【摘 要】
:
研究目的 研究透明质酸-g-硫辛酸微球颗粒(HA-LA MS)制成的可注射凝胶制剂治疗早期膝骨关节炎(KOA)的效果,验证该水凝胶的可注射性和润滑性,在体外细胞实验中评估其活性氧清除能力和抗炎作用,并对大鼠KOA模型的治疗效果进行大体观察以及组织学评价。研究方法 将透明质酸与硫辛酸进行酯化反应后获得透明质酸-g-硫辛酸酯(HA-LA),再由反相乳液法制备获得的HA-LA微球,同大分子HA-LA溶液
论文部分内容阅读
研究目的 研究透明质酸-g-硫辛酸微球颗粒(HA-LA MS)制成的可注射凝胶制剂治疗早期膝骨关节炎(KOA)的效果,验证该水凝胶的可注射性和润滑性,在体外细胞实验中评估其活性氧清除能力和抗炎作用,并对大鼠KOA模型的治疗效果进行大体观察以及组织学评价。研究方法 将透明质酸与硫辛酸进行酯化反应后获得透明质酸-g-硫辛酸酯(HA-LA),再由反相乳液法制备获得的HA-LA微球,同大分子HA-LA溶液混合制成可注射的微球水凝胶制剂。对HA-LA MS体系的表征结构进行观察,测量流变学性能、挤出性能和润滑性能。在体外通过活性氧(ROS)清除、细胞毒(CCK-8)实验以及同诱导炎症软骨细胞共培养,验证其抗氧化应激特性、炎症抑制能力和生物相容性。此外在体内实验部分,选取2月龄健康雄性SD大鼠24只并随机分成4组,每组6只,一组不制备OA模型作为健康对照组,另三组通过膝关节腔内注射碘乙酸(MIA)制备OA模型后,再分成NS组(仅注射生理盐水),HA组(注射普通HA)和HA-LA MS水凝胶组(注射HA-LA MS水凝胶),三个实验组分别在第2周和第4周时进行两次注射干预。第6周时处死大鼠,通过关节软骨大体观察、苏木精-伊红染色(hematoxylin-eosin staining,HE)、番红-固绿染色(safranin O-fast green,S-F)、免疫组织化学染色(immunohistochemistry,IHC)及组织学评分进行具体评价。研究结果 HA-LA MS在扫描电镜下可观察到良好的形态一致性和吸水性。流变学测试中HA-LA MS水凝胶表现出经典的剪切变稀特性,意味着在挤出过程中受剪切应力增加时其粘度会逐渐减小,证实其具备良好的连续可注射性。激光共聚焦显微镜下可见挤出的凝胶制剂由大量相对自由且具有流动性、滑动性的微球构成。而摩擦学测试中,HA-LA MS自身与HA-LA MS水凝胶的滚转效应都能有效地降低摩擦,起到对界面优秀的润滑作用。在体外细胞实验中,荧光显微镜下观察到加入HA-LA MS后,ROS荧光强度和范围均显著降低,同样表现出显著的ROS清除功能。CCK-8实验证实HA-LA体系具有良好生物相容性,对软骨细胞没有细胞毒性。而在体外诱导的软骨细胞炎症中,HA-LA体系能够有效抑制炎症因子,缓解由炎症反应引起的变性。在体内实验中,6周时的大体观察可见对照组样同健康膝关节,内外侧髁、髁间窝及滑车结构清晰完整,关节软骨面光滑规整,色泽正常,未见软骨层凹陷、皲裂、纤维化或缺损;NS组关节面软骨明显糜烂、断裂缺失,内外侧髁见骨质增生,滑车沟软骨下骨显露;HA组内外侧髁表面存在软骨层软化和皲裂;HA-LA MS水凝胶组软骨面整体光滑且结构仍保持完整,未见大范围的软骨面断裂或缺损。HE染色和S-F染色结果表明HA-LA MS水凝胶组的软骨层形态结构保留更为完好。IHC染色结果提示相比NS组和HA组,HA-LA MS水凝胶组纤维样变的程度最轻,二型胶原成分保留的最多,同时炎症反应最轻。关节软骨改良Manking’s评分显示对照组为0.83±0.69,NS组为8.83±1.57,HA组为5.67±2.35,HA-LA MS水凝胶组为3.17±0.69。OARSI评分结果显示对照组为2.33±1.25,NS组为15.33±2.92,HA组为9.67±3.54,HA-LA MS水凝胶组为5.67±1.34。两项组织学评分结果均提示,HA-LA MS水凝胶组对于早期OA的软骨退行性变有明显的治疗效果,且疗效优于大分子HA。研究结论 透明质酸-g-硫辛酸微球颗粒制成的可注射凝胶同传统大分子透明质酸对比,拥有更强的润滑性、抗氧化应激能力和拟制炎症作用,在体内能够有效延缓和控制早期膝骨关节炎软骨退变的进展,是一种理想的关节腔注射治疗制剂,可能代表了一种针对早期膝骨关节炎简便且有前景的治疗方法。
其他文献
