血红铆钉菇子实体抗肿瘤活性成分研究

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血红铆钉菇(Chroogomphus rutilus)子实体散生、群生或单生,是外生菌根菌,也是一种名贵的食用菌。目前,对于血红铆钉菇的研究多数集中在分类、形态和栽培及发酵方面,而有关血红铆钉菇子实体生物活性和化学成分的研究却少见报道。因此,分离血红铆钉菇子实体抗肿瘤有效成分,并进一步确定其化学成分有重要意义。  本实验将血红铆钉菇干燥子实体的乙醇提取物,经过水提醇沉和萃取方法,分别得到粗多糖、石油醚、二氯甲烷层、乙酸乙酯层、正丁醇层和水层的提取物。为了研究血红铆钉菇子实体的抗肿瘤活性,用MTT法对各层提取物进行了体外细胞活性筛选实验,结果显示血红铆钉菇子实体二氯甲烷提取物对大鼠肝星状细胞(HSC-T6)、人肝癌细胞(SK-Hep1)和人肺癌细胞(A549)有一定抑制作用,对HSC-T6、SK-Hep1和A549细胞的半数抑制浓度(IC50值)分别为52.39、39.60、59.55μg/mL,因而本实验进一步对血红铆钉菇子实体二氯甲烷提取物进行了活性成分研究。  利用多种分离手段,包括正相硅胶、反相硅胶、葡聚糖凝胶、高效液相色谱仪,从血红铆钉菇子实体的二氯甲烷提取物中分离得到7个单体化合物,并利用多种波谱分析(1H-NMR、13C-NMR、DEPT-135、HMBC、HMQC、H-HCOSY、质谱等)和物理化学方法鉴定其结构分别为:2-(4’,8’-dimethylnona-3’,7’-dienyl)-8-hydroxy-2-methyl-2H-chromene-6-carboxylic acid(1)、亚油酸(2)、麦角甾-4,6,8(14),22-四烯-3-酮(3)、油酸(4)、对羟基苯甲醛(5)、麦角甾-7-烯-3β-醇(6)、对羟基苯乙酸甲酯(7),其中化合物1为新化合物,化合物3、5-7均为该植物中首次分离得到。  为进一步研究血红柳丁菇二氯甲烷提取物的抗肿瘤活性成分,用MTT法测定了化合物1-7对大鼠肝星状细胞(HSC-T6)、人肝癌细胞(SK-Hep1)和人肺癌细胞(A549)的抑制作用,结果显示化合物3和6对HSC-T6、SK-Hep1、A549细胞生长均有较强的抑制作用,化合物3对三种细胞的半数抑制浓度(IC50)分别为22.08、32.02、12.65μM,化合物6对三种细胞的半数抑制浓度(IC50)分别为83.98、26.00、21.48μM。  本课题对血红铆钉菇子实体化学成分及其抗肿瘤活性进行了研究,为进一步研究和开发新的抗肿瘤活性物质提供了科学依据。
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