【摘 要】
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目的:探讨柿叶水提物（Water extract from persimmon leaves,WEPL）和柿寄生水提物（Water extract from persimmon parasitic,WEPP）对异烟肼（Isoniazid,INH）及利福平（Rifampicin,RFP）所致小鼠肝损伤的保护作用及其可能的保护机制。方法:在各肝损伤模型实验研究中,均将90只健康雄性昆明种小鼠适应性喂养
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目的:探讨柿叶水提物（Water extract from persimmon leaves,WEPL）和柿寄生水提物（Water extract from persimmon parasitic,WEPP）对异烟肼（Isoniazid,INH）及利福平（Rifampicin,RFP）所致小鼠肝损伤的保护作用及其可能的保护机制。方法:在各肝损伤模型实验研究中,均将90只健康雄性昆明种小鼠适应性喂养一周后随机分为9组,每组10只,分别为正常对照组（NC组）,INH或INH+RFP（IR）模型组,联苯双酯阳性组（BPDC组）,WEPL高剂量组（WEPLH组）,WEPL中剂量组（WEPLM组）,WEPL低剂量组（WEPLL组）,WEPP高剂量组（WEPPH组）,WEPP中剂量组（WEPPM组）,WEPP低剂量组（WEPPL组）。除NC组给予等容积生理盐水（NS）外,其他各组均灌胃给予INH（150mg/kg）或INH+RFP（各150mg/kg）建立小鼠肝损伤模型;除NC组和模型组给予蒸馏水外,其他各组同时分别灌胃给予联苯双酯（200 mg/kg）,高、中、低剂量的WEPL（40、20、10g/kg）和高、中、低剂量的WEPP（40、20、10g/kg）,连续给药10d。末次给药后16h称小鼠体质量,从眼球收集血液,解剖并分离出肝、脾及胸腺,常规检测血清中谷丙转氨酶（ALT）和谷草转氨酶（AST）等肝功能血清标记物,采用酶联免疫法（ELISA）检测血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）和白细胞介素-10（IL-10）等炎症标志性指标;并检测肝组织匀浆中的肝脏氧化应激指标如丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、还原型谷胱甘肽（GSH）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）等;采用苏木素-伊红（HE）染色后镜下观察肝组织病理改变;采用免疫组织化学法检测肝组织中核转录因子-κB（NF-κB）和天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3（Caspase-3）的蛋白表达。结果:（1）与NC组相比:模型组小鼠血清中的ALT、AST、ALP、TBA、LDH、TNF-α、IL-6水平显著升高（P＜0.01）,IL-10水平显著降低（P＜0.01）;模型组小鼠肝组织中的MDA、NO水平显著升高（P＜0.01）,SOD、GSH、GSH-Px显著降低（P＜0.01）;HE染色结果表明,模型组小鼠肝组织出现部分肝索排列稍紊乱,肝细胞水肿,体积增大,呈弥漫性颗粒变性,有明显的玻璃样变,嗜酸性变,可见部分细胞核皱缩聚集呈点状和片状坏死灶。肝组织免疫组化结果显示,NF-κB、Caspase-3蛋白表达均明显上调。（2）与模型组相比:1)WEPL和WEPP高、中剂量组小鼠血清ALT、AST、ALP、TBA、LDH、TNF-α、IL-6水平均显著降低（P＜0.05或P＜0.01）,IL-10水平均显著升高（P＜0.05或P＜0.01）。2)WEPL和WEPP高、中剂量组小鼠肝组织中的MDA、NO水平均显著降低（P＜0.05或P＜0.01）,SOD、GSH、GSH-Px水平均显著升高（P＜0.05或P＜0.01）。3)HE染色结果表明,WEPL和WEPP高、中剂量组小鼠肝脏组织病理学改变均明显减少,WEPLL、WEPPL也有一定程度改善;免疫组化结果表明,WEPL和WEPP高、中剂量组小鼠肝脏组织NF-κB P65,Caspase-3蛋白表达显著下调。结论:WEPL和WEPP对INH单用或与RFP联用所致小鼠肝损伤具有保护作用,作用机制可能与其抗脂质过氧化、清除氧自由基、下调炎症反应及下调NO水平等有关。
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