结直肠癌(Colorectal Cancer,CRC)是临床上最常见的消化道恶性肿瘤之一,是全球第三大癌症死亡原因。随着生活水平的提高,饮食谱的改变以及医学的不断发展,我国CRC的发病率逐年上升,并且呈现出直肠癌比例升高、低位直肠癌比例增加以及发病年轻化等特点,对人们健康以及我国医疗卫生事业提出了严峻挑战。目前,对于局部进展期直肠癌(Locally Advanced Rectal Cancer,L
研究目的研究RNA结合蛋白PUM2对胸主动脉夹层疾病进展的影响和潜在的作用机制,探讨在胸主动脉夹层病程进展过程中进行干预,遏制疾病进展并预防相关并发症的可行性及有效性。研究方法本研究主要涉及临床样本、细胞功能和动物疾病模型三个层面。首先,在临床样本的检测当中,我们共采取了6例胸主动脉夹层患者的病变部位血管样本,应用Western blot、q RT-PCR和免疫组化的实验方法,明确RNA结合蛋白P
研究背景:肝缺血再灌注损伤(ischemia-reperfusion injury,IRI)是失血性休克、肝切除术和肝移植术后并发症及死亡的主要危险因素。肝IRI不仅可能造成肝功能障碍和肝衰竭,还可影响其他多种远端器官,引起肾脏、肺脏、肠道、胰腺、肾上腺、心肌等多种器官损伤,严重情况下,可造成多器官功能障碍综合征(multiple organ dysfunction syndrome,MODS)、
一、研究背景随着我国海洋事业的大力发展,海军建设不断迈向深蓝,海水溺水事故也不断引起人们的关注和重视。海水淹溺诱导的急性肺损伤(Seawater drowning-induced acute lung injury,SWD-ALI)是因海水吸入引起的气体交换屏障受损,导致大量液体渗出至肺泡间质、肺泡腔,并快速堆积形成急性肺水肿,甚至可能发展成为急性呼吸窘迫综合征。从分子机制入手研究海水淹溺诱导的急
目的:脊髓损伤是临床上的常见问题,目前尚缺乏有效治疗措施。由于神经组织受到创伤后功能进行性丢失,因此早期给予神经保护性干预十分重要。文献报道,木犀草素(LUT)对多种神经系统疾病具有治疗功效,但在脊髓损伤方面相关研究较少。本研究通过制备小鼠脊髓损伤模型,研究木犀草素在脊髓损伤中的干预作用;同时以NF-κB信号通路及NLRP3炎性小体介导的炎症反应为重点,探讨其相关分子机制,明确其神经保护作用。研究
研究背景与研究目的骨肉瘤(Osteosarcoma,OS)是儿童中最常见的原发恶性骨肿瘤,在全世界每年的发病率约为1-3/100万,占所有恶性肿瘤的百分之零点二,占原发性骨恶性肿瘤的百分之十五。新的辅助化学治疗及联合外科手术,仍为目前治疗骨肉瘤的标准方法,对于早期发现、未见转移的患者,该方案治疗后五年生存期可达到65%左右,而对于复发或转移病例其5年生存率仍在20%以下。了解骨肉瘤恶性生物学行为的
研究背景:性别畸形是指由于染色体、性腺和/或外生殖器解剖结构的异常发育而出现的一种先天性异常,其既往的分类方法较多且较为混乱。2006年,劳森-威尔金斯儿科内分泌学会和欧洲儿科内分泌学会将性别畸形定义为性发育异常(Disorders of sex development,DSD),并按照染色体核型分为46,XY DSD,46,XX DSD和性染色体DSD三大类。每一类又有各自的亚型,不同亚型之间的
研究背景:下肢浅静脉曲张是血管外科常见病之一,在欧美发达国家患病率高达10%-40%。我国成年人中发病率约为15%,女性患者多于男性,且随年龄增长患病率升高。患者最初临床表现为下肢浅静脉迂曲鼓胀、沉重不适。随疾病进展逐渐表现为皮肤水肿、足靴区色素沉着、难愈合性溃疡形成甚至出血,严重影响美观和日常生活质量,因此探讨安全有效且彻底的治疗下肢浅静脉曲张的方式具有重要的临床意义。下肢浅静脉曲张往往通过手术
【研究目的】1、探讨HOXA10基因对胰腺癌患者术后生存和复发的预测作用,建立临床预测模型;2、明确HOXA10基因对胰腺癌恶性生物学行为的影响,探讨相关机制。【研究方法】1、利用TCGA数据库,统计分析HOXA基因家族(HOXAs)在胰腺癌患者术后癌和正常组织中的表达情况,并分析HOXAs不同表达情况与总生存期(OS)和无病生存期(DFS)的关系。选取癌和正常组织表达明显有差异,或与预后明显相关
一、研究背景脑膜瘤是一种常见的中枢神经系统原发性肿瘤。尽管大部分脑膜瘤为良性肿瘤,手术切除后预后良好,但是对于高侵袭性的高级别脑膜瘤而言,手术全部切除难度大,且术后复发率高、预后差。即使在外科手术全部切除的脑膜瘤中,术后15年的肿瘤总复发率高居60%。随着人们生活水平的日益提高和平均寿命的延长,脑膜瘤患者的数量将会越来越多。目前尚无关于脑膜瘤治疗的特异性靶向药物,临床上对于高级别脑膜瘤的治疗,依然