【摘 要】
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目的:本研究以人肝癌细胞SMMC-7721作为研究对象,采用细胞形态学观察、细胞计数、MTS法、划痕实验、Western bolt等实验方法,观察无花果提取物（Fig Extract,FE）对人肝癌细胞的生长抑制作用和凋亡诱导作用。方法:体外培养人肝癌细胞SMMC-7721,取对数生长期细胞用于实验。将FE用RPMI.1640不完全培养基稀释成低浓度组（1.25ul/ml）,中浓度组（2.5ul/
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目的:本研究以人肝癌细胞SMMC-7721作为研究对象,采用细胞形态学观察、细胞计数、MTS法、划痕实验、Western bolt等实验方法,观察无花果提取物（Fig Extract,FE）对人肝癌细胞的生长抑制作用和凋亡诱导作用。方法:体外培养人肝癌细胞SMMC-7721,取对数生长期细胞用于实验。将FE用RPMI.1640不完全培养基稀释成低浓度组（1.25ul/ml）,中浓度组（2.5ul/ml）,高浓度组（5ul/ml）,并用RPMI.1640不完全培养基稀释75%酒精（5ul/ml）,设置阴性对照组。采用普通光学显微镜观察在药物处理6h、12h、24h、36h与48h后,不同浓度组FE处理前后细胞形态学变化,并在显微镜下计算贴壁细胞数量。采用MTS法检测在药物处理12h、24h、48h后,不同浓度组的FE作用前后对SMMC-7721细胞存活率的影响。采用划痕实验检测在药物处理48h后,不同浓度组的FE作用前后对SMMC-7721细胞迁移能力的影响。采用Western bolt法检测在药物作用24h后,不同浓度组的FE作用前后SMMC-7721细胞Caspase-3蛋白的表达。结果:随着FE浓度的增加及作用时间延长,SMMC-7721细胞伸展逐渐变差,细胞间隙逐渐增大,细胞空泡化,脱壁细胞增多,贴壁细胞减少,细胞周围碎片增多,显微镜下计数阴性对照组与对照组相比无统计学差异（P＞0.05）,不同浓度的FE浓度组在不同时间下与对照组相比均有统计学差异（P＜0.05）。MTS实验结果表明FE处理后的细胞存活率明显低于对照组（P＜0.05）,阴性对照组与对照组相比无统计学差异（P＞0.05）,细胞存活率在研究范围内与药物作用浓度及作用时间呈负相关。划痕实验结果表明FE处理后的细胞迁移面积明显低于对照组（P＜0.05）,阴性对照组与对照组细胞迁移状况良好,无统计学差异（P＞0.05）。Western bolt实验结果表明与随着FE浓度的增高,Caspase-3蛋白表达增高,对照组及阴性对照组Caspase-3蛋白无表达。结论:无花果提取物显著抑制SMMC-7721细胞生长,研究范围内其抑制作用与FE浓度及作用时间呈正相关,无花果提取物诱导SMMC-7721细胞凋亡,其凋亡诱导机制可能涉及到Caspase依赖性凋亡信号调节通路。
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