糖微乳凝胶的IC50为游离SPV的0.993倍,两者对U251细胞的抑制率无统计学差异,说明SPV由游离状态转变至微乳凝胶剂型时不影响其体外抗肿瘤作用。6.鼻腔给SPV壳聚糖微乳温敏凝胶、SPV微乳和SPV溶液的绝对生物利用度分别为74.69%、65.66%和53.21%,且各组鼻腔给药后的脑靶向性指数均大于1,尤以SPV壳聚糖微乳凝胶的脑靶向性指数最大为2.61,说明与尾静脉注射相比,鼻腔给药具有一定的脑靶向性,且壳聚糖微乳凝胶鼻腔给药的脑靶向性最佳。结论:SPV壳聚糖微乳温敏凝胶剂为SPV的制剂开发奠定了一定的基础。同时,SPV壳聚糖微乳温敏凝胶能够提高体内的生物利用度,经鼻给药后具有一定的靶向性,为该药物可通过鼻-脑通路治疗脑神经胶质瘤提供了实验依据。