【摘 要】
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目的:探讨高氧致新生大鼠支气管肺发育不良（BPD）发生发展过程中是否存在肺组织端粒损伤,及端粒重复序列结合因子TRF1和TRF2在BPD中的动态表达及作用。方法:采用吸入氧浓度为85%的新生SD大鼠制备新生大鼠BPD模型（n=40）,对照组采用吸入空气的新生SD大鼠（n=40）,两组分别于实验后1d、3d、7d、14d每组随机选取10只处死,收集肺组织标本。进行肺组织HE染色观察病理学改变,采用辐
【基金项目】
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国家自然科学基金（NO.81571479）； 辽宁省教育厅基础研究项目重点实验室（NO.LZ2015070）；
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目的:探讨高氧致新生大鼠支气管肺发育不良（BPD）发生发展过程中是否存在肺组织端粒损伤,及端粒重复序列结合因子TRF1和TRF2在BPD中的动态表达及作用。方法:采用吸入氧浓度为85%的新生SD大鼠制备新生大鼠BPD模型（n=40）,对照组采用吸入空气的新生SD大鼠（n=40）,两组分别于实验后1d、3d、7d、14d每组随机选取10只处死,收集肺组织标本。进行肺组织HE染色观察病理学改变,采用辐射状肺泡计数（RAC）和肺泡间隔厚度评价肺泡发育程度,采用q PCR检测两组各检查点肺组织标本T/S比率（相对端粒长度,RTL）,分别应用免疫组织化学法观察TRF1、TRF2定位及表达,蛋白免疫印迹法（Western Blot）及实时荧光定量PCR（RT-PCR）检测肺组织TRF1和TRF2蛋白及基因的表达水平,双重免疫荧光观察TRF1、TRF2在II型细胞中的位置,Pearson相关分析用于TRF1、TRF2蛋白分别与RAC值的相关性分析。结果:与对照组相比,模型组肺组织标本相对端粒长度（T/S比率）在第3d开始缩短,持续到第14d达到最短。RAC值在对照组中逐渐升高,模型组RAC值从7d开始下降,持续至14d（P＜0.05）,肺泡间隔厚度从7d开始升高,14d达最高（P＜0.05）;免疫组织化学染色可见,TRF1、TRF2于肺泡上皮细胞和支气管上皮细胞的胞核内、胞浆均有明显定位,且模型组多于对照组;双重免疫荧光可见,14d时模型组TRF1、TRF2在II型细胞胞核及胞浆中均有明显表达,且多于对照组;与对照组相比,1～14d模型组TRF1、TRF2蛋白明显升高,但TRF1、TRF2的m RNA表达水平在高氧暴露的1～7d持续增加,并在14d时下降;结论:在BPD新生大鼠模型肺泡发育不良阶段存在端粒损伤,且随高氧暴露时间延长,损伤逐渐增加;还发现了TRF1、TRF2蛋白均呈表达上调状态,它们可能参与了BPD的发生、发展过程。
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